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高效液相色譜在環(huán)境分析中的具體應(yīng)用 液相色譜如何操作

時(shí)間：2020-08-31    來源：儀多多儀器網(wǎng)    作者：儀多多商城     
   高效液相色譜在環(huán)境分析中的具體應(yīng)用
   多環(huán)芳烴類化合物的測定:
   EPA 列出的16 項(xiàng)多環(huán)芳烴為:萘、苊、二氫苊、笓、蒽、菲、苯并笓等。目前世界上公認(rèn)的多環(huán)芳烴類物質(zhì),特別是苯并笓是強(qiáng)致癌物質(zhì), 其廣泛存在于大氣飄塵、水、土壤、生物等環(huán)境中,嚴(yán)重影響身體健康。因此這方面所作的工作也比較多。Mzureen joseph的工作表明UV及熒光檢測器都能用于PAHs (多環(huán)芳烴)的檢測,UV檢測只用254nm而不用波長程序,對于EPA610方法規(guī)定來說, 靈敏度已足夠。但使用波長程序比熒光檢測靈敏度及選擇性更高,熒光檢測器與UV檢測器串聯(lián)會獲得可以的靈敏度及選擇性。
   酚類化合物的測定:
   EPA列出11項(xiàng)酚類化合物, 均是焦化、染料、造紙、化工等工業(yè)廢水的主要衍生物,酚類化合物應(yīng)用較廣,生產(chǎn)量大,不易降解,對環(huán)境污染較嚴(yán)重。其中苯酚是化工原料, 五氯酚是殺蟲劑、滅菌劑等。HPLC 測定酚類化合物, 可以保持酚類化合物組成不變,對各種不同取代基及不同結(jié)構(gòu)的酚類化合物可以同時(shí)進(jìn)行分離和分析,且具有重現(xiàn)性好、靈敏度高、擇性好的優(yōu)點(diǎn)。對于不同取代基的酚類化合物高效液相色譜圖參見《水和廢水監(jiān)測分析方法》中540頁圖4-4-5。間硝基酚的高效液相色譜圖中,其濃度采用Waters1525高效液相色譜儀配以2487高靈敏度雙通道紫外檢測器進(jìn)行分析,色譜柱為Symmetry(r)5μm反相C18柱,4.6×250mm,流速為1mL•min-1,進(jìn)樣量為20μL,波長為239nm , 流動相比例為乙腈/水=60/40。
   苯胺類化合物的測定:
   苯胺類化合物除廣泛用于化工、印染和制藥等工業(yè)生產(chǎn)外, 還是合成藥物、染料、殺蟲劑、高分子材料、炸藥等的重要原料。苯胺及其衍生物可以通過吸入、食入或透過皮膚吸收導(dǎo)致中毒,能通過形成高鐵血紅蛋白,損害人體血液系統(tǒng),其中一些苯胺衍生物還具有致癌致突變的作用,這類化合物對環(huán)境的污染一直受到關(guān)注,美國、日本等國把苯胺等列為主要監(jiān)測項(xiàng)目或優(yōu)先監(jiān)測的污染物黑名單, 在我國苯胺類化合物也被列為環(huán)境中的重點(diǎn)污染物并制定了最高允許排放濃度。苯胺類化合物一般在環(huán)境中有殘留, 因此分析環(huán)境樣品中的苯胺類化合物是十分重要的。苯胺化合物的測定在國家環(huán)保局所編的《水和廢水監(jiān)測分析方法》一書中所采用的就是利用HPLC方法進(jìn)行測定, 最低檢出限可以達(dá)到0.3μg/L。
   鄰苯二甲酸酯類化合物的測定:
   鄰苯二甲酸酯是一類重要的有機(jī)化合物質(zhì),在全球主要工業(yè)國的生態(tài)環(huán)境中已達(dá)到了普遍檢出的程度。鄰苯二甲酸酯在環(huán)境中殘留期較長,生物對鄰苯二甲酸酯有較強(qiáng)的富集作用。一旦進(jìn)入自然生態(tài)系統(tǒng)中,對公眾健康帶來的危害是無法估計(jì)的。EPA 將鄰苯二甲酸二異辛酯(DEHP)、鄰苯二甲酸二正辛酯(DOP)、鄰苯二甲酸丁基芐基酯(BBP)、鄰苯二甲酸二正丁酯(DBP)、鄰苯二甲酸二乙酯(DEP)、鄰苯二甲酸二甲酯(DMP)6 種PAEs 列為優(yōu)先控制的有毒污染物,我國也將DEP、DMP和DOP3種PAES確定為環(huán)境優(yōu)先控制污染物。用HPLC 分離和分析鄰苯二甲酸酯類化合物具有靈敏度高,選擇性好,快速簡便的優(yōu)點(diǎn)。鄰苯二甲酸二甲酯的高效液相色譜圖中,其濃度采用Waters 1525 高效液相色譜儀配以2487 高靈敏度雙通道紫外檢測器進(jìn)行分析,色譜柱為Symmetry(r)5μm 反相C18 柱,4.6×250mm,流速為1mL•min-1,進(jìn)樣量為20μL,波長為229nm,流動相比例為乙腈/水=60/40。
