與砷、汞、鉛等重金屬元素不同，硒具有抗癌、抗氧化、增強(qiáng)免疫力等作用，所以“補(bǔ)硒”成了養(yǎng)生的重要方法之一。但同時也有報道指出面，人身體內(nèi)攝入過量的硒元素會引起心律不齊、溶血等癥狀，嚴(yán)重時可能導(dǎo)致死亡。因此，國際衛(wèi)生組織建議人均硒的攝入量應(yīng)為50mg-250mg，可以檢測食物中硒含量的儀器有很多，其中原子熒光光度計(jì)檢出限低、靈敏度高，在硒等重金屬元素的檢測中發(fā)揮重要作。今天金索坤和大家分享如何應(yīng)用原子熒光光度計(jì)檢測食品中的硒。
原子熒光光度計(jì)測硒的原理：
試樣經(jīng)酸加熱消化后，在6 mo1/L 鹽酸介質(zhì)中，將試樣中的六價硒還原成四價硒，用NaBH4或KBH4做還原劑，將四價硒在鹽酸介質(zhì)中還原成硒化氫（H2Se），由載氣（氬氣）帶入原子化器中進(jìn)行原子化，在硒空心陰極燈照射下，基態(tài)硒原子被激發(fā)至高能態(tài)，在去活化回到基態(tài)時，發(fā)射出特征波長的熒光，其熒光強(qiáng)度與硒含量成正比。與標(biāo)準(zhǔn)系列比較定量
(1)儀器工作環(huán)境的要求
分光光度計(jì)對工作環(huán)境的要求如下。
①儀器應(yīng)安放在干燥的房間內(nèi)，使用溫度為5～35℃．相對濕度不超過85％。
②儀器應(yīng)放置在堅(jiān)固平穩(wěn)的工作臺上，且避免強(qiáng)烈的振動或持續(xù)的振動。
③室內(nèi)照明不宜太強(qiáng)，且應(yīng)避免直射日光的照射。
④電扇不宜直接向儀器吹風(fēng)，以防止光源燈因發(fā)光不穩(wěn)定而影響儀器的正常使用。
⑤盡量遠(yuǎn)離高強(qiáng)度的磁場、電場及發(fā)生高頻波的電器設(shè)備。
⑥供給儀器的電源電壓為AC220V±22V，頻率為50Hz±1Hz，并必須裝有良好的接地線。推薦使用功率為1000w以上的電子交流穩(wěn)壓器或交流恒壓穩(wěn)壓器，以加強(qiáng)儀器的抗干擾性能。
⑦避免在有硫化氫等腐蝕性氣體的場所使用。
超微量分光光度計(jì)的日常維護(hù)和保養(yǎng)
①光源。光源的壽命有限，為了延長光源使用壽命，在不使用儀器時不要開光源燈，應(yīng)盡量減少開關(guān)次數(shù)。在短時問的工作間隔內(nèi)可以不關(guān)燈。剛關(guān)閉的光源燈不能立即重新開啟。儀器連續(xù)使用時間不應(yīng)超過3h。若需長時間使用，可以間歇30min。如果光源燈亮度明顯減弱或不穩(wěn)定，應(yīng)及時更換新燈。更換后要調(diào)節(jié)好燈絲位置，不要用手直接接觸窗口或燈泡，避免油污沾附。若不小心接觸過，要用無水乙醇擦拭。
②單色器。單色器是儀器的核心部分，裝在密封盒內(nèi)，不能拆開。選擇波長應(yīng)平衡地轉(zhuǎn)動，不可用力過猛。為防止色散元件受潮生霉，必須定期更換單色器盒干燥劑(硅膠)。若發(fā)現(xiàn)干燥劑變色，應(yīng)立即更換。
③吸收池。必須正確使用吸收池，應(yīng)特別注意保護(hù)吸收池的兩個光學(xué)面。
④檢測器。光電轉(zhuǎn)換元件不能長時間曝光，且應(yīng)避免強(qiáng)光照射或受潮積塵。
⑤當(dāng)儀器停止工作時，必須切斷電源。
⑥為了避免儀器積灰和沾污，在停止工作時，應(yīng)蓋上防塵罩。
⑦儀器若暫時不用要定期通電，每次不少于20～30min，以保持整機(jī)呈干燥狀態(tài)，并且維持電子元器件的性能。
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分光光度計(jì)是利用物質(zhì)對光的選擇性吸收的特性，以較純的單色光作為入射光，測定物質(zhì)對光的吸收，從而對物質(zhì)進(jìn)行定性或定量分析的儀器。在使用過程中常常會出現(xiàn)測量誤差，這些誤差又是如何產(chǎn)生的呢？下面小編為大家介紹分光光度計(jì)測量誤差產(chǎn)生原因。
1、復(fù)色光對比耳定律的偏離
比耳定律成立的前提條件是人射光是單色光，但是精度再高的儀器，即使是雙單色器的分光光度計(jì)，也只能獲得近乎單色的光，無法獲得純單色光，它仍然含有狹窄光通帶，具有復(fù)色光的性質(zhì)。而復(fù)色光會導(dǎo)致比耳定律的正或負(fù)偏離。
固定狹縫的紫外分光光度計(jì)光譜帶寬一般為1nm或2nm，可調(diào)狹縫的可以做到0、1nm；可見分光光度計(jì)帶寬6nm、snm，甚至十幾納米。
光譜帶寬應(yīng)該是越小越好，但是，隨著光譜分辨率的提高，儀器的靈敏度降低，所以，選擇儀器時要綜合考慮各種條件的影響。當(dāng)溶液濃度較小且單色光較純時，可近似認(rèn)為符合比耳定律。
2、雜散光的影響
雜散光是指進(jìn)人檢測器的處于待測波長光譜帶寬范圍外的其他波長組分，它是光譜測量中誤差的主要來源。
產(chǎn)生原因有：
分光光度計(jì)的色散元件、反射鏡、透鏡及單色器內(nèi)壁灰塵等。在分光光度計(jì)工作波段邊緣波長處，由于單色器透光率、光源輻射強(qiáng)度、檢測器靈敏度都較低，雜散光的影響更為顯著。
雜散光限制儀器的分析上限可引起嚴(yán)重的測量誤差，實(shí)際工作中，在定量分析時，一般在吸收峰或其附近處測量樣品吸光度，如果在分析波長處含有雜散光，這時樣品的透光率較小，而雜散光大部分透過，使測量吸光度低于真實(shí)吸光度。
3、儀器噪聲對測t的影響
儀器噪聲也是儀器的一個重要指標(biāo)，它表征儀器做稀溶液的能力。是疊加在待測量的分析信號中的不需要的信號，掃描100%T和0%T線，可觀察到分光光度計(jì)的絕對噪聲水平，如果儀器噪聲較大，會掩蓋較小的測量信號，一般用噪音的二倍來表示儀器的靈敏度。
4、波長和吸光度準(zhǔn)確度
樣品的每一個值都是在一定的波長下測得的，如果，波長誤差很大，測出的值肯定不準(zhǔn)。吸光度準(zhǔn)確度也是用戶對儀器的直接要求，更應(yīng)引起足夠的重視。
國家計(jì)量檢定規(guī)程規(guī)定雙光束紫外可見分光光度計(jì)透射比準(zhǔn)確度為A級士0、6%，B級土1、0%。
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