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酶標(biāo)儀的六個自檢方面 酶標(biāo)儀如何操作

時間:2020-08-06    來源:儀多多儀器網(wǎng)    作者:儀多多商城     
        酶標(biāo)儀即酶聯(lián)免疫檢測儀,是酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)的專用儀器又稱微孔板檢測器。酶標(biāo)儀實(shí)際上就是一臺變相光電比色計或分光光度計,其基本工作原理與主要結(jié)構(gòu)和光電比色計基本相同。
想要對某一酶標(biāo)儀進(jìn)行詳細(xì)的了解和認(rèn)識,建議是能夠按照如下流程進(jìn)行自檢操作:
        (一)外觀
        酶標(biāo)儀上應(yīng)有儀器名稱,型號,編號,生產(chǎn)廠家,出廠日期和電源電壓;各調(diào)節(jié)旋鈕,按鍵和開關(guān)均能正常工作,外表面無明顯機(jī)械損傷;顯示文字應(yīng)清楚完整。
        (二)酶標(biāo)儀的穩(wěn)定性(漂移)
        選用492nm波長,在吸光度o.0A處,測定標(biāo)稱值為1.0A的光譜中性濾光片(測定操作按儀器說明進(jìn)行),記錄儀器示值或均值,10min后再次記錄儀器示值或均值,前后兩次測定值之差不應(yīng)超過±0.00。
        (三)吸光度測定的準(zhǔn)確度
        選用405,492和620nm波長,以空氣為參比,分別測定標(biāo)稱值為0.5和1.0A的光譜中性玻璃濾光片,用專用測試板代替酶標(biāo)板,按儀器說明連續(xù)測定3次,按下式計算準(zhǔn)確度:AA=1/3(A、+A。+A3)—A:(A:為標(biāo)準(zhǔn)值)。
        (四)吸光度測定的重復(fù)性
        波長選擇同(三),在酶標(biāo)板*排加注空白溶液,二排加入濃度為200rig/ml的重鉻酸鉀溶液,重復(fù)測定5次。記錄每次測定的二排吸光度值,取二排任一孔吸光度值與各次對應(yīng)孔吸光度值。
        (五)酶標(biāo)儀的線性選用540nm波長,將標(biāo)稱值o.5,1.0A中性濾光片分別放入專用測試板樣本位置中,以空氣為參比,各重復(fù)測定3次;然后將以上兩片中性濾光片疊加后置于專用測試板的同一孔位中,重復(fù)測定3次。
        (六)測定速度的檢定.
        選用492nm波長,放人96孔酶標(biāo)板進(jìn)行測定,用秒表計測儀器打印出全部數(shù)據(jù)的時間。酶標(biāo)儀除了在選購時,應(yīng)盡可能自檢外,在使用中也應(yīng)定期檢定,以保證酶標(biāo)儀測定的有效性。附:200ttg/ml重鉻酸鉀溶液的配制將重鉻酸鉀固體試劑放人稱量瓶中(去蓋)置于烘箱中,在105±5℃下烘2h后,置于干燥器內(nèi)冷卻30min,在分析天平上準(zhǔn)確稱取o.2829g,置于100ml燒杯中,用o.05mol/L稀硫酸溶解后,移入500ml容量瓶中,以少量o.05mol/L稀硫酸洗燒杯3次,洗液并入容量瓶中,用0.05mol/L稀硫酸稀釋至刻度線,搖勻。

酶標(biāo)儀在臨床實(shí)驗(yàn)方面應(yīng)用廣泛,用于鑒別乙肝兩對半,HIV,鑒定DNA等許多方面,可以說它是臨床及醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)不可或缺的基礎(chǔ)設(shè)備。

故障一:測量的結(jié)果重現(xiàn)性不好,即使用空板測量誤差也在允許的范圍之外

故障分析:檢查試劑發(fā)現(xiàn)沒有問題,檢查判定公式也沒有問題,檢查光路也沒有污染。幾經(jīng)周折終于發(fā)現(xiàn)卡微板的卡簧在伸縮后沒有卡到位,造成微板在測量時在機(jī)內(nèi)晃動影響測量結(jié)果不準(zhǔn)。

