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超微量分光光度計(jì)如何使用有哪些注意事項(xiàng) 光度計(jì)是如何工作的

時(shí)間:2020-07-11    來(lái)源:儀多多儀器網(wǎng)    作者:儀多多商城     

超微量分光光度計(jì)如何使用,有哪些注意事項(xiàng)?

  一:超微量分光光度計(jì)是精密光學(xué)儀器,出廠前經(jīng)過(guò)精細(xì)的裝配和調(diào)試,如果能對(duì)儀器進(jìn)行恰當(dāng)?shù)木S護(hù)和保養(yǎng),不僅能保證儀器的可靠性和穩(wěn)定性,也可以延長(zhǎng)儀器使用壽命。

  二:超微量分光光度計(jì)常用于定量溶于緩沖液的寡核苷酸,單鏈、雙鏈DNA,以及RNA。核酸的高吸收峰的吸收波長(zhǎng)260 nm。每種核酸的分子構(gòu)成不一,因此其換算系數(shù)不同。定量不同類(lèi)型的核酸,事先要選擇對(duì)應(yīng)的系數(shù)。如:1OD 的吸光值分別相當(dāng)于50μg/ml的dsDNA,37μg/ml的ssDNA,40μg/ml的RNA,30μg/ml的Olig。測(cè)試后的吸光值經(jīng)過(guò)上述系數(shù)的換算,從而得出相應(yīng)的樣品濃度。

  三:超微量分光光度計(jì)的工作原理是利用分光光度法對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定量定性分析的儀器,常用于核酸,蛋白定量以及細(xì)菌生長(zhǎng)濃度的定量。無(wú)論在物理學(xué)、化學(xué)、生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、材料學(xué)、環(huán)境科學(xué)等科學(xué)研究領(lǐng)域 ,還是在化工、醫(yī)藥、環(huán)境檢測(cè)、冶金等現(xiàn)代生產(chǎn)與管理部門(mén) ,紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)督有廣泛而重要的應(yīng)用。

  四:超微量分光光度計(jì)是精密光學(xué)儀器,正確安裝、使用和保養(yǎng)對(duì)保持儀器良好的性能和保證測(cè)試的準(zhǔn)確度有重要作用。下面分享一些超微量分光光度計(jì)不可不知的保養(yǎng)常識(shí)。

  (1)儀器工作環(huán)境的要求

  分光光度計(jì)對(duì)工作環(huán)境的要求如下。

 ?、賰x器應(yīng)安放在干燥的房間內(nèi),使用溫度為5~35℃.相對(duì)濕度不超過(guò)85%。

 ?、趦x器應(yīng)放置在堅(jiān)固平穩(wěn)的工作臺(tái)上,且避免強(qiáng)烈的振動(dòng)或持續(xù)的振動(dòng)。

 ?、凼覂?nèi)照明不宜太強(qiáng),且應(yīng)避免直射日光的照射。

  ④電扇不宜直接向儀器吹風(fēng),以防止光源燈因發(fā)光不穩(wěn)定而影響儀器的正常使用。

 ?、荼M量遠(yuǎn)離高強(qiáng)度的磁場(chǎng)、電場(chǎng)及發(fā)生高頻波的電器設(shè)備。

  ⑥供給儀器的電源電壓為AC 220V±22V,頻率為50Hz±1Hz,并必須裝有良好的接地線。推薦使用功率為1000w以上的電子交流穩(wěn)壓器或交流恒壓穩(wěn)壓器,以加強(qiáng)儀器的抗干擾性能。

 ?、弑苊庠谟辛蚧瘹涞雀g性氣體的場(chǎng)所使用。

  (2)儀器的日常維護(hù)和保養(yǎng)

