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厭氧培養(yǎng)箱的應用案列 厭氧培養(yǎng)箱技術指標

時間:2020-07-15    來源:儀多多儀器網(wǎng)    作者:儀多多商城     
  厭氧菌在有氧的情況下不能生長。要培養(yǎng)厭氧菌,必須創(chuàng)造一個無氧的環(huán)境。通常用培養(yǎng)基中加入還原劑,或用物理、化學方法去除環(huán)境中的游離氧,以降低氧化還原電勢。如皰肉培養(yǎng)基、硫基乙酸鈉培養(yǎng)基,牛心腦浸液培養(yǎng)基等。常用的厭氧培養(yǎng)方法有許多,可根據(jù)實際情況選用。
 
  1.厭氧缸法接種好標本的平板或液體培養(yǎng)基試管,可放入?yún)捬醺變?nèi)培養(yǎng),厭氧缸是普通的干燥缸,用物理化學的方法使缸內(nèi)造成厭氧環(huán)境,從而將厭氧菌培養(yǎng)出來。
 
  2.厭氧袋(Bio-bag)即在塑料袋內(nèi)造成厭氧環(huán)境來培養(yǎng)厭氧菌。塑料袋透明而不透氣,內(nèi)裝氣體發(fā)生管(有**化鈉的碳酸氫鈉固體以及5%檸檬酸安瓿)、美蘭指示劑管、鈀催化劑管、干燥劑。放入已接種好的平板后,盡量擠出袋內(nèi)空氣,然后密封袋口。先折斷氣體發(fā)生管,后折斷美蘭指示劑管,命名袋內(nèi)在半小時內(nèi)造成無氣環(huán)境。如不突變表示袋內(nèi)已達厭氧狀態(tài),可以孵育。
 
  3.厭氧手套箱(Anaerobie glove box)即厭氧培養(yǎng)箱,是迄今為止國際上公認的培養(yǎng)厭氧菌佳儀器之一。它是一個密閉的大型金屬箱,箱的前面有一個有機玻璃做的透明面板,板上裝有兩個手套,可通過手套在箱內(nèi)進行操作,故名。箱側(cè)有一交換室,具有內(nèi)外二門,內(nèi)門通箱內(nèi)先關著。欲放物入箱,先打開外門,放入交換室,關上外門進行抽氣和換氣(H2,CO2,N2)達到厭氧狀態(tài),然后手伸入手套把交換室內(nèi)門打開,將物品移入箱內(nèi),關上內(nèi)門。箱內(nèi)保持厭氧狀態(tài),也是利用充氣中的氫在鈀的催化下和箱中錢殘余氧化合成水的原理。該箱可調(diào)節(jié)溫度,本身是孵箱或孵箱即附在其內(nèi),還可放入解剖顯微鏡便于觀察厭氧菌菌落,這種厭氧箱適于作厭氧細菌的大量培養(yǎng)研究,大量培養(yǎng)基可放入作預還原和厭氧性無菌試驗。金屬硬壁型厭氧箱的抽氣、充氣、厭氧環(huán)境和溫度等均系自動調(diào)節(jié)。
 
  4.厭氧盒:原理同厭氧袋,有成品銷售。
 
  5.生物耗氧法:在一密閉的容器內(nèi)放以生物(多是植物),消耗氧氣,同時產(chǎn)生二氧化碳,供細菌生長用。我沒見過。
 
  6.焦性末食子酸法:在一潔凈的玻片上鋪上紗布或濾紙,均勻撒上焦性末食子酸,然后再混入NaHCO3粉末或NaOH溶液,迅速將已接種細菌的平板倒扣在上面,用融化的白蠟封邊,造成一個封閉空間。焦性末食子酸與堿反應后耗氧。該法用于厭氧不嚴格的厭氧菌的培養(yǎng),簡單。如有梭狀芽孢桿菌。
 
