第1期 | 色譜柱使用一段時(shí)間后出現(xiàn)肩峰，怎么處理？
在流出曲線或吸收曲線的峰上出現(xiàn)的不成峰形的小曲折(deflection)，形狀類似肩膀，故稱為肩峰，這是對(duì)于曲線形狀的一種描述。
Question：
色譜柱使用一段時(shí)間后出現(xiàn)肩峰，怎么處理？
Lubex：
多種原因可導(dǎo)致出現(xiàn)肩峰，可從以下方面考慮。
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檢查色譜柱是否虛接，虛接后會(huì)造成鋒均展寬且拖尾等現(xiàn)象。
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個(gè)別峰出現(xiàn)肩峰，考慮是否色譜條件不合適導(dǎo)致，調(diào)節(jié)流動(dòng)相增大保留能力，提高分離度。反相的話基本上是減小一下流動(dòng)相中有機(jī)相比例，正相的話就要增大流動(dòng)相中弱極性成分的比例了。
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譜圖中所有峰均出現(xiàn)肩峰，考慮污染導(dǎo)致?？杉哟笙疵搹?qiáng)度沖洗色譜柱，對(duì)于反相柱：甲醇-乙腈-異丙醇-甲醇沖洗；另外考慮到柱頭污染，還可反沖，需注意應(yīng)斷開檢測(cè)器小流速?zèng)_起。
時(shí)間久的關(guān)系會(huì)影響色譜峰的峰型和狀態(tài)。
Agilent液相色譜儀是一種應(yīng)用十分廣泛的有機(jī)多組分化學(xué)分析儀器。它具有分離效能高, 分析速度快, 樣品用量少, 可進(jìn)行多組分測(cè)量等優(yōu)點(diǎn)。Agilent液相色譜儀在石油、化工、生物化學(xué)、醫(yī)藥衛(wèi)生、食品工業(yè)、環(huán)保等方面應(yīng)用很廣。它除用于定量和定性分析外，還能測(cè)定樣品在固定相上的分配系數(shù)、活度系數(shù)、分子量和比表面積等物理化學(xué)常數(shù)。一種對(duì)混合氣體中各組成分進(jìn)行分析檢測(cè)的儀器。但是由于人員素質(zhì) 樣品的性質(zhì)以及儀器本身等方面的原因, 常常出現(xiàn)這樣那樣的分析故障嚴(yán)重影響了正常的生產(chǎn)分析。所以掌握一種準(zhǔn)確、快速的排除Agilent液相色譜儀故障的方法非常重要。
安捷倫液相色譜儀1260
1 、如何成為真正的液相高手
（1）、一定要珍惜儀器廠商提供的各種培訓(xùn)，因?yàn)樗麄兊呐嘤?xùn)很有針對(duì)性，而且很專業(yè)。
（2）、要多做，液相是一個(gè)比較復(fù)雜的系統(tǒng)，在做樣的過程中，總會(huì)遇到各種問題，通過自己的大腦解決問題，慢慢積累就會(huì)穴道很多東西。其次要敢于動(dòng)手，不要總擔(dān)心會(huì)把儀器弄壞，拆儀器的時(shí)候細(xì)心一點(diǎn)就好了，記著各個(gè)部件的順序，連接方式。動(dòng)手次數(shù)多了，成功的機(jī)會(huì)就多了，也就更有信心了。
（3）、要看一些相關(guān)理論的書籍，要了解一些關(guān)于液相的分離原理，如何優(yōu)化色譜系統(tǒng)和峰形，能夠自己解決一些分離的問題。這樣才是一個(gè)液相高手。
如果只是會(huì)很熟練的使用工作站和維修儀器，排除故障，我覺得這只是一個(gè)操作高手，而不是一個(gè)真正的液相高手。
2、新裝82341 GPIB 板，如何與ChemStation 通訊?
