1、液相色譜儀整機(jī)保養(yǎng)

　?。?）短期停機(jī)

　　在完成一天工作以后，都要停機(jī)等第二天再繼續(xù)工作，則可按以下步驟停機(jī)。

　　A）關(guān)閉二次儀表（記錄儀、積分儀或色譜工作站）。

　　B）關(guān)閉檢測器電源（同時(shí)切斷柱箱溫度檢測器的電源）。

　　C）停止恒流泵工作，然后切斷其電源。

　　D）用二次蒸餾水沖洗進(jìn)樣閥的進(jìn)樣孔（在“LOAD”和“INJECT”兩個(gè)位置）。

　　E）切斷實(shí)驗(yàn)室工作電源，加滿盛液瓶中的流動相，待第二天使用。

　　F）將儀器罩上防塵罩。

　?。?）長期停機(jī)

　　液相色譜儀數(shù)周或數(shù)月暫不使用，這時(shí)除按《短期停機(jī)》的A）～D）步驟處理外，還須完成以下步驟：

　　A）拆下恒流泵的流動相盛液瓶，換上色譜柱指定的保護(hù)試劑（例：甲醇、去離子水等），開啟泵數(shù)分鐘（流速0.5mL/min~1.5mL/min）后停泵。

　　B）從系統(tǒng)中拆下色譜柱，用專用的密封螺帽將柱管兩端密封后保存。

　　C）用普通φ1.6導(dǎo)管替代分離柱聯(lián)結(jié)。

　　D）用二次蒸餾水或去離子水輸入輸液泵，開啟泵，流量1mL/min~2mL/min，沖洗泵體、進(jìn)樣閥、檢測器流通池?cái)?shù)分鐘，在沖洗過程切換六通閥數(shù)次，使定量管得到清洗。

　　E）拆除替代柱的導(dǎo)管、泵輸入端和出口的導(dǎo)管和流通池輸入、輸出口導(dǎo)管，分別用螺帽密封輸液泵出口和流通池輸入、輸出口。

　　F）撥下總電源接線板的插頭，貯存好專用的流動相和樣品，用干布擦洗儀器，罩上防塵罩。

　　G）檢測器存放地點(diǎn)應(yīng)干燥

　　2、液相色譜儀輸液泵的保養(yǎng)

　　輸液泵是液相色譜儀的心臟部件，品質(zhì)再好的泵，若不注意日常保養(yǎng)，其損壞的幾率是極高的，將大大降低儀器的使用價(jià)值。

　　a)使用甲醇作流動相，請注意自身保護(hù)和環(huán)境保護(hù)，廢液注入空瓶內(nèi)，集中處理，不得倒入下水道內(nèi)。

　　b)輸液泵使用前，先注意探漏檢查，視各密封點(diǎn)和泵體有否漏液。

　　c)在無流動相通入的情況下，嚴(yán)禁啟動泵體電機(jī)，以免柱塞密封環(huán)磨損。

　　d)測試泵流量性能時(shí)，用于收集液體的容器，應(yīng)選用小口瓶頸的容器，防止收集過程中，溶液蒸發(fā)，影響測量精度。，必要時(shí)應(yīng)將其密封存放在干燥容器內(nèi)，以預(yù)防光學(xué)系統(tǒng)霉變。

　　e)金屬泵體的輸液泵，應(yīng)盡量避免使用含有鹵離子（如KCL、NaCL、NH4CL）的流動相或能產(chǎn)生鹵離子的流動相，若必須使用此類流動相，建議使用泵體用非金屬材料制造的輸液泵。方則使用后，應(yīng)立即使用去離子水清洗泵體和整個(gè)色譜系統(tǒng)的管路。

　　f)使用的流動相必須是HPLC級或分析純級，特別是配置的流動相，在使用前，必須過濾掉其中的顆粒狀雜質(zhì)和其他物質(zhì)（使用0.45μm的濾膜過濾）

　　g)長期不使用輸液泵，應(yīng)在最后分析結(jié)束時(shí)，用注射器吸取去離子水通過專用的泵頭清洗孔清洗泵體和柱塞桿。以延長密封圈和寶石柱塞桿的壽命。

　　h)輸液泵液路在維修或保養(yǎng)時(shí)，應(yīng)切斷儀器電源。非專業(yè)維修人員請不要打開機(jī)箱罩。

【過濾膜的類型】

  聚四氟乙烯膜（一般用于有機(jī)相）幾乎可以和所有的溶劑、酸和堿相容。

  尼龍66膜（一般用于有機(jī)相）可以和大多數(shù)溶劑、有機(jī)物和水相容，建議不要用于強(qiáng)酸、二氯甲烷和DMF。

  纖維素硝酸酯(一般用于水相)主要用于過濾器,可以和多數(shù)水性和非水性溶劑相溶,但不是所有的水性和非水性溶劑。

  再生纖維素膜一般用于HPLC生物樣品和有機(jī)溶劑的制備和過濾,是通用型HPLC過濾器,具有廣泛的溶劑相溶性,與蛋白質(zhì)鍵合作用低,非常低的可萃取性.在樣品溶液中有顆粒存在會造成故障時(shí)要用膜進(jìn)行過濾。

“漏”分兩種：漏液和漏氣。

漏液：

  液相色譜儀從流動相瓶到廢液瓶之間的流路是一個(gè)全封閉體系，內(nèi)部壓力很高，但外部卻能保證一滴不漏。如果某個(gè)部件發(fā)生漏液，那就是故障所在。

