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液相色譜的參數(shù)注意事項和選擇及工作原理

時間:2020-04-10    來源:儀多多儀器網    作者:儀多多商城     

液相色譜的參數(shù)注意事項和選擇

  一.液相色譜主要技術指標優(yōu)異:

  首先是如何看指標。液相色譜儀的指標很多,有泵的、檢測器的、色譜柱等等。我們認為要看主要技術指標,根據國家標準,儀器的主要指標有噪音,漂移,最小檢測濃度,定性定量重復性等。這些指標都要放在系統(tǒng),回路里去看,去比較。就是需要把各單元裝置都要聯(lián)接好,如接好色譜柱,進樣閥,并且要通上流動相。因為您在分析中也都是聯(lián)接好以后才可以進行分析的,而不是單單用個檢測器或是泵的。

  然后在這個基礎上,我們再去比較這些主要指標。

  1.噪音

  是指由儀器的電器元件、溫度波動、電壓的線性脈沖以及其他非溶質作用產生的高頻噪聲和基線的無規(guī)則波動。噪音的大小直接關系到儀器的檢測靈敏度,噪音越大,檢測的靈敏度就越低。對于檢測低含量的樣品就要求儀器的噪音越小越好,否則噪音過大將會導致基線不穩(wěn),甚至影響分析結果。

  2.最小檢測濃度(最小檢測限)

  是反映儀器靈敏度的重要參數(shù)。CL=2×Nd×C/H(CL :最小檢測濃度 Nd:噪音 C:樣品濃度最小檢測濃度 H:樣品峰高)由上式可見,最小檢測濃度是和噪音成正比的,噪音越大,最小檢測濃度就越大,靈敏度就越低。某些廠家回避了這個指標,說明他們不愿在最小檢測濃度的基礎上去比較噪音。

  3.漂移

  是指儀器穩(wěn)定后一段時間內基線漂離原點的距離,通常用來衡量儀器穩(wěn)定快慢。高品質的儀器能在較短的時間內達到穩(wěn)定,從而在一定程度上提高了分析效率。

  4.定性定量重復性

  主要是考核儀器穩(wěn)定性的指標,這對于分析樣品來說是非常重要的。好的儀器其穩(wěn)定性應該是十分優(yōu)秀的,這就要求多次進樣保留時間及含量的一致性,這樣做出來的結果才能使人信服。

  有的朋友會認為這些指標好像都是檢測器的。對的,但是就前面所說條件是要放在整個回路和系統(tǒng)里去看去比較。例如:泵的脈動會直接影響噪音指標,泵的流量準確度、精確度指標,以及密封性不好也會影響相關指標。所以要系統(tǒng)地看指標。例如:某些公司在公布的指標中,噪音和漂移指標寫的條件是空池或有的干脆不寫。這個指標只考核了UV檢測器光學和電氣的特性,與實際情況相差甚遠,并沒有考驗泵的壓力脈動,液流回路的阻尼和UV檢測器流通池的性能。所以我們認為從以上的主要指標中可以反應出儀器的一些真實水平。

  二.液相色譜操作方便:

  操作方便性無論是對新手還是成熟的用戶都是很重要的。操作越簡單,有利于提高分析效率,也為以后分析方法的拓展提供有力的幫助。

  三.液相色譜系統(tǒng)的整體開發(fā)

  這里指的是儀器的整體開發(fā),是一個完整的系統(tǒng)。目前市場上有這個現(xiàn)象,說我的泵是進口的,或者是檢測器怎么好,用了什么很多的進口件組裝等等。其實這是個誤區(qū)。液相色譜是個復雜的系統(tǒng),不是整體開發(fā)的,各項指標之間、軟件和硬件、硬件和硬件等都不匹配,整體水平不會高到哪里去,而且在售后服務方面對用戶也是不負責任的。

標簽: 液相色譜
液相色譜 液相色譜的參數(shù)注意事項和選擇_液相色譜

液相色譜儀原理與應用

    液相色譜儀的應用,可用于高沸點、熱穩(wěn)定性差以及具有生理活性物質的分析。一般來說,沸點在450℃以下,相對分子質量小于450的有機物可用液相色譜儀分析,但這些物質只占有機物的15%~20%,其余的80%~85%有機物原則上都可采用高效液相色譜儀分析。


    色譜柱的使用和維護,色譜柱的正確使用和維護十分重要,稍有不慎就會降低柱效、縮短使用壽命甚至損壞。

 