 ?、俟庠础9庠吹膲勖邢?,為了延長(zhǎng)光源使用壽命,在不使用儀器時(shí)不要開(kāi)光源燈,應(yīng)盡量減少開(kāi)關(guān)次數(shù)。在短時(shí)問(wèn)的工作間隔內(nèi)可以不關(guān)燈。剛關(guān)閉的光源燈不能立即重新開(kāi)啟。儀器連續(xù)使用時(shí)間不應(yīng)超過(guò)3h。若需長(zhǎng)時(shí)間使用,好間歇30min。如果光源燈亮度明顯減弱或不穩(wěn)定,應(yīng)及時(shí)更換新燈。更換后要調(diào)節(jié)好燈絲位置,不要用手直接接觸窗口或燈泡,避免油污沾附。若不小心接觸過(guò),要用無(wú)水乙醇擦拭。

 ?、趩紊?。單色器是儀器的核心部分,裝在密封盒內(nèi),不能拆開(kāi)。選擇波長(zhǎng)應(yīng)平衡地轉(zhuǎn)動(dòng),不可用力過(guò)猛。為防止色散元件受潮生霉,必須定期更換單色器盒干燥劑(硅膠)。若發(fā)現(xiàn)干燥劑變色,應(yīng)立即更換。

 ?、畚粘亍1仨氄_使用吸收池,應(yīng)特別注意保護(hù)吸收池的兩個(gè)光學(xué)面。

 ?、軝z測(cè)器。光電轉(zhuǎn)換元件不能長(zhǎng)時(shí)間曝光,且應(yīng)避免強(qiáng)光照射或受潮積塵。

 ?、莓?dāng)儀器停止工作時(shí),必須切斷電源。

 ?、逓榱吮苊鈨x器積灰和沾污,在停止工作時(shí),應(yīng)蓋上防塵罩。

 ?、邇x器若暫時(shí)不用要定期通電,每次不少于20~30min,以保持整機(jī)呈干燥狀態(tài),并且維持電子元器件的性能。

   原子吸收分光光度計(jì)根據(jù)物質(zhì)基態(tài)原子蒸汽對(duì)特征輻射吸收的作用來(lái)進(jìn)行金屬元素分析。它能夠靈敏可靠地測(cè)定微量或痕量元素。一般由四大部分組成,即光源(單色銳線輻射源)、試樣原子化器、單色儀和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)(包括光電轉(zhuǎn)換器及相應(yīng)的檢測(cè)裝置)。
 
  工作原理:
  當(dāng)空心陰極燈通過(guò)內(nèi)部的低壓氣體在兩個(gè)電極之間產(chǎn)生放電現(xiàn)象時(shí),陰極會(huì)受到大量電子、加速?zèng)_向電極表面的帶電氣體離子(也就是充入氣體的離子)的轟擊。
 
  這些離子的能量非常強(qiáng),以至于可以促使陰極材料的原子從表面脫離或“濺射”進(jìn)入等離子區(qū)。
 
  濺射的離子在此處還會(huì)與其它高能的物質(zhì)相互碰撞。碰撞的結(jié)果導(dǎo)致能量轉(zhuǎn)移,金屬原子躍遷至激發(fā)態(tài)。由于激發(fā)態(tài)不穩(wěn)定,原子會(huì)自發(fā)回到基態(tài),同時(shí)發(fā)射出特定波長(zhǎng)的共振線。
 
  很多元素都具有多條共振線供分析使用。
 
  原子吸收分光光度計(jì)的主要特點(diǎn):
  1、高度的自動(dòng)化功能,程度地滿足了使用者的需求;
 
  2、內(nèi)置優(yōu)化參數(shù),便于用戶快速掌握;
 
  3、波長(zhǎng)自動(dòng)掃描、自動(dòng)尋峰,自動(dòng)切換光譜帶寬,自動(dòng)調(diào)整負(fù)高壓、燈電流等,系統(tǒng)化設(shè)置或單項(xiàng)設(shè)置,操作靈活;
 
  4、乙炔氣泄漏報(bào)警、火焰實(shí)時(shí)監(jiān)控、熄火自動(dòng)保護(hù),出現(xiàn)其他異常時(shí)自動(dòng)斷電保護(hù),確保操作人員和儀器的安全;
 
  5、優(yōu)異的可擴(kuò)展性,可簡(jiǎn)捷應(yīng)對(duì)分析樣品的多樣化和復(fù)雜化,輕松滿足多種分析需求;
 