   多氯聯(lián)苯和鹵代化合物的測定:
   多氯聯(lián)苯是一組化學(xué)性質(zhì)及其穩(wěn)定的氯代烴類化合物,化學(xué)性質(zhì)非常穩(wěn)定,難以降解, 可通過食物鏈富集而直接危害人類的健康, 是全球性的重要污染物之一。多氯聯(lián)苯在環(huán)境中很難降解, 在水和土壤中存在, 且容易在生物體內(nèi)蓄積產(chǎn)生慢性中毒,人體攝入(0.5～2)g/kg 時(shí)即出現(xiàn)食欲不振、惡心、頭暈和肝腫大等中毒現(xiàn)象。EPA列出的重點(diǎn)污染物中的多氯聯(lián)苯有7種,都是各種多氯聯(lián)苯異構(gòu)體的混合物,也是重要的內(nèi)分泌干擾物。利用HPLC測定多氯聯(lián)苯已有報(bào)道,孫維相采用氯化鋰鋁為還原劑,將多氯聯(lián)苯還原去氯生成聯(lián)苯,再用HPLC測定總量。
   苯基脲類化合物的測定:
   苯基脲類化合物首先被用作除草劑，進(jìn)而又被作為殺蟲劑和農(nóng)作物的生長調(diào)節(jié)劑而獲得廣泛應(yīng)用，因此這一類化合物在食品中殘留量的測定十分重要。由于苯基脲類化合物的不穩(wěn)定性，HPLC測定成為的方法。Waiters等發(fā)展了反相色譜紫外(uv)和光導(dǎo)檢測(PCD)分離測定這一類化合物的方法。液相色譜一質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)對復(fù)雜環(huán)境樣品分析是非常有效的，它不僅可以提供被分離化合物的結(jié)構(gòu)信息，而且又可能提供比常規(guī)檢測器。如UV更高的檢測靈敏度。在液相色譜一質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)中，通常采用細(xì)管徑液相色譜柱進(jìn)行樣品分離。
   酞酸酯類化合物的測定:
   酞酸酯類化合物主要用作增塑劑大量添加到各種軟制品塑料中。由于此類化合物沒有與塑料基質(zhì)發(fā)生聚合，因而隨著塑料制品的使用可由塑料中轉(zhuǎn)移到環(huán)境中去，造成對土壤、水體等的環(huán)境污染。另外，含有酞酸酯類的化妝品造成的孕婦流產(chǎn)、嬰兒畸型等病癥在我國已有很多臨床病例報(bào)道。因此對酞酸酯的監(jiān)測和控制十分重要。趙貴平等一刊用HPLC—MS法有效地監(jiān)測了化妝品中的內(nèi)分泌干擾素之一的酞酸酯類化學(xué)品，使用質(zhì)譜檢測器既可降低檢測限還可以避免光譜檢測器可能出現(xiàn)的雜質(zhì)干擾，減少假陽性結(jié)果的出現(xiàn)。
   當(dāng)前HPLC技術(shù)正趨于較為完善階段,并取得了舉世矚目的進(jìn)展,在環(huán)境監(jiān)測領(lǐng)域得到了廣泛應(yīng)用,為分析環(huán)境中大多數(shù)有機(jī)污染物，有毒物質(zhì)，監(jiān)測環(huán)境質(zhì)量開辟了廣闊的前景。而伴隨著各種新型檢測器(如間接熒光檢測器、激光光散射質(zhì)量檢測器、激光誘導(dǎo)熒光檢測器等) 陸續(xù)研制成功并投放市場, 環(huán)境分析中的液相色譜技術(shù)也將有一個(gè)全新的發(fā)展。據(jù)了解很多國家都在進(jìn)一步投注于縮短高效液相色譜的分析時(shí)間，提高它的分析效率上，并逐步向自動化、智能化及質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)上發(fā)展。那在不久的將來，伴隨液相色譜技術(shù)的提高，應(yīng)用的擴(kuò)展，對環(huán)境的監(jiān)督力度勢必有很大提高。所以人們生活環(huán)境的質(zhì)量也將會有一個(gè)全新的狀態(tài)，并將向更健康的生活狀態(tài)中發(fā)展。

