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高效液相色譜儀操作技巧及操作規(guī)程

時(shí)間:2020-04-05    來源:儀多多儀器網(wǎng)    作者:儀多多商城     

高效液相色譜儀操作技巧

  任何顆粒物進(jìn)進(jìn)高效液相色譜儀后都會(huì)在柱子進(jìn)口端被篩板擋住,最后的結(jié)果是將柱子堵塞,表現(xiàn)出的特征是系統(tǒng)壓力增加并使色譜峰變形。因此,要采取各種預(yù)防措施,包括操縱步驟和商品儀器自身的各種過濾設(shè)計(jì),努力防止或減少顆粒物進(jìn)進(jìn)高效液相色譜儀中,從而延長(zhǎng)儀器和色譜柱的使用壽命,并進(jìn)步數(shù)據(jù)的可靠性。

高效液相色譜儀.jpg

  在高效液相色譜儀中,顆粒物的主要來源有三個(gè)途徑:活動(dòng)相、被測(cè)樣品和儀器系統(tǒng)部件的磨損物。

  1、被測(cè)樣品

  使用針筒式過濾器不可能100%得到通過過濾器的被測(cè)樣品,總會(huì)或多或少的丟失。丟失來自這樣幾方面:過濾器濾膜的吸附、過濾器濾出的顆粒物上的吸附、針筒式濾膜過濾器與針筒連接處的滲漏等。

  2、活動(dòng)相

  無論是高效液相色譜儀HPLC級(jí)的水還是在實(shí)驗(yàn)室使用超純水凈化系統(tǒng)制備的水,最后一步也是通過0.2μm微孔濾膜。任何一種緩沖液中加進(jìn)了固體物,必然活動(dòng)相過濾將。少量雜質(zhì)顆粒存在于活動(dòng)相中必然成為殘?jiān)?/p>

  解決辦法:

  2.1.活動(dòng)相制備僅采用HPLC級(jí)液體時(shí)不需要過濾,反之所有活動(dòng)相組成在使用前必須過濾。

  2.2.在連接儲(chǔ)液瓶和泵的輸液管的末端進(jìn)口采用下沉式過濾器(常見材質(zhì)有熔融玻璃砂芯濾板和微孔金屬的兩種)也是很重要的。這個(gè)過濾器的規(guī)格為≥10μm的微孔物質(zhì),所以它不能取代活動(dòng)相過濾步驟,但是它能除往系統(tǒng)中的塵土并保證儲(chǔ)液瓶、輸液管使用的可靠性。

  2.3.推薦在HPLC系統(tǒng)中采用一個(gè)0.45或0.5μm的在線多孔過濾器,接在自動(dòng)進(jìn)樣器和柱子之間,即使已使用了保護(hù)柱。這個(gè)在線過濾器將成為擋板代替柱頭的濾板,而且如采用一個(gè)玻璃砂芯濾板,既便宜,更換又方便(幾分鐘就可更換)。若采用在線過濾,高效液相色譜儀檢測(cè)每批樣品開始前記錄下壓力值,當(dāng)壓力上升一定值,例如25%或增加500psi,應(yīng)該更換玻璃砂芯濾板了,更換以后沖洗幾分鐘系統(tǒng)將恢復(fù)到原來的壓力值。

  3、儀器系統(tǒng)部件的磨損物

  最后,在高效液相色譜儀HPLC系統(tǒng)中顆粒物的另一個(gè)主要來源是輸液泵密封墊和進(jìn)樣閥旋轉(zhuǎn)軸的磨損。關(guān)于輸液泵密封墊的磨損更換有兩種不同建議。

  3.1.在一般實(shí)驗(yàn)室中輸液泵密封墊通常使用壽命為六個(gè)月到一年,因此建議半年或一年更換這些密封墊。

  3.2.原裝密封墊的密封效果建議,更換以后輕易引起活動(dòng)相滲漏。所以,只要不漏液就不要輕易更換密封墊。

標(biāo)簽: 高效液相色譜儀
高效液相色譜儀 高效液相色譜儀操作技巧_高效液相色譜儀

高效液相色譜儀的原理特點(diǎn)

    高效液相色譜儀可以完成二元高壓梯度洗脫,也可以拓展為制備系統(tǒng),采用高壓混合器連接兩個(gè)高壓恒流泵,利用RS232通訊,即可實(shí)現(xiàn)梯度分析;


    便于用戶自由選擇與搭配,混合器材主要由不銹鋼、生物惰性PEEK等構(gòu)成,用途廣泛;


    可廣泛應(yīng)用于研究開發(fā)、醫(yī)藥檢驗(yàn)、食品檢測(cè)、化工分析、環(huán)境監(jiān)測(cè)等眾多分析領(lǐng)域。


    高效液相色譜儀分離原理:液-液分配(Liquid-liquid Partition Chromatography)及化學(xué)鍵合相色譜(Chemically Bonded Phase Chromatography) 流動(dòng)相和固定相都是液體。


