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高效液相色譜法及其與氣相色譜法的區(qū)別 液相色譜技術(shù)指標

時間:2020-08-31    來源:儀多多儀器網(wǎng)    作者:儀多多商城     

高效液相色譜法:
特指一種用液體為流動相的色譜分離分析方法。它在經(jīng)典色譜理論的基礎(chǔ)上,采用了高壓泵、化學(xué)鍵合固定相高效分離柱、高靈敏專用檢測器等新實驗技術(shù)建立的一種液相色譜分析法。
高壓:150-350*105 Pa
高效:大于30000塔板/米
高靈敏:10-9g (紫外檢測)、10-11g (熒光檢測)
液相色譜儀與氣相色譜儀的區(qū)別:
1。分析對象的區(qū)別
GC:適于能氣化、熱穩(wěn)定性好、且沸點較低的樣品;但對高沸點、揮發(fā)性差、 熱穩(wěn)定性差、離子型及高聚物的樣品,尤其對大多數(shù)生化樣品不可檢測 占有機物的20%
HPLC:適于溶解后能制成溶液的樣品(包括有機介質(zhì)溶液),不受樣品揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性的限制,對分子量大、難氣化、熱穩(wěn)定性差的生化樣品及高分子和離子型樣品均可檢測 用途廣泛,占有機物的80%
2。流動相差別的區(qū)別
GC:流動相為惰性,氣體組分與流動相無親合作用力,只與固定相有相互作用。
HPLC:流動相為液體,流動相與組分間有親合作用力,能提高柱的選擇性、改善分離度,對分離起正向作用。且流動相種類較多,選擇余地廣,改變流動相極性和pH值也對分離起到調(diào)控作用,當選用不同比例的兩種或兩種以上液體作為流動相也可以增大分離選擇性。
3。操作條件差別
GC:加溫操作
HPLC:室溫;高壓(液體粘度大,峰展寬小)
關(guān)鍵詞:液相色譜儀,液相色譜法,高效液相色譜儀,氣相色譜儀

   液相色譜儀在生活中應(yīng)用還是非常廣泛的,因為這種色譜儀比較現(xiàn)代化,且內(nèi)部的設(shè)備和設(shè)施也是專業(yè)化的,尤其是對于生物醫(yī)學(xué)和環(huán)境化學(xué)來說,它還為生物學(xué)的研究做出了很大的貢獻。使我們的生活更加方便快捷。液相色譜儀是指利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異,對混合物進行先分離,而后分析鑒定的儀器。
  那么在潮濕環(huán)境中液相色譜儀如何維護呢?下面我們一起來了解下吧!
  操作人員關(guān)心的是分析結(jié)果,而檢測器是HPLC的眼睛。由于很多時候天氣潮濕,很容易使檢測器精密的光學(xué)部件性能受到影響,導(dǎo)致靈敏度下降或波長檢驗通不過,更嚴重者:燈電路板、預(yù)放大板及CPU板同時被短路擊壞。而這類情況在干燥的北方地區(qū)則比較少。由此可見,潮濕氣候?qū)x器損害之大。
  在多雨季節(jié)到來之前,勿請用戶將儀器調(diào)整放置在通風(fēng)條件好,濕度低(<70%、的實驗室內(nèi)。同時,給實驗室配備去濕機、空調(diào)及通風(fēng)裝置。表面上看,雖然增加了支出,但您的實際回報將大大超出您的支出。
  液相色譜儀注意事項:
  1、流動相均需色譜純度,水用20M的去離子水。脫氣后的流動相要小心振動盡量不引起氣泡。
  2、柱子是非常脆弱的,做的方法,先不要讓液體過柱子。
  3、所有過柱子的液體均需嚴格的過濾。
  4、壓力不能太大,建議不要超過150kgf/cm2 .
  5、因為緩沖試劑遇有機溶劑,會結(jié)晶,有損色譜柱,所以,每次由有機相變流動相或流動相變有機相均需用蒸餾水清潔。
  液相色譜儀使用范圍:應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)、環(huán)境化學(xué)、石油化工等部門。
  以上講解的是潮濕環(huán)境中如何維護液相色譜儀的知識,希望能幫助到您哦!

