由美國國家航空航天局 (NASA) 發(fā)送到火星的“好奇號(hào)”火星車已成功完成車載分析儀器的全面檢測。儀器的任務(wù)是對火星上的土壤和氣體進(jìn)行采樣，以期找到火星上存在生命的證據(jù)。
火星車上裝配有一臺(tái)氣相色譜儀，包含兩根 Agilent J&W UltiMetal 氣相色譜柱：CP-Chirasil-DEX CB 色譜柱可用于檢測土壤中不同種類的氨基酸，CarboBOND 色譜柱可以鑒定大氣中的氣體。
這兩種色譜柱都由安捷倫在荷蘭的米德爾堡工廠制造。
儀器的檢測結(jié)果顯示，火星土壤中存在一些簡單的化合物，但沒有確切來源于火星的有機(jī)（含碳化合物）分子。“好奇號(hào)”火星車仍在尋找有機(jī)分子比如氨基酸的存在，我們知道，沒有有機(jī)分子就不會(huì)存在生命。
一旦發(fā)現(xiàn)這類分子，下一個(gè)任務(wù)將是確定其來源。如果沒有發(fā)現(xiàn)，“好奇號(hào)”會(huì)轉(zhuǎn)移到其它更有可能發(fā)現(xiàn)有機(jī)分子的地點(diǎn)，或是從更深的土壤中采樣，脆弱的有機(jī)分子可能會(huì)保存在那兒。
未來兩年“好奇號(hào)”將在火星表面巡游，沿途分析樣品，展示“將實(shí)驗(yàn)室?guī)У綐颖粳F(xiàn)場”的極其方便的檢測。
無論氣相還是液相，色譜柱都是分離的核心。液相色譜柱的固定相可以說是五花八門，有C18，C8，C4，苯基柱，氰基柱，氨基柱等等。色譜柱使用的好壞，直接關(guān)系到分析分離的結(jié)果，我們都知道氨基柱有使用壽命短等問題，今天在這里給大家?guī)戆被氖褂镁S護(hù)指南，希望通過更好的維護(hù)使用，讓我們手中的色譜柱發(fā)揮出更大的作用。
說起氨基柱，大家熟悉的是拿它來做糖的分析。這是一個(gè)典型的HILIC模式。除了HILIC模式以外，氨基柱還可以用做正相和弱陰離子交換兩種模式?？梢哉f應(yīng)用范圍和模式非常廣。
ThermoFisher色譜柱系列大家族中擁有三款氨基鍵合相的色譜柱，分別是Hypersil GOLD Amino、Syncronis Amino和Hypersil APS-2。有人會(huì)問，都是氨基柱，他們的區(qū)別又在哪里呢?
讓小編來給大家一一做個(gè)介紹。Hypersil Gold Amino這款氨基柱具有更對稱的峰型，在生產(chǎn)工藝上有更致密的鍵合技術(shù)，硅膠表面殘存的硅醇基數(shù)量低。Syncronis Amino這款氨基柱金屬雜質(zhì)含量在同類色譜柱中低，能夠帶來更高的柱效,而Hypersil APS-2這款氨基柱在分離多組分化合物時(shí)更具優(yōu)勢，并且在美國藥典和歐洲藥典中多有應(yīng)用。說了這么多我們看看下面該如何使用維護(hù)。
保存液
（Gold Amino和Syncronis Amino）出廠保存液為乙醇，APS-2柱出廠保存液為：異辛烷：乙醇：水=85:14.7:0.3，新色譜柱如果使用反相流動(dòng)相條件，請充分置換色譜柱內(nèi)正相溶劑。
活化
新色譜柱如果使用HILIC模式，使用前請使用異丙醇小流速過夜平衡色譜柱。流速建議0.1mL/min,之后再轉(zhuǎn)換到100%乙腈沖洗20柱體積，然后轉(zhuǎn)換到和流動(dòng)相相同比例的不含鹽的乙腈水體系沖洗20柱體積。
沖洗
用乙腈：水=60:40條件對色譜柱進(jìn)行清洗，清洗時(shí)，不建議水相比例超過40%，過高使用水相容易導(dǎo)致鍵合相水解。
色譜柱再生
當(dāng)色譜柱經(jīng)過長時(shí)間使用，柱效很低時(shí)，可以對色譜柱再生處理，用乙腈：水（水中加入0.05%氨水）=60:40條件沖洗30柱體積。
保存
一個(gè)月以內(nèi)的保存，請使用與所選用流動(dòng)相組成相同的有機(jī)溶劑和水的混合溶液（不含酸、無機(jī)鹽）進(jìn)行置換，請避免只用水進(jìn)行置換；一個(gè)月以上的長期保存，在進(jìn)行了上述處理之后，請用乙腈置換并保存。
氨基柱糖類的分析
1
請?jiān)O(shè)定乙腈/水的流動(dòng)相條件。乙腈的濃度越高，則對糖的保留能力越強(qiáng)。
2
若采用含甲醇或緩沖鹽的流動(dòng)相，峰會(huì)展寬。
3
若將糖的水溶液作為樣品注入，譜峰會(huì)展寬。請使用含乙腈50%以上的溶劑來配制糖類樣品。
4
曾在酸性條件下使用過的色譜柱，糖類分析的保留時(shí)間、峰形會(huì)發(fā)生變化。
離子型物質(zhì)的分析
1
請?jiān)O(shè)定乙腈/磷酸緩沖液且具有一定pH值的流動(dòng)相條件。
2
考察流動(dòng)相條件時(shí)，按照pH由高到低的順序進(jìn)行考察。如果曾經(jīng)在低pH下使用，填料的表面將無法回到初始狀態(tài)。
3
有時(shí)需要長時(shí)間平衡色譜柱(24小時(shí)以上)。平衡所需時(shí)間與通液量和鹽濃度緊密相關(guān)，因此，時(shí)間緊急時(shí)請?zhí)岣吡魉?，或pH不變而增加流動(dòng)相的鹽濃度來進(jìn)行平衡。
柱效(columnefficiency)，是指色譜柱保留某一化合物而不使其擴(kuò)散的能力。柱效能是一支色譜柱得到窄譜帶和改善分離的相對能力。
柱效，從名字上理解是色譜柱的分離效果。色譜柱的有效塔板數(shù)越大或有效的塔板高度越低，色譜柱的柱效越好，類似于每個(gè)塔板的分離效率相同，有效塔板數(shù)越多，最終得到的物質(zhì)越純。
柱效率是指溶質(zhì)通過色譜柱之后其區(qū)域?qū)挾仍黾恿硕嗌伲c溶質(zhì)在兩相中的擴(kuò)散及傳質(zhì)情況有關(guān)，這是所謂色譜的動(dòng)力學(xué)過程。
怎么計(jì)算和直觀的提現(xiàn)?