在 LC ChemStation CD-ROM 中有安裝說明，還包括驅(qū)動(dòng)程序安裝信息。請(qǐng)?jiān)?Windows® Explorer 中查看子目錄： ManualsInstallationLC Systems。您在此處可找到《安裝手冊(cè)》，其中包含有關(guān)如何安裝 GPIB 板以及如何調(diào)用驅(qū)動(dòng)程序的逐步操作說明。
3、為什么進(jìn)樣后在工作站在線圖譜上看不到紅色開始線？
ChemStation 軟件有一個(gè)“在線圖譜”窗口，在此窗口中可顯示從所連接的檢測(cè)器接收到的所有信號(hào)。當(dāng)進(jìn)樣樣品時(shí)，會(huì)在“在線圖譜”窗口中顯示一條豎直的紅色“開始線”。這條紅色線標(biāo)志著啟動(dòng)該軟件進(jìn)行原始數(shù)據(jù)的收集。如果不顯示這條紅色線，則不會(huì)收集數(shù)據(jù)。 如果不顯示“開始線”，請(qǐng)檢查檢測(cè)器上的遙控電纜（如果是 1050 或 1090 系列液相色譜儀的話）。如果缺少遙控電纜，則需要進(jìn)行安裝。如果安裝了模-數(shù)轉(zhuǎn)換箱或板 (35900 ADC)，則需要從模-數(shù)轉(zhuǎn)換設(shè)備到液相色譜儀拉一根遙控電纜。檢查所有的 CAN 電纜，確保它們都連接到 1100 系列液相色譜儀上
4、的波長(zhǎng)如何選擇
做一個(gè)新的方法，關(guān)鍵是選擇好的儀器條件，更關(guān)鍵的是波長(zhǎng)正確。但是怎樣的波長(zhǎng)才算是的那，比如說我已經(jīng)作了全掃描，那么怎么去選擇波長(zhǎng)哪？？？一般選擇zui大吸收波長(zhǎng)為檢測(cè)波長(zhǎng),當(dāng)然也要結(jié)合自己的實(shí)際情況來中和一下如果要達(dá)到zui大檢測(cè)靈敏度，zui大吸收波長(zhǎng)是首位選擇。如果你使用的是DAD，那么建議你將Sample WL設(shè)定為zui大吸收波長(zhǎng)，Bandwidth不能低于你設(shè)定的slit的值。默認(rèn)推薦的Bandwidth為半峰寬。如果你在一次分析中有zui大吸收波長(zhǎng)不同的物質(zhì)需要同時(shí)檢測(cè)，可以使用檢測(cè)器的Timetable進(jìn)行波長(zhǎng)的切換避免選用低波長(zhǎng)，波長(zhǎng)越長(zhǎng)越容易做
5、柔性不銹鋼毛細(xì)管線外面的彩色標(biāo)記是什么意思？
安捷倫柔性不銹鋼管線外部的彩色標(biāo)記表示管的內(nèi)徑 (ID)： 紅色 表示內(nèi)徑為 0.12mm 或 0.005 英寸。 綠色 表示內(nèi)徑為 0.17mm 或 0.007 英寸。 藍(lán)色 表示內(nèi)徑為 0.25mm 或 0.010 英寸。 橙色 表示內(nèi)徑為 0.50mm 或 0.020 英寸。
6、更換活塞密封圈后，建議采用什么磨合程序？
注意這個(gè)程序適合于反相密封圈，但不適合于正相密封圈。還會(huì)損壞正相密封圈。 安裝新的密封圈后，進(jìn)行zui初的“磨合”期。在至少 350bar 的反壓下泵入異丙醇 15-30 分鐘。這要通過使用原來的色譜柱或陰尼管線來產(chǎn)成壓力.。
