紫外可見分光光度計來自于美國，產品包含光源，單色器，吸收池，檢測器和顯 示器等，它是一款對物質進行定性，定量以及結構分析的儀器。這款儀器和人們常 用的可見光光度計有有很大的區(qū)別，除了波長范圍，使用光源都不一樣等，價格也 是后者要要貴一些；平時的使用和注意事項不一樣的，今天就先來學習一下紫外可見分光光度計使用方法：
1.試驗中所用的量瓶、移液管均應經檢定校正、洗凈后使用。
2.使用的石英吸收池必須潔凈。用于盛裝樣品、參比及空內溶液的吸收池，當裝 入同一溶劑時，在規(guī)定波長測定吸收池的透光率，如透光率相差在0.3%以下者可配 對使用，否則必須加以校正。
3.取吸收池時，手指拿毛玻璃面的兩側。裝盛樣品溶液以池休積的4/5為度，使用 揮發(fā)性溶液吋應加蓋，透光面要用擦鏡紙由上而下擦拭干凈，檢視應無殘留溶劑。 為防止溶劑揮發(fā)后溶質殘留在池子的透光面，可先用蘸有空白溶劑的擦鏡紙擦拭， 然后再用干擦鏡紙拭凈。吸收池放入樣品室時應注意每次放入方向相同。使用后用 洗液及水沖洗干凈，晾干防塵保存，吸收池發(fā)現污染不易洗凈時可用硫酸發(fā)煙硝酸(3 ：1V/V)混合液稍加浸泡后，洗凈備用。如用重鉻酸鉀清潔液清洗時，吸收池不貧在 清潔液中長時間浸泡，否則清潔液中的重鉻酸鉀結晶會損壞吸收池的光學表面，并 應充分甩水沖洗，以防重鉻酸鉀吸附于吸收池表面。
4.測定前應先檢查所用的溶劑在測定供試品所用的波長附近是否符合要求，可用 lcm石英吸收池盛溶劑以空氣為空白（即參比光路中不放置任何物質)測定其吸收度 ，應符合規(guī)定。
5.稱量應按藥典規(guī)定要求。配制測定溶液時稀釋轉移次數應盡可能少，轉移稀釋 時所取容積一般應不少于5cm。含量測定供試品應稱取2份，如為對照品比較法，對 照品一般也應稱取2份。吸收系數檢查也應稱取供試品2份，平行操作，每份結果對 平均值的偏差應在±0.5%以內。作鑒別或檢查可取樣品1份。
6.供試品測定溶液的濃度，除各該品種項下已有注明者外，供試品溶液的吸收度 以在0.3~0.7之間為宜，吸收度讀數在此范圍誤差較小，并應結合所用儀器吸收度線 性范圍，配制合適的讀數濃度。
7.選用儀器的狹縫譜帶寬度應小于供試品吸收帶的半寬度，否則測得的吸收度值 會偏低，狹縫寬度的選擇應以減小狹縫寬度吋供試品的吸收度不揮增加為準，對于 紫外測定的部分品種，可以使用2nm縫寬，但對某些品種如青霉素鉀及鈉的吸收度 檢查則需用lnm縫寬或更窄，否則其264nm的吸收度會偏低。
8.測定時除另有規(guī)定者外，應在規(guī)定的吸收峰±2nm處，再測幾點的吸收度，以核 對供試品的吸收峰位置是否正確，并以吸收度最大的波長作為測定波長，除另有規(guī) 定外吸收度最大波長應在該品種項下規(guī)定的波長±lnm以內，否則應考慮試樣的同一 性、純度以及儀器波長的準確度
9.除另有規(guī)定外，比色法所用的空內系指用同休積的溶劑代替對照品或供試品溶 液，然后依次加入等量的相應試劑，并用同樣方法處理。
10.當吸收度和濃度關系不呈線性關系時，應取數份梯度量的對照濃度，用溶劑補 充至同一休積，顯色后測定各份溶液的吸收度，然后以吸收度與相應的濃度繪制標 準曲線，再根據供試品的吸收度在標準曲線上求出其含量。
紫外可見分光光度計對于我們來說熟悉卻也比較難讀懂理解的。
天天有人提起他的名字卻沒多少人知道他的工作原理。
下面我們來淺談一下。
光譜工作原理：
分子的紫外可見吸收光譜是由于分子中的某些基團吸收了紫外可見輻射光后，發(fā)生了電子能級躍遷而產生的吸收光譜。
由于各種物質具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結構，其吸收光能量的情況也就不會相同；