 


  氣相色譜是二十世紀五十年代出現(xiàn)的一項重大科學(xué)技術(shù)成就。這是一種新的分離、分析技術(shù),它在工業(yè)、農(nóng)業(yè)、國防、建設(shè)、科學(xué)研究中都得到了廣泛應(yīng)用。同為色譜技術(shù)之一,液相色譜也是一種分離與分析技術(shù),它的特點是以液體作為流動相,固定相可以有多種形式,如紙、薄板和填充床等。那么,氣相色譜和液相色譜相比各有什么特點呢?可以從以下幾個方面進行考察:
 
  一、流動相
 
  GC用氣體作流動相,又叫載氣。常用的載氣有氦氣、氮氣和氫氣。與HPLC相比,GC流動相的種類少,可選擇范圍小,載氣的主要作用是將樣品帶入GC系統(tǒng)進行分離,其本身對分離結(jié)果的影響很有限。而在HPLC中,流動相種類多,且對分離結(jié)果的貢獻很大。換一個角度看,GC的操作參數(shù)優(yōu)化相對HPLC要簡單一些。此外,GC載氣的成本要低于HPLC流動相的成本。
 
  二、固定相
 
  因為GC的載氣種類相對少,故其分離選擇性主要通過不同的固定相來改變,尤其在填充柱GC中,固定相常由載體和涂敷在其表面的固定液組成,這對分離有決定性的影響,所以,導(dǎo)致了種類繁多的GC固定相的開發(fā)研究。迄今已有數(shù)百種GC固定相可供我們選擇使用,但常用的HPLC固定相也就十幾種。故LC在很大程度上要靠選用不同的流動相來改變分離選擇性。當然,毛細管GC常用的固定相也不過十幾種。在實際分析中,GC一般是選用一種載氣,然后通過改變色譜柱(即固定相)以及操作參數(shù)(柱溫和載氣流速等)來優(yōu)化分離,而LC則往往是選定色譜柱后,通過改變流動相的種類和組成以及操作參數(shù)(柱溫和流動相流速等)來優(yōu)化分離。
 
  三、分析對象
 
  GC所能直接分離的樣品是可揮發(fā)、且熱穩(wěn)定的,沸點一般不超過500℃。據(jù)有關(guān)資料統(tǒng)計,在目前已知的化合物中,有20%~25%可用GC直接分析,其余原則上均可用LC分析。也就是說GC的分析對象遠沒有LC多。需要指出的是,有些雖然不能用GC直接分析的樣品,通過特殊的進樣技術(shù),如頂空進樣和裂解進樣,也可用GC間接分析。比如高分子材料的裂解色譜就是如此。這在一定程度上擴大了GC分析對象的范圍。此外,GC比LC更適合于氣體的分析。
 
  四、檢測技術(shù)
 
  GC常用的檢測技術(shù)有多種,比如熱導(dǎo)檢測器(TCD)、火焰離子化檢測器(FID)、電子俘獲檢測器(ECD)、氮磷檢測器(NPD)等,其中FID對大部分有機化合物均有響應(yīng),且靈敏度相當高,小檢測限可達納克級。而在LC中尚無通用性這么好的高靈敏度檢測器。商品LC儀器常配的也就是紫外-可見光吸收檢測器(UV-Vis)和示差折光檢測器(RI)。前者的通用性遠不及GC中的FID,后者的靈敏度又較低,且不適于梯度洗脫。當然,不論GC還是LC,都有一些高靈敏度的選擇性檢測器,GC有ECD和NPD等,LC有熒光和電化學(xué)檢測器。較為理想的檢測器應(yīng)該首推MS,但在這一點上,GC目前要優(yōu)于LC。因為GC流動相的特點,它與MS的在線聯(lián)用已不存在任何問題,特別是毛細管GC與MS的聯(lián)用已成為常規(guī)分析方法。而LC與MS的聯(lián)用就受到了流動相的限制。雖然目前已有多種接口,如離子束、熱噴霧、電噴霧等,但流動相的選擇還是受到明顯的限制。
 
  五、制備分離
 
  在新產(chǎn)品的研究開發(fā)過程中,或在未知物的定性鑒定工作中,常需要收集色譜分離后的組分作進一步分析,而某些高純度的生化試劑則是直接用色譜分離來制備的。就這一點而言,GC在原理上應(yīng)該是有優(yōu)勢的,因為收集餾分后載氣很容易除去。然而,由于GC的柱容量遠不及LC,如果用GC作制備,那是相當費時的。因此,制備GC的實用價值很有限。制備LC則有很廣泛的應(yīng)用。

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