Agilent液相色譜儀是一種應(yīng)用十分廣泛的有機(jī)多組分化學(xué)分析儀器。它具有分離效能高, 分析速度快, 樣品用量少, 可進(jìn)行多組分測(cè)量等優(yōu)點(diǎn)。Agilent液相色譜儀在石油、化工、生物化學(xué)、醫(yī)藥衛(wèi)生、食品工業(yè)、環(huán)保等方面應(yīng)用很廣。它除用于定量和定性分析外，還能測(cè)定樣品在固定相上的分配系數(shù)、活度系數(shù)、分子量和比表面積等物理化學(xué)常數(shù)。一種對(duì)混合氣體中各組成分進(jìn)行分析檢測(cè)的儀器。但是由于人員素質(zhì) 樣品的性質(zhì)以及儀器本身等方面的原因, 常常出現(xiàn)這樣那樣的分析故障嚴(yán)重影響了正常的生產(chǎn)分析。所以掌握一種準(zhǔn)確、快速的排除Agilent液相色譜儀故障的方法非常重要。
安捷倫液相色譜儀1260
1 、如何成為真正的液相高手
（1）、一定要珍惜儀器廠商提供的各種培訓(xùn)，因?yàn)樗麄兊呐嘤?xùn)很有針對(duì)性，而且很專(zhuān)業(yè)。
（2）、要多做，液相是一個(gè)比較復(fù)雜的系統(tǒng)，在做樣的過(guò)程中，總會(huì)遇到各種問(wèn)題，通過(guò)自己的大腦解決問(wèn)題，慢慢積累就會(huì)穴道很多東西。其次要敢于動(dòng)手，不要總擔(dān)心會(huì)把儀器弄壞，拆儀器的時(shí)候細(xì)心一點(diǎn)就好了，記著各個(gè)部件的順序，連接方式。動(dòng)手次數(shù)多了，成功的機(jī)會(huì)就多了，也就更有信心了。
（3）、要看一些相關(guān)理論的書(shū)籍，要了解一些關(guān)于液相的分離原理，如何優(yōu)化色譜系統(tǒng)和峰形，能夠自己解決一些分離的問(wèn)題。這樣才是一個(gè)液相高手。
如果只是會(huì)很熟練的使用工作站和維修儀器，排除故障，我覺(jué)得這只是一個(gè)操作高手，而不是一個(gè)真正的液相高手。
2、新裝82341 GPIB 板，如何與ChemStation 通訊?
在 LC ChemStation CD-ROM 中有安裝說(shuō)明，還包括驅(qū)動(dòng)程序安裝信息。請(qǐng)?jiān)?Windows® Explorer 中查看子目錄： ManualsInstallationLC Systems。您在此處可找到《安裝手冊(cè)》，其中包含有關(guān)如何安裝 GPIB 板以及如何調(diào)用驅(qū)動(dòng)程序的逐步操作說(shuō)明。
3、為什么進(jìn)樣后在工作站在線(xiàn)圖譜上看不到紅色開(kāi)始線(xiàn)？
ChemStation 軟件有一個(gè)“在線(xiàn)圖譜”窗口，在此窗口中可顯示從所連接的檢測(cè)器接收到的所有信號(hào)。當(dāng)進(jìn)樣樣品時(shí)，會(huì)在“在線(xiàn)圖譜”窗口中顯示一條豎直的紅色“開(kāi)始線(xiàn)”。這條紅色線(xiàn)標(biāo)志著啟動(dòng)該軟件進(jìn)行原始數(shù)據(jù)的收集。如果不顯示這條紅色線(xiàn)，則不會(huì)收集數(shù)據(jù)。 如果不顯示“開(kāi)始線(xiàn)”，請(qǐng)檢查檢測(cè)器上的遙控電纜（如果是 1050 或 1090 系列液相色譜儀的話(huà)）。如果缺少遙控電纜，則需要進(jìn)行安裝。如果安裝了模-數(shù)轉(zhuǎn)換箱或板 (35900 ADC)，則需要從模-數(shù)轉(zhuǎn)換設(shè)備到液相色譜儀拉一根遙控電纜。檢查所有的 CAN 電纜，確保它們都連接到 1100 系列液相色譜儀上
