一、開(kāi)機(jī)
開(kāi)機(jī)前將樣品室內(nèi)的干燥劑取出，確認(rèn)電源是否連接。打開(kāi)儀器電源開(kāi)關(guān)，等待儀器自檢通過(guò)，自檢過(guò)程中禁止打開(kāi)樣品室。
二、使用
儀器自檢結(jié)束后(7個(gè)自檢項(xiàng)目均出現(xiàn)OK字樣)，按[MAINMENU]鍵(主菜單)，屏幕顯示如下5個(gè)功能項(xiàng)：
1、Phtometry(定量運(yùn)算);
2、WavelengthScan(波長(zhǎng)掃描模式);
3、TimeScan(時(shí)間曲線掃描);
4、System(系統(tǒng)校正);5、Datadisplay(光度直接測(cè)量模式)。按相應(yīng)選項(xiàng)前的數(shù)字鍵，即可進(jìn)入該選項(xiàng)的下一級(jí)子菜單。
1、Phtometry(定量運(yùn)算)
1)按[MAINMENU]鍵，再按數(shù)字[1]鍵進(jìn)入Phtometry子菜單下，選中對(duì)應(yīng)的數(shù)字來(lái)選擇所需的測(cè)定方式：
①%T/ABS(透過(guò)率/吸光度測(cè)定模式);
?、赗atio(比例測(cè)定模式);
③Concentration(濃度測(cè)定模式或標(biāo)準(zhǔn)曲線模式);
2)按數(shù)字[1]鍵進(jìn)入%T/ABS(透過(guò)率/吸光度測(cè)定)子菜單，選中對(duì)應(yīng)的數(shù)字鍵來(lái)設(shè)定測(cè)定條件：①NUMWL(設(shè)定測(cè)試波長(zhǎng)的數(shù)目，較多可設(shè)定6個(gè)不同波長(zhǎng));
?、赪LSetting(設(shè)定測(cè)試波長(zhǎng)具體數(shù)值)③DataMode(選擇測(cè)定吸光度或透光率)，設(shè)定完畢后點(diǎn)擊[Enter]鍵確定，所有項(xiàng)目設(shè)定完畢后按數(shù)字[0]鍵確定，等待儀器調(diào)整至準(zhǔn)備狀態(tài)，此時(shí)屏幕上出現(xiàn)AUTOZERO，將盛有空白溶液的比色皿放入樣品室中，按[Start/Stop]鍵進(jìn)行零點(diǎn)的自動(dòng)調(diào)整，自動(dòng)調(diào)零完成后，將樣品置于光路中，再按[Start/Stop]鍵進(jìn)行測(cè)量，儀器的顯示屏自動(dòng)給出對(duì)應(yīng)波長(zhǎng)的數(shù)值。
3)按數(shù)字[3]鍵進(jìn)入③Concentration(濃度測(cè)定模式或標(biāo)準(zhǔn)曲線模式)，選中對(duì)應(yīng)的數(shù)字來(lái)設(shè)定條件(波長(zhǎng)數(shù)目，波長(zhǎng)數(shù)值，標(biāo)準(zhǔn)溶液數(shù)目及濃度)，設(shè)定完畢后點(diǎn)擊[Enter]鍵確定，所有項(xiàng)目設(shè)定完畢后按數(shù)字[0]鍵確定，等待儀器調(diào)整至準(zhǔn)備狀態(tài)，此時(shí)屏幕上出現(xiàn)AUTOZERO，將盛有空白溶液的比色皿放入樣品室中，按[Start/Stop]鍵進(jìn)行零點(diǎn)的自動(dòng)調(diào)整，自動(dòng)調(diào)零完成后，將標(biāo)準(zhǔn)溶液置于光路中，按照濃度從低到高順序依次按[Start/Stop]鍵進(jìn)行測(cè)量，測(cè)量完畢后儀器將自動(dòng)給出標(biāo)準(zhǔn)曲線，標(biāo)準(zhǔn)曲線下方有三項(xiàng)供選擇：①Process(更改標(biāo)準(zhǔn)曲線的坐標(biāo)和觀察濃度回歸曲線的數(shù)據(jù));②Measure(直接進(jìn)入樣品的測(cè)量);③Print(打印濃度回歸曲線譜圖和數(shù)據(jù))，選中對(duì)應(yīng)的數(shù)字就可執(zhí)行相應(yīng)的功能。
4)如果希望返回上一級(jí)菜單，按[CLEARRETURN]鍵返回，返回主菜單直接按[MAINMENU]鍵。
2、WavelengthScan(波長(zhǎng)掃描模式)