從塔板概念評價(jià)柱效
根據(jù)塔板理論，可以計(jì)算一根色譜柱所達(dá)到的理論塔板數(shù)，或表達(dá)為每米理論塔板數(shù)n/m。把相當(dāng)于一個(gè)理論塔板的柱子長度稱作理論塔板高度H，通常采用有效塔板數(shù)N和有效塔板高度L來表達(dá)柱效，W為峰寬,W1/2為半峰寬：
N=16(Tr/W)^2
=5.54(Tr/W(1/2))^2
=L/H
顯然，N值越大，或H值越小，柱效越高。分散效果主要取決于所選擇的固定相。
從柱的算公式上我們可以看出柱效主要跟理論塔板數(shù)和柱長有關(guān)系。我們來解釋一下理論塔板數(shù)。
理論塔板數(shù)(theoreticalplatenumber)，N是色譜柱效的參數(shù)之一,用于定量表示色譜柱的分離效率(簡稱柱效)。N取決于固定相的種類、性質(zhì)(粒度、粒徑分布等)、填充狀況、柱長、流動(dòng)相的種類和流速及測定柱效所用物質(zhì)的性質(zhì)。如果峰形對稱并符合正態(tài)分布，N可近似表示為：
理論塔板數(shù)=5.54(保留時(shí)間/半高峰寬)2(2是平方)
柱效率用理論塔板數(shù)定量地表示：N=16*(t/w)2。其中，t是溶質(zhì)從進(jìn)樣到最大洗脫峰出現(xiàn)的時(shí)間，w為該溶質(zhì)的洗脫峰在基線處的寬度。在一色譜柱中用相同的洗脫條件時(shí)候，不同化合物的滯留時(shí)間與其洗脫峰寬度之比接近常數(shù)。因此理論塔板數(shù)大的色譜柱效率高。當(dāng)然，N的大小和柱子長度有密切關(guān)系：理論塔板高度H=柱長/N，用H可以衡量單位長度的色譜柱的效率，H越小，則色譜柱效率越高。。。N為常量時(shí)，W隨tR成正比例變化。在一張多組分色譜圖上，如果各組份含量相當(dāng)，則后洗脫的峰比前面的峰要逐漸加寬，峰高則逐漸降低。
用半峰寬計(jì)算理論塔板數(shù)比用峰寬計(jì)算更為方便和常用，因?yàn)榘敕鍖捀菀诇?zhǔn)確測定，尤其是對稍有拖尾的峰。
N與柱長成正比，柱越長，N越大。用N表示柱效時(shí)應(yīng)注明柱長，，如果未注明，則表示柱長為1米時(shí)的理論塔板數(shù)。(一般HPLC柱的N在1000以上。)若用調(diào)整保留時(shí)間(tR’)計(jì)算理論塔板數(shù)，所得值稱為有效理論塔板數(shù)(N有效或Neff)=16(tR’/W)
離子色譜柱的柱效一般由硫酸根的理論塔板數(shù)來計(jì)，理論塔板數(shù)可以由色譜儀工作站直接讀出，一般離子色譜柱的柱效大于1000個(gè)塔板數(shù).
柱效下降會(huì)有什么現(xiàn)象?
1.看峰分離度，分離度直接關(guān)系測試結(jié)果準(zhǔn)確性，可以判斷柱效是否下降，柱效下降分離度一般會(huì)變差。
2.測定色譜柱的塔板數(shù)來判斷
3.通過壓力變化和出峰時(shí)間來判斷，一般柱效下降時(shí)伴隨著柱壓的升高和降低，此時(shí)出峰的時(shí)間也會(huì)和之前有很大差異。
4.還可以根據(jù)新的柱子的保留時(shí)間判斷,看重復(fù)性,平行性如何.
5.通過譜圖峰型的變化，是否有嚴(yán)重前伸和拖尾現(xiàn)象，如果峰型很差了，柱效已經(jīng)下降了
柱效下降后如何來提高柱效。
離子交換柱長時(shí)間在緩沖溶液中使用和進(jìn)樣,將導(dǎo)致色譜柱離子交換能力下降,.用稀酸緩沖溶液沖洗可以使陽離子柱再生,反之,用稀堿緩沖溶液沖洗可以使陰離子柱再生.另外,還可以選擇能溶解柱內(nèi)污染物的溶劑為流動(dòng)相做正方向和反方向沖洗.但再生后的色譜柱柱效是不可能恢復(fù)到新柱的水平的.如果柱子裝反了,可以調(diào)回來,但可能會(huì)造成柱內(nèi)擔(dān)體塌陷.在不得已的情況下盡量不要反裝色譜柱。
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