4、的波長(zhǎng)如何選擇
做一個(gè)新的方法，關(guān)鍵是選擇好的儀器條件，更關(guān)鍵的是波長(zhǎng)正確。但是怎樣的波長(zhǎng)才算是的那，比如說(shuō)我已經(jīng)作了全掃描，那么怎么去選擇波長(zhǎng)哪？？？一般選擇zui大吸收波長(zhǎng)為檢測(cè)波長(zhǎng),當(dāng)然也要結(jié)合自己的實(shí)際情況來(lái)中和一下如果要達(dá)到zui大檢測(cè)靈敏度，zui大吸收波長(zhǎng)是首位選擇。如果你使用的是DAD，那么建議你將Sample WL設(shè)定為zui大吸收波長(zhǎng)，Bandwidth不能低于你設(shè)定的slit的值。默認(rèn)推薦的Bandwidth為半峰寬。如果你在一次分析中有zui大吸收波長(zhǎng)不同的物質(zhì)需要同時(shí)檢測(cè)，可以使用檢測(cè)器的Timetable進(jìn)行波長(zhǎng)的切換避免選用低波長(zhǎng)，波長(zhǎng)越長(zhǎng)越容易做
5、柔性不銹鋼毛細(xì)管線(xiàn)外面的彩色標(biāo)記是什么意思？
安捷倫柔性不銹鋼管線(xiàn)外部的彩色標(biāo)記表示管的內(nèi)徑 (ID)： 紅色 表示內(nèi)徑為 0.12mm 或 0.005 英寸。 綠色 表示內(nèi)徑為 0.17mm 或 0.007 英寸。 藍(lán)色 表示內(nèi)徑為 0.25mm 或 0.010 英寸。 橙色 表示內(nèi)徑為 0.50mm 或 0.020 英寸。
6、更換活塞密封圈后，建議采用什么磨合程序？
注意這個(gè)程序適合于反相密封圈，但不適合于正相密封圈。還會(huì)損壞正相密封圈。 安裝新的密封圈后，進(jìn)行zui初的“磨合”期。在至少 350bar 的反壓下泵入異丙醇 15-30 分鐘。這要通過(guò)使用原來(lái)的色譜柱或陰尼管線(xiàn)來(lái)產(chǎn)成壓力.。
1、操作條件及應(yīng)用范圍不同：對(duì)于氣相色譜，是加溫操作。僅能分析在操作溫度下能汽化而不分解的物質(zhì)，對(duì)高沸點(diǎn)化合物、非揮發(fā)性物質(zhì)、熱不穩(wěn)定化合物、離子型化合物及高聚物的分離、分析較為困難，致使其應(yīng)用受到一定程度的限制，據(jù)統(tǒng)計(jì)只有大約20%的機(jī)物能用氣相色譜分析。而液相色譜是常溫操作，不受樣品揮發(fā)度和熱穩(wěn)定性的限制，它非常適合相對(duì)分子量較大，難汽化，不易揮發(fā)或?qū)崦舾械奈镔|(zhì)、離子型化合物和高聚物的分離分析，大約占有機(jī)物的70%~80%。
2、由于液體的擴(kuò)散性比氣體的小，因此，溶質(zhì)在液相中的傳質(zhì)速率慢，柱外效應(yīng)就顯得特別重要；而在氣相色譜中，由色譜柱外區(qū)域引起的擴(kuò)張可以忽略不計(jì)。
3、液相色譜中，制備樣品簡(jiǎn)單，回收樣品也比較容易，而且回收是定量的，適合于大量制備，但液相色譜尚缺乏通用的檢測(cè)器，一起比較復(fù)雜，價(jià)格昂貴。在實(shí)際應(yīng)用中，這兩種技術(shù)是相互補(bǔ)充的。
4、液相色譜能完成難度較高的分離工作
1）氣相色譜的流動(dòng)相載氣是色譜惰性的，基本不參與分配平衡過(guò)程，與樣品分子無(wú)親和作用，樣品分子主要與固定相相互作用。而在液相色譜中流動(dòng)相液體也與固定相爭(zhēng)奪樣品分子，為提高選擇性增加了一個(gè)因素。也可選擇不同比例的兩種或兩種以上的液體做流動(dòng)相，增加分離的選擇性。