    流動(dòng)相與固定相之間應(yīng)互不相溶(極性不同,避免固定液流失),有一個(gè)明顯的分界面。


    當(dāng)試樣進(jìn)入色譜柱,溶質(zhì)在兩相間進(jìn)行分配。達(dá)到平衡時(shí),高效液相色譜儀報(bào)價(jià),服從于高效液相色譜計(jì)算公式;


    6種定量計(jì)算方法:歸一法、修正歸一法、帶比例因子的修正歸一法、內(nèi)標(biāo)法、外標(biāo)法,高效液相色譜儀適用范圍,以及指數(shù)計(jì)算法。


    高效液相色譜儀特點(diǎn):


    1、梯度洗脫內(nèi)部軟件可自控制,編輯、存貯60個(gè)梯度方法,運(yùn)行復(fù)雜的梯度程序;


    2、泵形式:串聯(lián)雙柱塞 浮動(dòng)式密封圈;泵頭自沖洗功能,泵無須手動(dòng)排空即可輸液“自吸式單向閥”技術(shù),可延長(zhǎng)密封圈使用壽命;


    3、光路系統(tǒng)采用精密定位結(jié)構(gòu)和獨(dú)特的散熱技術(shù),高效的光學(xué)系統(tǒng)和數(shù)字過濾;


    4、程序化的溶劑類和壓縮因子,可自動(dòng)補(bǔ)償;完整的預(yù)清洗功能,更于快速溶劑更換;


    5、波長(zhǎng)調(diào)節(jié)功能:既可由鍵盤面板控制也可由程序軟件設(shè)定,全封閉集成型光電檢測(cè)元件,無需任何機(jī)械部分調(diào)整即可選擇或改變波長(zhǎng);


    6、光源運(yùn)行時(shí)間在線監(jiān)測(cè)并顯示,方便用戶確定光源壽命;


    7、三條流量校正曲線以及特有的多點(diǎn)參數(shù)校正,保障了極高的流量準(zhǔn)確性;


    8、梯度:高壓2-3元;梯度方式:高壓,梯度洗脫內(nèi)部軟件可自控制,可通過PC機(jī)及泵控制;


    9、實(shí)時(shí)顯示樣品池和參比池能量,方便判斷光源和流通池狀態(tài);


    10、紫外檢測(cè)器具有自動(dòng)波長(zhǎng)定位調(diào)整,自動(dòng)調(diào)零,多量程輸出選擇;


    11、智能化高,可實(shí)現(xiàn)網(wǎng)絡(luò)化平臺(tái)監(jiān)控,提高了你的QC效益;


    12、自動(dòng)化,讓你從繁鎖的分析操作中解放出更多的時(shí)間。

標(biāo)簽: 高效液相色譜儀
高效液相色譜儀 高效液相色譜儀的原理特點(diǎn)_高效液相色譜儀

高效液相色譜儀儀各部分維護(hù)

  1、流動(dòng)相的抽濾要求

  色譜純?cè)噭?,二次蒸餾水,緩沖鹽一定要過濾。

  2、吸濾頭

  特殊情況下可拆下濾頭抽取以判斷其中是否堵塞;亦可用注射器吸取流動(dòng)相通過吸濾頭打出以判斷其是否堵塞。若有堵塞情況可用異丙醇超聲波清洗;清洗不成功則需要更換。

  3、單向閥

  如遇到泵壓不穩(wěn)或流動(dòng)相不能抽取,則可能是單向閥出現(xiàn)問題,卸下用異丙醇超聲波清洗,清洗時(shí)須按其安裝的反相放置在小燒杯中,切記不可與安裝方向倒置超洗!

  4、泵頭

  泵頭漏液或出現(xiàn)其它故障一般要申請(qǐng)維修(如漏液,或更換柱塞桿及其密封墊等)。

  5、過濾片

  當(dāng)色譜峰出現(xiàn)異常情況時(shí),有可能是此部件被污染,拆下用異丙醇超洗或更換過濾墊片。

  6、排液閥

  此處不能完全密封或漏液時(shí)一般是其中的墊片污染或磨損,可卸下后取出其墊片用異丙醇超聲波清洗或更換墊圈。

  7、手動(dòng)進(jìn)樣器

  平時(shí)應(yīng)注意用二次蒸餾水和甲醇在裝載狀態(tài)及進(jìn)樣分析狀態(tài)清洗;如出現(xiàn)漏液現(xiàn)象,原因極可能為轉(zhuǎn)子密封墊磨損或污染,一般須申請(qǐng)維修或更換配件。

  8、流通池

  在色譜峰不正常時(shí)可能是此部件被污染可拆卸后取出其中的墊片用異丙醇超洗(可根據(jù)說明書進(jìn)行操作或申請(qǐng)維修)。

  9、工作站

  出現(xiàn)死機(jī)可重啟計(jì)算機(jī);不正常運(yùn)行時(shí),首先可更換電腦測(cè)試其硬件故障;或在本機(jī)上重新插撥接口、重新安裝軟件。

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高效液相色譜儀 高效液相色譜儀儀各部分維護(hù)_高效液相色譜儀

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