紫外分析儀是利用紫外光源發(fā)出并濾去其中殘留可見光后的紫外輻射,均勻輻照待分析的熒光樣品的儀器。按照觀測熒光方式不同,紫外分析儀分為反射式和透射式。反射式紫外分析儀常用波長為254nm和365nm,適用于各種不透明材料的熒光檢測與分析;透射式紫外分析儀常用280nm~320nm中的輻射,適用于DNA、RNA電泳凝膠等透明樣品的觀察與拍攝。紫外分析儀由紫外光源、濾光片、操作臺組成。
一、峰值波長示值誤差
首先開啟光譜儀,然后打開紫外分析儀的被測光源。待光源穩(wěn)定后,把光譜儀的探測器置于光源投射方向進行測試,獲得的相對光譜功率分布最大值對應的波長為該光源的峰值波長,重復測量3次,按以下公式得出峰值波長的示值誤差。
式中:
?λp,一紫外分析儀光源峰值波長示值誤差,nm;
λo一紫外分析儀光源峰值波長標稱值,nm;
λp一紫外分析儀光源峰值波長3次測量結(jié)果的平均值,nm。
二、紫外輻射照度
反射式紫外分析儀,放置在暗室中或用黑布遮去周圍亮光(樣品臺帶有暗箱除外)。調(diào)節(jié)紫外分析儀的光源發(fā)光面與樣品臺平行。接通電源,打開任意其中一光源穩(wěn)定10min后,使用紫外輻射照度計,將探測器受光面正對光源發(fā)光面,并根據(jù)使用情況放在距離發(fā)光面幾何中心下方250px~500px處并記錄下實際距離。如光源發(fā)光面為固定距離,則把探頭放在樣品臺中間位置,同時屏莜雜散光。
透射式紫外分析儀,放置在暗室中或用黑布遮去周圍亮光(樣品臺帶有暗箱除外)。使用紫外輻射照度計,將探測器放置在光源平面紫外濾光片的中心位置,探頭受光面垂直朝下正對光源。
測量時人員須帶上紫外線防護裝備,每種光源重復測量3次紫外輻射,取平均值為該光源的紫外輻射照度值。
式中:
Ei一第i次測量的紫外輻射照度值,i=1,2,3;μW/cm2;
E一3次測量的紫外輻射照度平均值,μW/cm2。