今天講下二氧化碳培養(yǎng)箱的使用方法,主要是針對(duì)剛剛應(yīng)用二氧化碳培養(yǎng)箱的新手,需要注意的事項(xiàng)。
首先、 做好使用前的準(zhǔn)備工作
二氧化碳培養(yǎng)箱應(yīng)由專人負(fù)責(zé)使用,操作盤(pán)上的任何開(kāi)關(guān)和調(diào)節(jié)旋扭一旦固定后,不要隨意扭動(dòng),以免影響箱內(nèi)溫度,二氧化碳濃度,濕度的波動(dòng),同時(shí)降低機(jī)器的靈敏度。箱子的放置要水平,避免陽(yáng)光直射和灰塵等,要保證儀器周圍的氣流循環(huán),后部及側(cè)面應(yīng)留出5 cm的空隙。加裝穩(wěn)壓電源保證電源電壓波動(dòng)不超過(guò)220 V±10%。所加入的水必須是蒸餾水或無(wú)離子水,防止礦物質(zhì)儲(chǔ)積在水箱內(nèi)產(chǎn)生腐蝕作用,經(jīng)常檢查箱內(nèi)水是否足夠,水位應(yīng)加至“水位指示燈”滅燈時(shí)為止。使用前箱內(nèi)應(yīng)用消毒酒精或碘溶液徹底擦洗,防止其他微生物污染,導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗。在房間安裝空調(diào),使環(huán)境溫度保持在25~C左右。所使用的二氧化碳必須是純凈的,否則降低二氧化碳傳感器的靈敏度和污染二氧化碳過(guò)濾裝置。
其次、正確充氣延長(zhǎng)二氧化碳傳感器使用壽命
二氧化碳培養(yǎng)箱箱內(nèi)氣壓由二氧化碳氣體傳感器控制。二氧化碳傳感器正常反饋要求進(jìn)氣壓為Medical Equipment Vo1.22,No.4 0.06 MPa。當(dāng)箱內(nèi)氣壓降低時(shí),二氧化碳傳感器在低壓刺激下有節(jié)奏地開(kāi)閉,向箱內(nèi)慢慢充氣,當(dāng)進(jìn)氣壓達(dá)0.1 MPa時(shí),自動(dòng)停止調(diào)節(jié)。如充氣方法不當(dāng),使進(jìn)氣壓力增大,當(dāng)超過(guò)0.1 MPa甚至0.2 MPa壓力,會(huì)損傷二氧化碳傳感器。開(kāi)始這種損傷效應(yīng)不明顯,不易察覺(jué),反復(fù)錯(cuò)誤操作,二氧化碳傳感器損傷累積最終致命損壞,使氣壓調(diào)節(jié)失靈。因此,二氧 化碳傳感器壽命與二氧化碳進(jìn)氣壓大小有關(guān),只要做好進(jìn)氣壓調(diào)節(jié),就能保護(hù)二氧化碳傳感器性能。二氧化碳傳感器價(jià)格昂貴,更換不易,所以一定要做好進(jìn)氣壓調(diào)節(jié),延長(zhǎng)二氧化碳傳感器使用壽命。
第三、做培養(yǎng)時(shí)注意培養(yǎng)箱濕度
箱內(nèi)濕度對(duì)于培養(yǎng)工作來(lái)說(shuō)是一項(xiàng)非常重要然而又經(jīng)常被忽略的因素。因?yàn)轱柡蜐穸拳h(huán)境可以避免培養(yǎng)液中二氧化碳逃逸,培養(yǎng)液中pH值穩(wěn)定,有利于細(xì)胞生長(zhǎng), 足夠的濕度水平并且要有足夠快的濕度恢復(fù)速度(如在開(kāi)關(guān)門(mén)后)才能保證不會(huì)由于過(guò)度干燥而導(dǎo)致培養(yǎng)失敗。所以二氧化碳培養(yǎng)箱使用過(guò)程中,在箱內(nèi)托盤(pán)中放一 定量的滅菌水(3/2至全盤(pán)),使箱內(nèi)成為飽和濕度環(huán)境。如使用者忘記補(bǔ)加水,使培養(yǎng)細(xì)胞處于低濕度甚至干熱環(huán)境中,培養(yǎng)液二氧化碳?xì)怏w易揮發(fā),液體pH 值升高,影響細(xì)胞生長(zhǎng),在工作中要力求避免此問(wèn)題發(fā)生。樣本多時(shí),箱內(nèi)分區(qū)存放,培養(yǎng)物用筐或瓷盤(pán)存放,這樣存取快速,縮短開(kāi)門(mén)時(shí)間,減少箱內(nèi)氣體和濕度 變化,節(jié)省氣體,穩(wěn)定了細(xì)胞生長(zhǎng)環(huán)境。
通過(guò)以上3點(diǎn)注意事項(xiàng),相信新手對(duì)二氧化碳培養(yǎng)箱的使用細(xì)節(jié)有了進(jìn)一步了解,更好的延長(zhǎng)二氧化碳傳感器使用壽命。
二氧化碳培養(yǎng)箱是通過(guò)在培養(yǎng)箱箱體內(nèi)模擬形成一個(gè)類似細(xì)胞/組織在生物體內(nèi)的生長(zhǎng)環(huán)境。
二氧化碳培養(yǎng)箱的三個(gè)工作原理:
一、濕度的控制
因培養(yǎng)物需工作室內(nèi)保持一定的濕度時(shí),二氧化碳培養(yǎng)箱配有水盤(pán)。用戶可在培養(yǎng)時(shí)將水盤(pán)放入工作室內(nèi),水盤(pán)加上適量的蒸餾水讓其在工作室內(nèi)自然蒸發(fā),一般相對(duì)濕度可達(dá)95%。
二、溫度的控制
二氧化碳培養(yǎng)箱溫度控制器由鉑電阻作為傳感器與數(shù)字控制電路、LED數(shù)字顯示電路等組成,當(dāng)傳感器輸出與溫度成正比的電阻信號(hào)轉(zhuǎn)換成電壓信號(hào)經(jīng)電路放大后,一路送至顯示電路顯示實(shí)測(cè)溫度。另一路送至比較器與設(shè)定值比較。當(dāng)二者產(chǎn)生偏差時(shí),觸發(fā)可控硅功率管輸出功率使加熱管產(chǎn)生熱量。當(dāng)偏差減小直至為零時(shí),其加熱管發(fā)出的熱量亦隨之減小,直至停止加熱??刂凭€路中有超溫及水位報(bào)警功能。當(dāng)顯示溫度超過(guò)設(shè)定值2.0℃時(shí),溫度控制器發(fā)出聲光報(bào)警信號(hào),同時(shí)切斷輸出,停止加熱,防止溫度繼續(xù)上升;當(dāng)水箱內(nèi)水位過(guò)高或過(guò)低時(shí),水位控制器發(fā)出聲光報(bào)警信號(hào),同時(shí)切斷加熱輸出。僅水套式CO2箱具有水位報(bào)警功能!