  7.皰肉培養(yǎng)基:本身就是一個不需特殊設備的厭氧培養(yǎng)法。皰肉和肉湯裝入大試管,液面封凡士林,造成無氧環(huán)境。
 
  操作室厭氧環(huán)境形成:按使用要求放置好必要的配件和器具,并向操作室內(nèi)放入二個無毒塑料袋。通電源開照明燈,開控溫儀,調(diào)節(jié)所需溫度及安全溫度。操作室內(nèi)放入1000g鈀粒(封閉)和500g干燥劑,并放入美蘭指示劑(封閉)。關緊取樣室內(nèi)外門,并抽真空校驗。操作室內(nèi)di一次置換(氮氣置換):先用橡皮管插入操作室內(nèi)進氣口,另一頭插入塑料袋。接通氮氣進氣路,打開氮氣控制閥,使二只塑料袋充足氮氣,然后扎緊袋口。把乳膠手套套在觀察板法蘭圈上并扎緊。把塑料袋內(nèi)氮氣漸漸地放于操作室內(nèi),至全部放出。操作室第二次置換(氮氣置換)重復一 次充氮過程,并注意隨時用腳踏開關開閉排氣。操作室第三次置換(混合氣體置換):(混合氣體配比為:N2↑ 85% H2 ↑ 10% CO2↑ 5%)調(diào)換氣路打開混合氣道通閥門進氣,充氣時要隨時腳踏開關開閉排氣?;旌蠚獬錆M塑料袋后,關掉混合氣直通閥(三通閥),使混合氣經(jīng)過流量計輸入操作并調(diào)整流量計,流量為每分鐘10毫升左右。把塑料袋內(nèi)混合氣漸漸排于操作室內(nèi)。通過三次換氣后,操作室內(nèi)氣體含氧量已處于極微量狀態(tài)。操作室內(nèi)打開鈀粒除氧劑,接通除氧催化器電源進行催化除氧,一 小時后打開美蘭指示劑(美蘭安瓶)觀察其變色情況,不變色為操作室內(nèi)達到厭氧環(huán)境。開紫外線滅菌燈,室內(nèi)進行滅菌處理。滅菌時間自定。
 
  厭氧培養(yǎng)箱注意事項:盡可能地安裝于空氣清靜,溫度變化較小的地方。開機前應全面熟悉和了解各組成配套儀器、儀表的說明書、掌握正確的使用方法。培養(yǎng)物放入必須是在操作室內(nèi)達到jue對厭氧環(huán)境后放入。如發(fā)生故障(停氣等原因)操作室內(nèi)仍可保持12小時厭氧狀態(tài)。(超過12小時則根據(jù)需要把培養(yǎng)物取出另作處理)。經(jīng)常注意氣路有無漏氣現(xiàn)象。調(diào)換氣瓶時,注意要扎緊氣管,避免流入含氧氣體。真空泵按要求使用,定期檢查加油。停止使用,關閉總電源鍵,及設備后部的電源開關。
 



    在使用厭氧培養(yǎng)箱時為保證機器不發(fā)生故障,需注意以下幾點。

    1、儀表盡可能地安裝于空氣清靜,溫度變化較小的地方。

    2、開機前應全面熟悉和了解各組成配套儀器、儀表的說明書、掌握正確的使用方法。

    3、培養(yǎng)物放入必須是在操作室內(nèi)達到絕對厭氧環(huán)境后放入。

    4、如發(fā)生故障(停氣等原因)操作室內(nèi)仍可保持12小時厭氧狀態(tài)。(超過12小時則根據(jù)需要把培養(yǎng)物取出另作處理)。

    5、經(jīng)常注意氣路有無漏氣現(xiàn)象。

    6、調(diào)換氣瓶時,注意要扎緊氣管,避免流入含氧氣體

    7、真空泵按要求使用,定期檢查加油。

    8、停止使用,關閉總電源鍵,及設備后部的電源開關






厭氧培養(yǎng)箱的主要特點及注意事項

  厭氧培養(yǎng)箱是一種在無氧環(huán)境條件下進行細菌培養(yǎng)及操作的專用裝置,它能提供嚴格的厭氧狀態(tài)恒定的溫度培養(yǎng)條件和具有一個系統(tǒng)化、科學化的工作區(qū)域。可培養(yǎng)最難生長的厭氧生物,又能避免以往厭氧生物在大氣中操作時接觸氧氣而死亡的危險性。

  厭氧培養(yǎng)箱的是由恒溫培養(yǎng)室、真空取樣室、厭氧操作室、氣路、電路控制系統(tǒng)等部分組成。整機造型新穎、結(jié)構(gòu)緊湊,具有厭氧環(huán)境好、密風性能好、氣檢溫控精度高,穩(wěn)定性好、使用方便、省氣、經(jīng)濟、工作安全可靠等優(yōu)點。

  厭氧培養(yǎng)箱的主要特點:

  1、外形小巧,極適合擁擠繁雜的微生物實驗室。

  2、操作簡便,操作雙手進出與樣品轉(zhuǎn)移無需抽真空充氮氣操作,內(nèi)腔溫度、濕度、厭氧狀態(tài)、生物廢氣處理等均全自動完成。

  3、裸手操作,避免厚重的全手套引起操作手感上的不適。

  4、首創(chuàng)人體工程學操作孔側(cè)角設計,降低長期操作而引起的職業(yè)損傷。

  5、標配組件齊全,基本實現(xiàn)用戶標準采購后"零"加配采購擔憂。

  厭氧培養(yǎng)箱的注意事項:

  1、整機應安放在溫度溫差較小,操作方便的位置,應避免陽光直曬和遠離采暖設備,放置要平穩(wěn)。

  2、將混合氣瓶、氮氣瓶安放平穩(wěn),并分別安裝好減壓閥(含壓力表)。安置在適當位置。

  3、接上氣路并檢查氣路,為防止漏氣,必要時可在各接管處用密封膠粘合。

標簽: 厭氧培養(yǎng)箱
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