漏液的原因分兩種：

  接觸硬件不當(dāng)：在更換零件如流路管或換柱時(shí)，換的接頭接口不匹配，造成漏液。要注意不同公司的柱子接頭很多是不同的，甚至同一家公司在不同時(shí)期生產(chǎn)的液相柱接頭也有很大區(qū)別。當(dāng)然選項(xiàng)用PEEK接頭是一較好是一個(gè)較好的解決方法，不僅通用性好，而且靠手?jǐn)Q就能保證不漏液。即使是接口本身是匹配的，但是如果操作不當(dāng)也會漏液，一種不當(dāng)就是力度把握不好，擰得太緊或太松；另一種不當(dāng)就是致命的錯(cuò)誤：滑絲，這往往是動手能力不太強(qiáng)，螺絲釘很少擰的工作者犯的錯(cuò)誤，滑絲的后果不僅是漏液那么簡單，常造成重要部件的報(bào)廢。解決這個(gè)問題只能靠惡補(bǔ)基本功來實(shí)驗(yàn)，那就是擰螺絲。

  使用儀器不當(dāng)：只要互相有10%比例就不會出現(xiàn)這個(gè)問題。另一原因是在用緩沖液鹽溶液（不論甲醇含量有多少）作流動相時(shí)，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后沒有換甲醇水沖洗，使得微滲的流動相干燥形成晶體造成。不過，輸送泵漏液并不是非得馬上修不可，沖洗干凈并在以后的使用中多加小心一般都可以正常使用。檢測器漏液是個(gè)很麻煩的事，一般都是吸收池的問題，更換的費(fèi)用相當(dāng)高。但是并不是說一定要馬上更換，還可以從實(shí)際實(shí)驗(yàn)效果看能否湊合使用。

漏氣：

  漏液是從內(nèi)部向外漏，而漏氣則是外部了的氣體進(jìn)入液相色譜儀的流路內(nèi)部形成氣泡。下面按流路的方向逐個(gè)部件分析產(chǎn)生氣泡的原因和相應(yīng)解決方法。

2.1過濾頭：油液時(shí)，在流路管中有不規(guī)則但持續(xù)的小氣泡產(chǎn)生，這時(shí)考慮的是流動相有沒有脫氣（需要特別提醒即使是有了真空脫氣機(jī)也是要先超聲脫氣的，起碼可以減少脫氣機(jī)的工作壓力并提高工作效率），如果已經(jīng)脫砂壓力了氣，則要注意過濾頭的污染也會造成這種現(xiàn)象。處理方法比較簡單，擰下過濾頭在稀硝酸中浸泡，超聲半小時(shí)，洗凈后裝回去即可。

2.2透明流路管：指的是在過濾頭和輸送泵之間的那一段管路。這一個(gè)部分往往不是有點(diǎn)氣泡，而經(jīng)常是整個(gè)管中全是空氣而操作人員卻渾然不知，以致輸送泵工作了半天才發(fā)現(xiàn)流動相瓶里的液體一點(diǎn)也沒少。這也是我們常說的液相色譜儀至少一周要開機(jī)一次的原因（我們做液相一定要有“微滲”的概論）。如果長時(shí)間不用，這一段管路的液體會徹底干掉，而充滿空氣的管路和充滿液體的管路不仔細(xì)看是分辨不出來的。這種情況對于輸送泵很危險(xiǎn)，因?yàn)楸脧脑O(shè)計(jì)來說是輸送液體而不是輸送氣體，內(nèi)部的液體對于活塞來說起到了機(jī)油的作用，如果活塞桿還殘存了一些緩沖鹽，則極易拉傷，造成不可逆轉(zhuǎn)的影響。對于這種情況，要突出“預(yù)防為主”如：液相色譜使用人員要相對固定和穩(wěn)定，工作中合理搭配資源，每臺機(jī)一周至少一次實(shí)驗(yàn)，如長期不用起碼每周要沖流動相2小時(shí)。養(yǎng)成良好的工作習(xí)慣很重要。

如果流路管中真漏氣了怎么辦？

我的建議是用外力使管路中充滿液體。

具體如下：

1、找到流路管進(jìn)入輸送泵的接頭。

2、擰下來。

3、用一干凈洗耳球的對準(zhǔn)管路的平整切口。

4、吸液體，看液面從流動相瓶里上升，至離洗耳球5cm左右時(shí)停止該動作。

5、快速把接頭擰回輸送泵上（這個(gè)過程可能會有少許流動相外泄，這是正常現(xiàn)象）。

6、開機(jī)，打開排液閥門，啟動輸送泵。

7、等排液管中流出的溶液沒有氣泡時(shí)，再關(guān)閉排液閥，儀器正常工作。

2.3輸送泵和柱子：這些部分進(jìn)了氣泡一般不怕，沖掉就行。

2.4檢測器：應(yīng)該說整個(gè)流路中只要有一個(gè)氣泡都會在檢測器上得到強(qiáng)烈的信號反映，檢測器內(nèi)部的氣泡一般都能被沖走，但也有很難沖掉的殘留氣泡的情況。如果檢測器內(nèi)有殘留氣泡，會有特別明顯的表現(xiàn)形式，就是在走基線時(shí)會時(shí)不時(shí)間隔出現(xiàn)直上直下信號很大的信號峰。這時(shí)先看普通流量能否沖走，如果沖不走，那唯①的辦法就是拆柱，把檢測器直接連接到輸送泵的出口，加大幾部流量沖洗，則肯定能沖走氣泡。

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