  6、采用六燈架自動(dòng)切換裝置,滿足多種元素測(cè)試需求;
 
  7、采用半透半反裝置,氘燈扣背景時(shí),樣品光束和背景光束能量自動(dòng)平衡;
 
  8、采用經(jīng)典設(shè)計(jì)的霧化器和全鈦燃燒頭,燃燒穩(wěn)定、原子化效率高,保證了分析準(zhǔn)確度。



    分光光度計(jì)是利用物質(zhì)對(duì)光的選擇性吸收的特性,以較純的單色光作為入射光,測(cè)定物質(zhì)對(duì)光的吸收,從而對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定性或定量分析的儀器。在使用過(guò)程中常常會(huì)出現(xiàn)測(cè)量誤差,這些誤差又是如何產(chǎn)生的呢?下面小編為大家介紹分光光度計(jì)測(cè)量誤差產(chǎn)生原因。
    1、復(fù)色光對(duì)比耳定律的偏離
    比耳定律成立的前提條件是人射光是單色光,但是精度再高的儀器,即使是雙單色器的分光光度計(jì),也只能獲得近乎單色的光,無(wú)法獲得純單色光,它仍然含有狹窄光通帶,具有復(fù)色光的性質(zhì)。而復(fù)色光會(huì)導(dǎo)致比耳定律的正或負(fù)偏離。
    固定狹縫的紫外分光光度計(jì)光譜帶寬一般為1nm或2nm,可調(diào)狹縫的可以做到0、1nm;可見(jiàn)分光光度計(jì)帶寬6nm、snm,甚至十幾納米。
    光譜帶寬應(yīng)該是越小越好,但是,隨著光譜分辨率的提高,儀器的靈敏度降低,所以,選擇儀器時(shí)要綜合考慮各種條件的影響。當(dāng)溶液濃度較小且單色光較純時(shí),可近似認(rèn)為符合比耳定律。
    2、雜散光的影響
    雜散光是指進(jìn)人檢測(cè)器的處于待測(cè)波長(zhǎng)光譜帶寬范圍外的其他波長(zhǎng)組分,它是光譜測(cè)量中誤差的主要來(lái)源。
    產(chǎn)生原因有:
    分光光度計(jì)的色散元件、反射鏡、透鏡及單色器內(nèi)壁灰塵等。在分光光度計(jì)工作波段邊緣波長(zhǎng)處,由于單色器透光率、光源輻射強(qiáng)度、檢測(cè)器靈敏度都較低,雜散光的影響更為顯著。
    雜散光限制儀器的分析上限可引起嚴(yán)重的測(cè)量誤差,實(shí)際工作中,在定量分析時(shí),一般在吸收峰或其附近處測(cè)量樣品吸光度,如果在分析波長(zhǎng)處含有雜散光,這時(shí)樣品的透光率較小,而雜散光大部分透過(guò),使測(cè)量吸光度低于真實(shí)吸光度。
    3、儀器噪聲對(duì)測(cè)t的影響
    儀器噪聲也是儀器的一個(gè)重要指標(biāo),它表征儀器做稀溶液的能力。是疊加在待測(cè)量的分析信號(hào)中的不需要的信號(hào),掃描100%T和0%T線,可觀察到分光光度計(jì)的絕對(duì)噪聲水平,如果儀器噪聲較大,會(huì)掩蓋較小的測(cè)量信號(hào),一般用噪音的二倍來(lái)表示儀器的靈敏度。
    4、波長(zhǎng)和吸光度準(zhǔn)確度
    樣品的每一個(gè)值都是在一定的波長(zhǎng)下測(cè)得的,如果,波長(zhǎng)誤差很大,測(cè)出的值肯定不準(zhǔn)。吸光度準(zhǔn)確度也是用戶對(duì)儀器的直接要求,更應(yīng)引起足夠的重視。
    國(guó)家計(jì)量檢定規(guī)程規(guī)定雙光束紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)透射比準(zhǔn)確度為A級(jí)士0、6%,B級(jí)土1、0%。







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