三、氣路的控制
氣路由高濃度的CO2鋼瓶、氣泵、穩(wěn)壓閥、針型閥,電磁閥、流量計(jì)及儲(chǔ)氣瓶等組成。(高濃度的CO2鋼瓶由用戶自備)。當(dāng)輸入一定壓力的高濃度CO2氣體,通過(guò)調(diào)節(jié)閥、針閥及電磁閥的流量、時(shí)間控制,保證一定量的CO2氣體進(jìn)入工作室,達(dá)到自動(dòng)控制工作室內(nèi)的CO2濃度值。該值同時(shí)通過(guò)顯示電路顯示,便于觀察了解。為方便用戶在使用中進(jìn)行濃度的監(jiān)視和采樣,在CO2箱的后背面裝有采樣、監(jiān)視口。因采用了快慢速雙重充氣法,使CO2箱在開(kāi)、關(guān)門(mén)后,工作室內(nèi)的CO2濃度能快速恢復(fù)且無(wú)過(guò)沖現(xiàn)象。在CO2箱工作過(guò)程中,由儲(chǔ)氣瓶對(duì)工作室內(nèi)進(jìn)行補(bǔ)氣,以保持穩(wěn)定的CO2濃度值。
二氧化碳培養(yǎng)箱是通過(guò)在培養(yǎng)箱箱體內(nèi)模擬形成一個(gè)類似細(xì)胞/組織在生物體內(nèi)的生長(zhǎng)環(huán)境,培養(yǎng)箱要求穩(wěn)定的溫度(37°C)、穩(wěn)定的CO2水平(5%)、恒定的酸堿度(pH值:7.2-7.4)、較高的相對(duì)飽和濕度(95%),來(lái)對(duì)細(xì)胞/組織進(jìn)行體外培養(yǎng)的一種裝置。
二氧化碳培養(yǎng)箱的清潔保養(yǎng):
1、取出所有隔板,隔板支架,以及所有附件、空氣管道。清空水盤(pán)并用干凈的無(wú)絨布擦干。
2、取出培養(yǎng)箱中的培養(yǎng)物。如果清洗時(shí)間不長(zhǎng),可以將其保存在干凈,無(wú)菌的容器中,保持其溫度。關(guān)閉培養(yǎng)箱,包括關(guān)閉供氣閥。
3、記得清洗培養(yǎng)箱外壁,以消除可能進(jìn)入的污垢和微生物。如果培養(yǎng)箱的頂部非常臟,當(dāng)打開(kāi)培養(yǎng)箱門(mén)灰塵很可能進(jìn)入,所以清潔頂部是很重要的。用無(wú)絨布蘸溫和的肥皂水。然后用干凈的布蘸清水擦拭干凈。用干凈的干布擦干外面。特別要注意每個(gè)人都接觸的門(mén)把手。不要使用任何液體或噴霧清潔劑清潔觸摸屏顯示器。而需要使用干的超細(xì)纖維布來(lái)清潔這些。
4、用蒸餾水沖洗箱體內(nèi)壁和部件,并用干凈的無(wú)絨布再一次擦干。
5、用稀釋的季銨鹽消毒劑擦拭內(nèi)壁和部件。用70%酒精擦拭以除去任何剩余的消毒劑痕跡。再次強(qiáng)調(diào),一定要擦到所有的角落,并記得安好門(mén)封條,更換內(nèi)部零件。
6、加熱培養(yǎng)箱,讓培養(yǎng)箱完全干燥。這應(yīng)該只需要花一點(diǎn)時(shí)間,所以不要讓門(mén)開(kāi)著—那只會(huì)重新引入新的灰塵和污物!
7、如果選配的培養(yǎng)箱具備自動(dòng)消毒功能,請(qǐng)立即運(yùn)行。在周期完成之后,用無(wú)菌蒸餾水填充儲(chǔ)水器,并打開(kāi)氣閥。
8、用溫和的肥皂水清潔所有的內(nèi)表面,管道,隔板,隔板支架,內(nèi)門(mén),風(fēng)扇和門(mén)封條。使用溫和的洗潔精擦拭,去除所有隱藏的角落和縫隙中污垢、灰塵。圓角設(shè)計(jì)的培養(yǎng)箱更利于清潔工作。