液相色譜儀是一種常用的分析儀器，主要由高壓輸液泵、進(jìn)樣系統(tǒng)、溫度控制系統(tǒng)、色譜柱、檢測(cè)器、信號(hào)記錄系統(tǒng)等部分組成，被廣泛用于生物醫(yī)學(xué)、環(huán)境化學(xué)、石油化工等領(lǐng)域中。 1、柱壓高原因 (1)緩沖液鹽分如(乙酸銨等)沉積于柱內(nèi); (2)樣品污染沉積。處理對(duì)于第一種情況先用40～50℃的純水,低速正向沖洗柱子,待柱壓逐漸下降后,相應(yīng)提高流速?zèng)_洗,柱壓大幅度下降后,用常溫純水沖洗,之后用純甲醇沖洗柱子30分鐘;對(duì)于第二種情況,由樣品的沉積引起污染的C18柱,和純水反向沖洗柱子,然后換成甲醇沖洗,接著用甲醇+異丙醇(4+6)沖洗柱子(沖洗時(shí)間的長(zhǎng)短由樣品污染的情況而定),再用換成甲醇沖洗,然后用純水沖洗,最后甲醇沖洗正向沖洗柱子30分鐘以上?！ ?i>2、氣泡溢出 流動(dòng)相內(nèi)有氣泡,關(guān)閉泵,打開泄壓閥,打開purg鍵,清洗脫氣,氣泡不斷從過濾器冒出,進(jìn)入流動(dòng)相,無論打開purge鍵幾次,都無法清除不斷產(chǎn)生的氣泡。原因過濾器長(zhǎng)期沉浸于乙酸銨等緩沖液內(nèi),過濾器內(nèi)部由于霉菌的生長(zhǎng)繁殖,形成菌團(tuán),阻塞了過濾器,緩沖液難以流暢地通過過濾器,空氣在泵的壓力作用下經(jīng)過濾器進(jìn)入流動(dòng)相。處理過濾器浸泡于5%硝酸溶液中,超聲清洗幾分鐘即可;亦可將過濾器浸泡于5%硝酸溶液中12～36小時(shí),輕輕震蕩幾次,再將過濾器用純水清洗幾次,打開泄壓閥,打開purge鍵清洗脫氣,如仍有氣泡不斷從過濾器冒出,繼續(xù)將過濾器浸泡于5%硝酸溶液中,如沒有氣泡不斷從過濾器中冒出,說明過濾器內(nèi)部的霉菌菌團(tuán)已被硝酸破壞,流動(dòng)相可以流暢地通過過濾器。打開泄壓閥,打開泵,流速調(diào)至1.0～3.0ml/min,純水沖洗過濾器1小時(shí)左右。即可將過濾器清洗干凈。關(guān)閉泄壓閥,純甲醇沖洗半小時(shí)即可?！ ?i>3、既無壓力指示,又無液體流過 (1)泵密封墊圈磨損; (2)大量氣泡進(jìn)入泵體。處理對(duì)于第一種情況,更換密封墊圈;對(duì)于第二種情況,在泵作用的同時(shí),用一個(gè)50ml的玻璃針筒在泵的出口處幫助抽出空氣?！ ?i>4、壓力波動(dòng)大,流量不穩(wěn)定 原因系統(tǒng)中有空氣或者單向閥的寶石球和閥座之間夾有異物,使得兩者不能密封。處理工作中注意觀察流動(dòng)相的量,保證不銹鋼濾器沉入儲(chǔ)液器瓶底,避免吸入空氣,流動(dòng)相要充分脫氣。如為單向閥和閥座之間夾有異物,拆下單向閥,放入盛有丙酮的燒杯用超聲波清洗?！?i> 5、出峰不佳,峰分叉 (1)色譜柱被污染; (2)柱頭填料塌陷。處理對(duì)于第一種情況,先用純水反向沖洗柱子,然后換成甲醇沖洗,接著用甲醇+異丙醇(4+6)沖洗柱子(沖洗時(shí)間的長(zhǎng)短由樣品污染的情況而定),再換成甲醇沖洗,然后用純水沖洗,最后甲醇沖洗正向沖洗柱子30分鐘以上。如沖洗后依然出峰不佳,則考慮第二種情況。對(duì)于第二種情況,擰開柱頭,檢查柱填料是否硬結(jié)或塌陷。去除硬結(jié)部分(污染的填料),裝入新填料,滴一滴甲醇,填料下陷,再填,用與柱內(nèi)徑相同的頂端平滑的不銹鋼桿壓緊,再填平,滴甲醇,再壓緊反復(fù)幾次,直至裝滿填平。柱頭用甲醇沖洗干凈,擦凈柱外壁的填料,擰緊柱頭,用純甲醇沖洗30分鐘以上。
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