2）液相色譜固定相類(lèi)型多，如離子交換色譜和排阻色譜等，作為分析時(shí)，選擇余地大；而氣相色譜并不可能。
3）液相色譜通常在室溫下操作，較低的溫度，一般有利于色譜分離條件的選擇。
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高效液相色譜儀的系統(tǒng)由儲(chǔ)液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測(cè)器、記錄儀等幾部分組成。與經(jīng)典的液相色譜相比，具有高效液相所用的固定相粒度?。?um-10um）、傳質(zhì)快、柱效高的優(yōu)勢(shì)。近年來(lái)，在保健食品功效成分、營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化劑、維生素類(lèi)、蛋白質(zhì)的分離測(cè)定等應(yīng)用廣泛。世界上約有80％的有機(jī)化合物可以用HPLC來(lái)分析測(cè)定。
高效液相色譜的分離過(guò)程HPLC，借溶質(zhì)在兩相間分配系數(shù)、親和力、吸附力或分子大小不同而引起的排阻作用的差別使不同溶質(zhì)得以分離。
高效液相色譜儀操作步驟：
1)過(guò)濾流動(dòng)相，根據(jù)需要選擇不同的濾膜。
2)對(duì)抽濾后的流動(dòng)相進(jìn)行超聲脫氣10-20分鐘。
3)打開(kāi)HPLC工作站(包括計(jì)算機(jī)軟件和色譜儀)，連接好流動(dòng)相管道，連接檢測(cè)系統(tǒng)。
4)進(jìn)入HPLC控制界面主菜單，點(diǎn)擊manual，進(jìn)入手動(dòng)菜單。
5)一段時(shí)間沒(méi)用，或者換了新的流動(dòng)相，需要先沖洗泵和進(jìn)樣閥。沖洗泵，直接在泵的出水口，用針頭抽取。沖洗進(jìn)樣閥，需要在manual菜單下，先點(diǎn)擊purge，再點(diǎn)擊start，沖洗時(shí)速度不要超過(guò)10ml/min。
6)調(diào)節(jié)流量，初次使用新的流動(dòng)相，可以先試一下壓力，流速越大，壓力越大，一般不要超過(guò)2000。點(diǎn)擊injure，選用合適的流速，點(diǎn)擊on，走基線(xiàn)，觀察基線(xiàn)的情況。
7)設(shè)計(jì)走樣方法。點(diǎn)擊file，選取selectusersandmethods，可以選取現(xiàn)有的各種走樣方法。若需建立一個(gè)新的方法，點(diǎn)擊newmethod。選取需要的配件，包括進(jìn)樣閥，泵，檢測(cè)器等，根據(jù)需要而不同。選完后，點(diǎn)擊protocol。一個(gè)完整的走樣方法需要包括：a.進(jìn)樣前的穩(wěn)流，一般2-5分鐘；b.基線(xiàn)歸零；c.進(jìn)樣閥的loading-inject轉(zhuǎn)換；d.走樣時(shí)間，隨不同的樣品而不同。
8)進(jìn)樣和進(jìn)樣后操作。選定走樣方法，點(diǎn)擊start。進(jìn)樣，所有的樣品均需過(guò)濾。方法走完后，點(diǎn)擊postrun，可記錄數(shù)據(jù)和做標(biāo)記等。全部樣品走完后，再用上面的方法走一段基線(xiàn)，洗掉剩余物。
9)關(guān)機(jī)時(shí)，先關(guān)計(jì)算機(jī)，再關(guān)液相色譜。
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