故障二:測量結(jié)果OD值偏低。

故障分析:排除完燈的能量值偏低后,檢查發(fā)現(xiàn)濾光片上有灰塵,用蒸餾水和擦鏡紙擦洗干凈晾干后故障排除。

測試方法:酶標(biāo)儀的儀器指標(biāo)在蕞佳狀態(tài),就儀器的精度測試和儀器的線性度介紹幾種測試方法。

精度測試:該過程可被用于檢測不同微板之間的測量精度。

使用新制備的在0.1% TWEEN20中的橘黃色甲基填充微孔,在每個微孔中使用不同稀釋度的溶劑以便獲得一個光密度范圍,首先確保每孔注入200mL液體,使用492nm慮光片測量至少3次,對每一微孔進(jìn)行下列計算:

(1)平均OD值;(2)蕞高和蕞低值;(3)平均值。高和低值之間的差值和百分比。讀數(shù)范圍在0.000到2.000Abs。同一孔平均值,高值和低值之間的差值應(yīng)該在+/一1.0%和+/一0.010OD范圍內(nèi)。

讀數(shù)范圍在2.000到3.000Abs同一孔平均值,高和低值之間的差值應(yīng)在+/一1.0% 和+/一0.005OD值范圍內(nèi)。讀數(shù)范圍在3.000Abs以上時準(zhǔn)確度不符合要求。

酶標(biāo)儀儀器線性度:儀器的線性度可使用一種溶劑的稀釋系列得到。如可在492 nIn處測量在0.1%TWEEN20中的橘黃色甲基的稀釋系列。

具體方法如下:在參考光密度計上測量被稀釋的溶劑,畫出OD值對已知濃度的點(diǎn)圖,并畫出通過這些點(diǎn)的好的直線。將從系列稀釋中測得的吸光度值與該圖比較從而計算出各稀釋度的濃度。微板中每種稀釋度加入250t,-L,對每種稀釋至少使用兩個樣本,以便降低因加樣引起的誤差。 測量微板使用測量模式,利用測量得到的平均OD值和每個樣本的已知濃度畫一條OD濃度的曲線,從系列稀釋中測得的吸光值與該曲線比較從而計算出各稀釋度的濃度。

對光度記和本儀器,比較計算的濃度,不準(zhǔn)確度不應(yīng)大于以下,使用標(biāo)準(zhǔn)濾光片492nm時吸光度在0.000~2.000Abs+/一1%、2.000~3.000Abs+/一1.5%。使用梯度濾光片492nm時,吸光度在0.000~2.500Abs+/一2%。

 

酶標(biāo)儀維護(hù)保養(yǎng)注意事項(xiàng)
  酶標(biāo)儀實(shí)際上就是一臺變相的專用光電比色計或分光光度計。主要應(yīng)用于酶聯(lián)免疫吸附檢測反應(yīng)中檢測吸光度值,用途是應(yīng)用于ELISA試劑的測定,是一款廣泛用于各種實(shí)驗(yàn)室,包括臨床實(shí)驗(yàn)室的醫(yī)療設(shè)備。

  酶標(biāo)儀維護(hù)保養(yǎng)注意事項(xiàng):

  1、儀器應(yīng)放置在無磁場和干擾電壓,低于40分貝的環(huán)境下;

  2、應(yīng)避免陽光直射以防止設(shè)備老化;

  3、操作時環(huán)境溫度應(yīng)在15℃-40℃之間,環(huán)境濕度在15%-85%之間;

  4、運(yùn)行中操作電壓應(yīng)保持穩(wěn)定;

  5、操作環(huán)境空氣清潔,避免水汽,煙塵;

  6、保持干燥、干凈、水平的工作臺面,足夠大的操作空間;

  7、使用加液器加液,加液頭不能混用;

  8、盡量配套使用洗板機(jī)洗板,能有效避免交叉污染;

  9、在測量過程中,請勿碰酶標(biāo)板,以防酶標(biāo)板傳送時擠傷操作人員的手;

  10、請勿將樣品或試劑灑到儀器表面或內(nèi)部,操作完成后請洗手;

  11、如果使用的樣品或試劑具有污染性、毒性和生物學(xué)危害,請嚴(yán)格按照試劑盒的操作說明,以防對操作人員造成損害。

標(biāo)簽: 酶標(biāo)儀
酶標(biāo)儀 酶標(biāo)儀維護(hù)保養(yǎng)注意事項(xiàng)_酶標(biāo)儀

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