1)參數(shù)修改：按[MAINMENU]鍵，再按數(shù)字[2]鍵進(jìn)入②WavelengthScan(波長(zhǎng)掃描模式)子菜單下，選中對(duì)應(yīng)的數(shù)字來(lái)選擇所需修改的內(nèi)容，修改掃描的起始波長(zhǎng)，測(cè)量模式，圖譜坐標(biāo)的上下限，掃描速度等等。修改完畢按數(shù)字[0]鍵確定。
2)波長(zhǎng)掃描：分別將兩個(gè)比色皿裝上空白溶液和樣品溶液，放入比色槽中，按[Start/Stop]鍵進(jìn)行譜圖掃描(如想終止掃描再次按按[Start/Stop]鍵)，待儀器自動(dòng)進(jìn)行基線校正，提示拉入樣品自動(dòng)測(cè)試，測(cè)試完畢后有掃描圖譜出現(xiàn)，下方有相應(yīng)的數(shù)據(jù)處理選項(xiàng)①Process②Baseline③Print;
3)數(shù)據(jù)處理：按數(shù)字[1]鍵進(jìn)入①Process(數(shù)據(jù)處理)，可以讀峰谷值，修改坐標(biāo)，顯示所有數(shù)據(jù)，求一階倒數(shù)等等功能。
3、TimeScan(時(shí)間曲線掃描)
同上(二)操作。
4、System(系統(tǒng)校正)
一般不做。
5、Datadisplay(光度直接測(cè)量模式)
同上(二)操作。
三、關(guān)機(jī)
將比色皿中的溶液倒盡，然后用蒸餾水或有機(jī)溶劑沖洗比色皿至干凈;關(guān)電源將干燥劑放入樣品室內(nèi)，蓋上防塵罩，做好使用登記，得到管理人員認(rèn)可方可離開(kāi)。
雙光束紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)（以下簡(jiǎn)稱(chēng)儀器），系指從單色器發(fā)出的單色光經(jīng)光束開(kāi)關(guān)（斬光器）分成為樣品和參比兩條光束結(jié)構(gòu)的儀器。
它能消除光源不穩(wěn)和放大器增益變化的影響，并能自動(dòng)記錄和掃描物質(zhì)的吸收光譜圖。
儀器在開(kāi)機(jī)后通常會(huì)做一些自檢，但仍應(yīng)按本規(guī)程進(jìn)行檢定。儀器的波長(zhǎng)范圍包括195~800nm，狹縫為0.1~5nm可調(diào)。
工作原理
紫外可見(jiàn)分光光度法是利用物質(zhì)分子對(duì)紫外可見(jiàn)光譜區(qū)的輻射的吸收來(lái)進(jìn)行分析的一種儀器分析方法。
這種分子吸收光譜產(chǎn)生于價(jià)電子能級(jí)的躍遷，它廣泛用于無(wú)機(jī)和有機(jī)物質(zhì)的定性和定量分析。
朗伯一一比耳定律（Lambet-Beer）是光吸收的基本定律，俗稱(chēng)光吸收定律，是分光光度法定量分析的依據(jù)和基礎(chǔ)。
當(dāng)入射光波長(zhǎng)一定時(shí)，溶液的吸光度是吸光物質(zhì)的濃度c及吸收介質(zhì)厚度（吸收光程）的函數(shù)。
其常用表達(dá)式如下（式中ε為系數(shù)）：
A=ε·c·l
紫外見(jiàn)分光光度計(jì)是基于紫外可見(jiàn)分光光度法的原理工作的常規(guī)分析儀器。根據(jù)光路設(shè)計(jì)的不同，紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)可以分為單光束分光光度計(jì)、雙光束分光光度計(jì)和雙波長(zhǎng)分光光度計(jì)。
制定依據(jù)
本規(guī)程主要參照國(guó)家計(jì)量檢定規(guī)程《JJG178-2007紫外、可見(jiàn)、近紅外分光光度計(jì)》、《JJF1641-2017紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)型式評(píng)價(jià)大綱》及《中國(guó)藥典》2015年版四部指導(dǎo)通則“0401紫外-可見(jiàn)分光光度法”擬定。
項(xiàng)目及技術(shù)要求
波長(zhǎng)準(zhǔn)確度≤±1.0nm（紫外光區(qū)），≤±2.0nm（500nm附近）；
波長(zhǎng)重復(fù)性≤0.5nm。
基線平直度≤0.01吸光度。
0%線噪聲≤0.1%，100%線噪聲≤0.5%.