安捷倫液相色譜儀的維修與保養(yǎng)

1、安捷倫液相色譜儀用不同批號的色譜柱后如何對分析方法進(jìn)行測試并確認(rèn)可用此柱？

首先，在色譜柱包裝盒的外面找到它的批號。批號的字體比較小，通常在條形碼的下面。批號通常以字母“B”開頭，后面是 5 位阿拉伯?dāng)?shù)字。例如，下面示例中的色譜柱批號為 B99091。 如果找不到包裝盒，則查看色譜柱標(biāo)簽上的序列號。要從序列號來確定批號，請安捷倫科技公司 HPLC 色譜柱的。他們會請公司生產(chǎn)部門來查詢批號，同時(shí)確定其它哪些批號的色譜柱可用。 獲得所需的批號或知道您的批號后，可使用以下步驟進(jìn)行訂購： 從安捷倫科技公司。使用特殊的部件號 899999-888, 該號碼表示此訂單是專用色譜柱。 說明要訂購的色譜柱的類型、尺寸和填料粒度大小，包括通用部件號。指出您希望色譜柱是哪個(gè)批號，或者哪個(gè)批號的色譜柱不能用。示例說明: 部件號 899999-888 Eclipse XDB-C18 分析色譜柱，4.6mm x 250mm，(963967-902) 除了批號為 B99091 和 B99079 的專用色譜柱 用于方法確認(rèn)目的的色譜柱

                              

2、安捷倫液相色譜儀-如何避免峰拖尾和峰分叉？

  與色譜柱相關(guān)的原因及處理方法 

  1 色譜柱污染; 處理方法:清洗或更換色譜柱

  2色譜柱填料有問題;處理方法:反沖色譜柱或更換柱頭過濾片

  3 色譜柱中間出現(xiàn)間斷;處理方法:更換色譜柱或填充空隙 

  4 保護(hù)柱失效;處理方法:更換保護(hù)柱 

  5 樣品分布差;處理方法:改進(jìn)色譜柱進(jìn)口的設(shè)計(jì) 

  6 與色譜柱無關(guān)的原因：柱外體積大、樣品過量、流動相組分（添加劑、pH值、緩沖液濃度）改變。

3、什么原因?qū)е?i>安捷倫液相色譜儀出現(xiàn)神秘峰”？

  與色譜柱相關(guān)的原因： 

  1 色譜柱污染; 處理方法:清洗或更換色譜柱 

  2 保護(hù)柱失效; 處理方法:更換保護(hù)柱 

  3 與色譜柱無關(guān)的原因：流動相溶不純、樣品里有其他成分、系統(tǒng)里有氣泡、電路問題。

 

更多關(guān)于安捷倫液相色譜儀與色譜柱的產(chǎn)品相關(guān)信息，可訪問我公司或致電銷售工程師。

 