    在色譜操作過程中,需要注意下列問題,以維護色譜柱。調節(jié)流速太快,避免壓力和溫度的急劇變化及任何機械震動。溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會影響柱內的填充狀況;柱壓的突然升高或降低也會沖動柱內填料,因此在調節(jié)流速時應該緩慢進行,在閥進樣時閥的轉動不能過緩。


    反沖色譜柱,一般說來色譜柱不能反沖,只有生產者指明該柱可以反沖時,才可以反沖除去留在柱頭的雜質。否則反沖會迅速降低柱效,預柱和保護柱,選擇使用適宜的流動相(尤其是pH),以避免固定相被破壞。


    有時可以在進樣器前面連接一預柱,分析柱是鍵合硅膠時,預柱為硅膠,可使流動相在進入分析柱之前預先被硅膠“飽和”,避免分析柱中的硅膠基質被溶解。


    避免將基質復雜的樣品尤其是生物樣品直接注入柱內,需要對樣品進行預處理或者在進樣器和色譜柱之間連接一保護柱。保護柱一般是填有相似固定相的短柱。保護柱可以而且應該經常更換。


    液相色譜儀的基本結構,由輸液系統(tǒng)、進樣系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、檢測系統(tǒng)和數(shù)據處理系統(tǒng)等組成。


    工作原理,利用混合物各組分在固定相和流動相中溶解、分配或吸附等化學作用性能的差異,使各組分在作相對運動的兩相中反復多次受到上述各作用力而達到相互分離。


    從液相色譜儀工作流程中看到,色譜柱是實現(xiàn)分離的核心部件,要求柱效高、柱容量大和性能穩(wěn)定。柱性能與柱結構、填料特性、填充質量和使用條件有關。


    色譜填料:經過制備處理后,用于填充色譜柱的物質顆粒,通常是5-10粒徑的球形顆粒。


    色譜柱管:內部拋光的不銹鋼管。典型的液相色譜分析柱尺寸是內徑4.6mm,長250mm。


    色譜柱:也稱固定相,是將色譜填料填充到色譜柱管中所構成的,色譜柱的填充,干法填充:在硬臺面上鋪上軟墊,將空柱管上端打開垂直放在軟墊上,用漏斗每次灌入50-100mg填料,然后垂直臺面墩10-20次。


    濕法填充:又稱淤漿填充法,使用專門的填充裝置。

標簽: 液相色譜儀
液相色譜儀 液相色譜儀原理與應用_液相色譜儀

液相色譜儀維護應該注意的事項

    液相色譜儀根據固定相是液體或是固體,又分為液-液色譜及液-固色譜。現(xiàn)代液相色譜儀由高壓輸液泵、進樣系統(tǒng)、溫度控制系統(tǒng)、色譜柱、檢測器、信號記錄系統(tǒng)等部分組成。與經典液相柱色譜裝置比較,具有高效、快速、靈敏等特點。
    1、 泵。
    泵是液相色譜儀的心臟。處于良好工作狀態(tài)的泵,基線平穩(wěn),保留時間重現(xiàn)性好,梯度洗脫時壓力變化緩慢而且平穩(wěn)。
    1)選擇優(yōu)質的溶劑和試劑,在進入儀器前用 0.45um 膜過濾,并進行脫氣處理。
    2)泵開始使用時,一定要用合適的流動相徹底清洗干凈。
    3)定期檢查并更換在線過濾片及有關的墊圈,經常清洗進液處的微孔濾頭。
    4)改變流動相時,應注意沉淀的產生,以防止泵堵塞。
    2、色譜柱。
    色譜柱是化合物分離的關鍵。保養(yǎng)良好的色譜柱具有很高的塔板數(shù),基線平穩(wěn)。
    1)色譜柱比較嬌氣不能夠碰撞、彎曲或強烈震蕩;安裝時要保證閥件或管路的清潔。
    2)流動相在使用前必須進行脫氣處理,盡量不使用或少使用高粘度的流動相。
    3)在滿足靈敏度的前提下,盡可能的使用小進樣量。如果樣品比較臟,要進行凈化或提純處理。
    4)分析結束后要清洗掉進樣閥中殘留的樣品,并用流動相或適當?shù)娜軇┣逑瓷V柱。
    5)如長期不用,用適當?shù)挠袡C溶劑保存并封閉或定期補充合適的流動相。
    3 、檢測器
    分析完成后,馬上關閉檢測器。
    4 、進樣器
    分析結束后反復沖洗進樣口,防止樣品的交叉污染或堵塞。

標簽: 液相色譜儀
液相色譜儀 液相色譜儀維護應該注意的事項_液相色譜儀

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