分光光度計(jì)的使用步驟主要有哪些?
以下相關(guān)工程師做如下介紹：
1.把分光光度計(jì)電源線連接好，儀器的電源具備接地功能;
2.接通電源后，按動(dòng)開機(jī)開關(guān)，然后讓儀器預(yù)熱至少20分鐘；
儀器會(huì)自動(dòng)校正，然后顯示546.0nm 0.000A說明自檢結(jié)束，就可以開始測(cè)試;
3.使用“方式”鍵測(cè)試的方式，再根據(jù)自己要測(cè)量的結(jié)果選透光率、吸光度、和濃度的測(cè)試;
4.要對(duì)波長進(jìn)行分析，選擇按鍵6，然后按提示依次進(jìn)行;
5.把樣品溶液和要測(cè)定的溶液各自倒入比色皿中后；
然后打開樣品蓋，把盛著溶液的比色皿插入另一個(gè)比色皿中，最后蓋好樣品蓋;
6.把參比的溶液拉到光路中按住“OABS/100%T”鍵；
這時(shí)的顯示器會(huì)顯示出BLANKING,，直到最后顯示出“100%T”或者是“0.000A”為止;
7.最后儀器顯示出“100%T”或者是“0.000A”即可結(jié)束測(cè)試。
這時(shí)被測(cè)樣品的透光度、吸光度等參數(shù)就可直接讀出;
8.分光光度計(jì)使用完畢，關(guān)上電源，取出比色皿洗凈，樣品室用軟布或軟紙擦凈。
分光光度計(jì)的使用注意事項(xiàng)：
1、分光光度計(jì)應(yīng)放在干燥的房間內(nèi)，使用時(shí)放置在堅(jiān)固平穩(wěn)的工作臺(tái)上，室內(nèi)照明不宜太強(qiáng)。
熱天時(shí)不能用電扇直接向儀器吹風(fēng)，防止燈泡燈絲發(fā)亮不穩(wěn)定;
2、分光光度計(jì)使用前，使用者應(yīng)該首先了解分光光度計(jì)的結(jié)構(gòu)和工作原理，以及各個(gè)操縱旋鈕之功能。
在未按通電源之前，應(yīng)該對(duì)儀器的安全性能進(jìn)行檢查，電源接線應(yīng)牢固；
通電也要良好，各個(gè)調(diào)節(jié)旋鈕的起始位置應(yīng)該正確，然后再按通電源開關(guān)。
3、在分光光度計(jì)尚未接通電源時(shí)，電表指針必須于“0”刻線上；
若不是這種情況，則可以用電表上的校正螺絲進(jìn)行調(diào)節(jié)。
分光光度計(jì)計(jì)采用一個(gè)可以產(chǎn)生多個(gè)波長的光源，通過系列分光裝置，從而產(chǎn)生特定波長的光源，光源透過測(cè)試的樣品后，部分光源被吸收，計(jì)算樣品的吸光值，從而轉(zhuǎn)化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。
分光光度計(jì)的基本工作原理
分光光度計(jì)的基本工作原理是基于物質(zhì)對(duì)光（對(duì)光的波長）的吸收具有選擇性，不同的物質(zhì)都有各自的吸收光帶，所以，當(dāng)光色散后的光譜通過某一溶液時(shí)，其中某些波長的光線就會(huì)被溶液吸收。在一定的波長下，溶液中物質(zhì)的濃度與光能量減弱的程度有一定的比例關(guān)系，即符合比爾定律。
T=I/Iolg（Io/I）=εcb
式中，T為透過率，Io為入射光強(qiáng)度，I為透射光強(qiáng)度，A為消光值（吸光度），ε為吸收系數(shù)，b為溶液的光徑長度，c為溶液的濃度。從以上公式可以看出，當(dāng)入射光、吸收系數(shù)和溶液厚度一定時(shí)，透光率是根據(jù)溶液的濃度而變化的。
在使用分光光度計(jì)時(shí)，我們必須要注意一些使用后的維護(hù)，保養(yǎng)，和一些基本使用注意事項(xiàng)，才能達(dá)到更好的使用效果。
分光光度計(jì)的使用維護(hù)：
1、使用的吸收池必須潔凈，并注意配對(duì)使用。量瓶、移液吸管均應(yīng)校正、洗凈后使用。
2、取吸收池時(shí)，手指應(yīng)拿毛玻璃面的兩側(cè)，裝盛樣品以池體的4/5為度，使用揮發(fā)性溶液時(shí)應(yīng)加蓋，透光面要用擦鏡紙由上而下擦拭干凈，檢視應(yīng)無溶劑殘留。吸收池放入樣品室時(shí)應(yīng)注意方向相同。用后用溶劑或水沖洗干凈，晾干防塵保存。
3、供試品溶液濃度除各該品種已有注明外，其吸收度以在0.3～0.7之間為宜。
4、測(cè)定時(shí)除另有規(guī)定外，應(yīng)以配制供試品溶液的同批溶劑為空白對(duì)照，采用1cm石英吸收池，在規(guī)定的吸收峰±2nm以內(nèi)，測(cè)幾個(gè)點(diǎn)的吸收度或由儀器在規(guī)定的波長附近自動(dòng)掃描測(cè)定，以核對(duì)供試品的吸收峰位置是否正確，并以吸收度最大的波長作為測(cè)定波長，除另有規(guī)定外吸收度最大波長應(yīng)在該品種項(xiàng)下規(guī)定的測(cè)定波長±2nm以內(nèi)。
5、供試品應(yīng)取2份，如為對(duì)照品比較法，對(duì)照品一般也應(yīng)取2份。平行操作，每份結(jié)果對(duì)平均值的偏差應(yīng)在±0.5%以內(nèi)。
6、選用儀器的狹縫寬度應(yīng)小于供試品吸收帶的半寬度，否則測(cè)得的吸收度值會(huì)偏低，狹縫寬度的選擇應(yīng)以減少狹縫寬度時(shí)供試品的吸收度不再增加為準(zhǔn)，對(duì)于大部分被測(cè)品種，可以使用2nm縫寬。
7、單色器是儀器的核心部分,裝在密封盒內(nèi)不能拆開,為防止色散元件受潮發(fā)霉,必須經(jīng)常更換單色器盒干燥劑。
8、光電轉(zhuǎn)換元件不能長時(shí)間曝光,應(yīng)避免強(qiáng)光照射或受潮積塵。
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