吸光度準(zhǔn)確度應(yīng)符合規(guī)定。
雜散光<0.8%。
光譜帶寬≤標(biāo)示帶寬±20%。
吸收池配對(duì)誤差≤0.5%。
檢測(cè)結(jié)果處理
自檢結(jié)果全部符合技術(shù)要求者，即為合格，可以使用。若檢測(cè)結(jié)果不符合規(guī)定，應(yīng)重新調(diào)試儀器再進(jìn)行自檢，符合規(guī)定后方可使用。
分光光度法是根據(jù)被測(cè)物質(zhì)分子對(duì)紫外、可見(jiàn)波段范圍單色輻射的吸收或反射強(qiáng)度來(lái)進(jìn)行物質(zhì)的定性、定量或結(jié)構(gòu)分析的一種方法。
可見(jiàn)分光光度計(jì)的維護(hù)：
1、保護(hù)光源：光源燈有一定的壽命，儀器不工作時(shí)不要開(kāi)燈，若工作間歇時(shí)間短，可不關(guān)燈。 一旦停機(jī)，則要待燈冷卻后再重新啟動(dòng)，并預(yù)熱15min。
燈泡發(fā)黑或亮度明顯減弱或不穩(wěn)定時(shí)，就及時(shí)更換。 經(jīng)經(jīng)紫外光照射后形成結(jié)痕可用無(wú)水乙醇去除。
2、保證合適的工作環(huán)境溫度和濕度是影響儀器性能的重要因素。
不適宜的溫度和濕度可引起機(jī)械部件的銹蝕，使金屬鏡面的光潔度下降，引起儀器機(jī)械部分的誤差或性能下降；造成光柵、反射鏡、聚焦鏡等光學(xué)部件的鋁膜銹蝕，產(chǎn)生光能不足、雜散光、噪聲等；甚至使儀器停止工作，從而影響儀器壽命。維護(hù)保養(yǎng)時(shí)應(yīng)定期加以校正溫度和濕度。
3、定期清潔，保障環(huán)境和儀器內(nèi)衛(wèi)生條件，防塵。
儀器使用一定時(shí)間后，內(nèi)部會(huì)積累一定量的塵埃，建議由維修工程師或在工程師指導(dǎo)下定期開(kāi)啟儀器外罩對(duì)內(nèi)部進(jìn)行除塵工作，同時(shí)將各發(fā)熱元件的散熱器重新緊固，對(duì)光學(xué)盒的密封窗口進(jìn)行清潔，必要時(shí)對(duì)光路進(jìn)行校準(zhǔn)，對(duì)機(jī)械部分進(jìn)行清潔和必要的潤(rùn)滑，最后恢復(fù)原狀，再進(jìn)行一些必要的檢測(cè)、調(diào)校和記錄。
4、正確使用比色皿拿比色皿時(shí)，手指只能捏住比色皿的毛玻璃面，不要碰比色皿的透光面，以免沾污。
清洗比色皿時(shí)，先用水沖洗，再用蒸餾水洗凈。若被比色皿被有機(jī)物沾污，可用鹽酸-乙醇混合洗滌液（1:2）浸泡片刻，再用水沖洗。
每次做完實(shí)驗(yàn)應(yīng)立即洗凈比色皿。比色皿外壁的水用擦鏡紙或細(xì)軟的吸水紙吸干，以保護(hù)透光面。
可見(jiàn)分光光度計(jì)是一種結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)潔、使用方便的單光束分光光度計(jì)，基于樣品對(duì)單色光的選擇吸收特性可用于對(duì)樣品進(jìn)行定性和定量分析。
廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥衛(wèi)生、臨床檢測(cè)、生物化學(xué)、石油化工、環(huán)保監(jiān)測(cè)、食品生產(chǎn)和質(zhì)量控制等部門(mén)作定性、定量分析，還可作為大、專(zhuān)院校和中學(xué)相關(guān)課程的教學(xué)演示和實(shí)驗(yàn)儀器。
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