因此，每種物質就有其特有的、固定的吸收光譜曲線；
可根據吸收光譜上的某些特征波長處的吸光度的高低判別或測定該物質的含量，這就是分光光度定性和定量分析的基礎。
分光光度分析就是根據物質的吸收光譜研究物質的成分、結構和物質間相互作用的有效手段。
它是帶狀光譜，反映了分子中某些基團的信息。可以用標準光圖譜再結合其它手段進行定性分析。
根據Lambert-Beer定律說明光的吸收與吸收層厚度成正比，比耳定律說明光的吸收與溶液濃度成正比；
如果同時考慮吸收層厚度和溶液濃度對光吸收率的影響，即得朗伯-比耳定律。
即A=εbc，(A為吸光度，ε為摩爾吸光系數，b為液池厚度，c為溶液濃度)就可以對溶液進行定量分析。
將分析樣品和標準樣品以相同濃度配制在同一溶劑中，在同一條件下分別測定紫外可見吸收光譜。
若兩者是同一物質，則兩者的光譜圖應完全一致。
如果沒有標樣，也可以和現成的標準譜圖對照進行比較。
這種方法要求儀器準確，精密度高，且測定條件要相同。
實驗證明，不同的極性溶劑產生氫鍵的強度也不同;
這可以利用紫外光譜來判斷化合物在不同溶劑中氫鍵強度，以確定選擇哪一種溶劑。
紫外可見分光光度計的工作環(huán)境：
1）分光光度計安放在干燥的房間內，使用溫度為5-35℃，相對濕度不超過85%
2）儀器應放置在堅固平穩(wěn)的工作臺上，且避免強烈的震動或持續(xù)的震動
3）室內照明不宜太強，且應避免直射日光的照射
4）電扇不宜直接向儀器吹風，以防止光源燈因發(fā)光不穩(wěn)定而影響儀器的正常使用
5）盡量遠離高強度的磁場、電場及發(fā)生高頻波的電氣設備
6）避免在有硫化氫等腐蝕性氣體的場所使用
紫外可見分光光度計引用新型技術，其功能強大，采用單色器技術，波長范圍190-1100nm，是各種涉及水和廢水分析領域的通用儀器，應用范圍包括市政和工業(yè)廢水，飲用水，加工過程用水，地表水，冷卻水和鍋爐補給水等。
紫外可見分光光度計應用：
在水和廢水監(jiān)測中的應用，對于一個水系的監(jiān)測分析和綜合評價，一般包括水相（溶液本身）、固相（懸浮物、底質）、生物相（水生生物）。在水質的常規(guī)監(jiān)測中，紫外可見分光光度法占有較大的比重。由于水和廢水的成分復雜多變，待測物的濃度和干擾物的濃度差別很大，在具體分析時必須選擇好分析方法。
在農產品和食品分析中可用于檢測的組分或成分有蛋白質、賴氨酸、葡萄糖、維生素C、硝酸鹽、亞硝酸鹽、砷、汞等;
在植物生化分析中可用于檢測葉綠素、全氮和酶的活力等；
在飼料分析中可用于檢測煙酸、棉酚、磷化氫和甲酯等。
紫外可見分光光度計維護要點：
一、溫度和濕度是影響儀器性能的重要因素。他們可以引起機械部件的銹蝕，使金屬鏡面的光潔度下降，引起儀器機械部分的誤差或性能下降;造成光學部件如光柵、反射鏡、聚焦鏡等的鋁膜銹蝕，產生光能不足、雜散光、噪聲等，甚至儀器停止工作，從而影響儀器壽命。維護保養(yǎng)時應定期加以校正。應具備四季恒濕的儀器室，配置恒溫設備，特別是地處南方地區(qū)的實驗室。
二、環(huán)境中的塵埃和腐蝕性氣體也會影響機械系統(tǒng)的靈活性、降低各種限位開關、按鍵、光電偶合器的可靠性，也是造成必須學部件鋁膜銹蝕的原因之一。因此必須定期清潔，保障環(huán)境和儀器室內衛(wèi)生條件，防塵等。
三、儀器使用一定周期后，內部會積累一定量的塵埃，建議由維修工程師或在工程師指導下定期開啟儀器外罩對內部進行除塵工作，同時將各發(fā)熱元件的散熱器重新緊固，對光學盒的密封窗口進行清潔，必要時對光路進行校準，對機械部分進行清潔和必要的潤滑，最后，恢復原狀，再進行一些必要的檢測、調校與記錄。
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