　　1、氣泡溢出
 　　流動相內(nèi)有氣泡，關(guān)閉泵，打開泄壓閥，打開purg鍵，清洗脫氣，氣泡不斷從過濾器冒出，進(jìn)入液相色譜流動相，無論打開purge鍵幾次，都無法清除不斷產(chǎn)生的氣泡。原因過濾器長期沉浸于乙酸銨等緩沖液內(nèi)，過濾器內(nèi)部由于霉菌的生長繁殖，形成菌團(tuán)，阻塞了過濾器，緩沖液難以流暢地通過過濾器，空氣在泵的壓力作用下經(jīng)過濾器進(jìn)入流動相。處理過濾器浸泡于5%硝酸溶液中，超聲清洗幾分鐘即可；亦可將過濾器浸泡于5%硝酸溶液中12～36小時(shí)，輕輕震蕩幾次，再將過濾器用純水清洗幾次，打開泄壓閥，打開purge鍵清洗脫氣，如仍有氣泡不斷從過濾器冒出，繼續(xù)將過濾器浸泡于5%硝酸溶液中，如沒有氣泡不斷從過濾器中冒出，說明過濾器內(nèi)部的霉菌菌團(tuán)已被硝酸破壞，流動相可以流暢地通過過濾器。打開泄壓閥，打開泵，流速調(diào)至1.0～3.0ml/min，純水沖洗過濾器1小時(shí)左右。即可將過濾器清洗干凈。關(guān)閉泄壓閥，純甲醇沖洗半小時(shí)即可。
 液相色譜儀
 　　2、峰面積重復(fù)性不佳
 　　(1)進(jìn)樣閥漏液。
 　　(2)加樣針不到位。
 　　(3)液量不足。處理對于*種情況更換進(jìn)樣閥墊圈；對于第二種情況保證加樣針插到底，注射樣品溶液后須快速、平穩(wěn)地從LOAD狀態(tài)轉(zhuǎn)換到INJECT狀態(tài)，以保證進(jìn)樣量的準(zhǔn)確。日常工作中，液相色譜儀的保養(yǎng)非常重要，如要注意不要讓空氣進(jìn)入輸液系統(tǒng)和高壓泵中，儲液器內(nèi)的溶液如長時(shí)間未用應(yīng)清洗儲液器并更換溶液，每次用完色譜儀后緩沖液要用純水沖洗干凈，防止無機(jī)鹽析出或沉積；樣品的前處理也很重要，任何樣品都要盡可能地去除雜質(zhì)，完全溶解，盡量減少對色譜柱的污染，以延長色譜柱的使用壽命，同時(shí)避免注射過濃的樣品溶液，以免殘留液在進(jìn)樣閥內(nèi)析出固體引起堵塞；色譜柱作好標(biāo)記，用于不同分析目的的色譜柱不要混用等。
 　　3、柱壓高原因
 　　(1)緩沖液鹽分如(乙酸銨等)沉積于柱內(nèi)。
 　　(2)樣品污染沉積。處理對于*種情況先用40～50℃的純水，低速正向沖洗柱子，待柱壓逐漸下降后，相應(yīng)提高流速沖洗，柱壓大幅度下降后，用常溫純水沖洗，之后用純甲醇沖洗柱子30分鐘；對于第二種情況，由樣品的沉積引起污染的C18柱，和純水反向沖洗柱子，然后換成甲醇沖洗，接著用甲醇+異丙醇(4+6)沖洗柱子(沖洗時(shí)間的長短由樣品污染的情況而定)，再用換成甲醇沖洗，然后用純水沖洗，zui后甲醇沖洗正向沖洗柱子30分鐘以上。
 　　4、既無壓力指示，又無液體流過
 　　(1)泵密封墊圈磨損。
 　　(2)大量氣泡進(jìn)入泵體。處理對于*種情況，更換密封墊圈；對于第二種情況，在泵作用的同時(shí)，用一個(gè)50ml的玻璃針筒在泵的出口處幫助抽出空氣。
 　　5、壓力波動大，流量不穩(wěn)定
 　　原因系統(tǒng)中有空氣或者單向閥的寶石球和閥座之間夾有異物，使得兩者不能密封。處理工作中注意觀察流動相的量，保證不銹鋼濾器沉入儲液器瓶底，避免吸入空氣，流動相要充分脫氣。如為單向閥和閥座之間夾有異物，拆下單向閥，放入盛有丙酮的燒杯用超聲波清洗。
 　　6、出峰不佳，峰分叉
 　　(1)色譜柱被污染。
 　　(2)柱頭填料塌陷。處理對于*種情況，先用純水反向沖洗柱子，然后換成甲醇沖洗，接著用甲醇+異丙醇(4+6)沖洗柱子(沖洗時(shí)間的長短由樣品污染的情況而定)，再換成甲醇沖洗，然后用純水沖洗，zui后甲醇沖洗正向沖洗柱子30分鐘以上。如沖洗后依然出峰不佳，則考慮第二種情況。對于第二種情況，擰開柱頭，檢查柱填料是否硬結(jié)或塌陷。去除硬結(jié)部分(污染的填料)，裝入新填料，滴一滴甲醇，填料下陷，再填，用與柱內(nèi)徑相同的頂端平滑的不銹鋼桿壓緊，再填平，滴甲醇，再壓緊反復(fù)幾次，直至裝滿填平。柱頭用甲醇沖洗干凈，擦凈柱外壁的填料，擰緊柱頭，用純甲醇沖洗30分鐘以上。
 　　------ 責(zé)任編輯：瑞利祥合--分析儀器采購顧問
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