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液相色譜柱安裝后的使用及維修保養(yǎng)

時間:2020-04-10    來源:儀多多儀器網(wǎng)    作者:儀多多商城     

液相色譜柱安裝后的使用

  色譜柱在使用前,建議進行柱的性能測試,并將結果保存起來,作為今后評價柱性能變化的參考。但要注意:柱性能可能由于所使用的樣品、流動相、柱溫等條件的差異而有所不同;另外,在做柱性能測試時是按照色譜柱出廠報告中的條件進行(出廠測試所使用的條件是較好條件),只有這樣,測得的結果才有可比性。

  1、樣品的前處理:

  a、建議使用流動相溶解樣品。

  b、使用予處理柱除去樣品中的強極性或與柱填料產(chǎn)生不可逆吸附的雜質(zhì)。使用0.45?m的過濾膜過濾除去微粒雜質(zhì)。

  2、流動相的配制:

  液相色譜是樣品組分在柱填料與流動相之間質(zhì)量交換而達到分離的目的,因此要求流動相具備以下的特點:

  a、流動相對樣品具有一定的溶解能力,保證樣品組分不會沉淀在柱中(或長時間保留在柱中)。

  b、流動相具有一定惰性,與樣品不產(chǎn)生化學反應(特殊情況除外)。

  c、流動相的黏度要盡量小,以便在使用較長的分析柱時能得到好的分離效果;同時降低柱壓降,延長液體泵的使用壽命(可運用提高溫度的方法降低流動相的黏度)。

  d、流動相的物化性質(zhì)要與使用的檢測器相適應。如使用UV檢測器,建議使用對紫外吸收較低的溶劑配制。

  e、流動相沸點不要太低,否則容易產(chǎn)生氣泡,導致實驗無法進行。

  f、在流動相配制好后,一定要進行脫氣。除去溶解在流動相中的微量氣體既有利于檢測,還可以防止流動相中的微量氧與樣品發(fā)生作用。

  3、流動相流速的選擇:

  因柱效是柱中流動相線性流速的函數(shù),使用不同的流速可得到不同的柱效。對于一根特定的色譜柱,要追求較好柱效,建議使用較好流速。對內(nèi)徑為4.6mm的色譜柱,流速一般選擇1ml/min,對于內(nèi)徑為4.0mm柱,流速0.8ml/min為佳。

  當選用較好流速時,分析時間可能延長。可采用改變流動相的洗滌強度的方法以縮短分析時間(如使用反相柱時,可適當增加甲醇或乙腈的含量)。

標簽: 液相色譜柱
液相色譜柱 液相色譜柱安裝后的使用_液相色譜柱

12個液相色譜柱的使用和維護要點

  在日常分析工作中,色譜柱的正確使用和維護十分重要,色譜柱使用是否得當,直接影響色譜柱的壽命,稍有不慎就會降低柱效、縮短使用壽命甚至損壞。

  在色譜操作過程中,需要注意下列問題,以維護色譜柱。

  1、柱子在裝卸、更換時,動作要輕,接頭擰緊要適度。必須防止較強的機械振動,以免柱床產(chǎn)生空隙。

  2、如果儀器用來做常規(guī)分析,樣品種類不多,但分析次數(shù)比較多,則不妨為每一類常規(guī)分析配置一根專用柱,這樣有助于延長柱子的壽命。

  3、避免壓力和溫度的急劇變化及任何機械震動。溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會影響柱內(nèi)的填充狀況;柱壓的突然升高或降低也會對柱內(nèi)填料產(chǎn)生沖擊力,因此在調(diào)節(jié)流速時應該緩慢進行,手動進樣時,進樣閥的轉動不能過緩。

  4、應逐漸改變?nèi)軇┑慕M成,特別是反相色譜中,不應直接從有機溶劑改變?yōu)槿渴撬?,反之亦然?/p>

  5、使用柱溫箱時,應注意在流動相進入色譜柱后才能開啟柱溫箱升溫。

  6、一般說來色譜柱不能反沖,只有生產(chǎn)者指明該柱可以反沖時,才可以反沖除去留在柱頭的雜質(zhì)。否則反沖會迅速降低柱效。

  7、選擇使用適宜的流動相,以避免固定相被破壞。有時可以在進樣器前面連接一個預柱,分析柱是鍵合硅膠時,預柱為硅膠,可使流動相在進入分析柱之前預先被硅膠“飽和”,避免分析柱中的硅膠基質(zhì)被溶解。

  8、避免將基質(zhì)復雜的樣品尤其是生物樣品直接注人柱內(nèi),需要對樣品進行預處理或者在進樣器和色譜柱之間連接一個保護柱。保護柱一般是填有相似固定相的短柱。保護柱可以而且應該經(jīng)常更換。

  9、經(jīng)常用強溶劑沖洗色譜柱,清除保留在柱內(nèi)的雜質(zhì)。在進行清洗時,對流路系統(tǒng)中流動相的置換應以相混溶的溶劑逐漸過渡,每種流動相的體積應是柱體積的20倍左右。

  10、保存色譜柱時應將柱內(nèi)充滿色譜級的乙腈或甲醇,柱接頭要擰緊,防止溶劑揮發(fā)干燥。絕對禁止將緩沖溶液留在柱內(nèi)靜置一個晚上或更長時間。

  11、色譜柱使用過程中,如果壓力升高,一種可能是燒結濾片被堵塞,這時應更換濾片或?qū)⑵淙〕鲞M行清洗;另一種可能是大分子進人柱內(nèi),使柱頭被污染;如果柱效降低或色譜峰變形,則可能柱頭出現(xiàn)塌陷,死體積增大。

  12、在完成分離分析工作之后,不應立即停機,需及時對色譜分析系統(tǒng)進行沖洗,一般30分鐘以上,以除去色譜柱內(nèi)的雜質(zhì)。

標簽: 液相色譜柱
液相色譜柱 12個液相色譜柱的使用和維護要點_液相色譜柱

液相色譜柱常用的填料都有哪些

  在液相色譜分離系統(tǒng)中,色譜填料選擇的正確與否會直接影響到專業(yè)的液相色譜柱分離物質(zhì)效果的好壞。由于液相色譜填料具有相當寬的選擇范圍,所以我們在購買液相色譜柱之前有必要對不同液相色譜填料進行一個簡單的認識和了解。

  第一、正相色譜硅膠基質(zhì)填料。

  正相色譜柱的固定相是由硅膠和其他具有極性官能團組成的鍵合相填料。其物質(zhì)分離特點是極性較弱組合最先被色譜柱沖洗出來。而且正相色譜所使用的流動相其極性要低于固定相,流動相通常使用正乙烷和二氯甲烷等。

  第二、反相色譜硅膠基質(zhì)填料。

  反向色譜柱的填料是以硅膠材料為主要物質(zhì),并與極性相對較弱的官能團組成的鍵合相。其物質(zhì)分離特點是極性較強組合最先被色譜柱沖洗出來,而極性弱的組分則會更強的保留在柱子上。反向色譜的流動相的極性相對較強,常配制有機緩沖液作為流動相。目前較為常用的反相色譜填料有C4(B)、C8(MOS)以及C18(ODS)等。

  第三、聚合物填料。

  這種聚合物的填料一般是由聚甲基丙酸酯或者聚苯乙烯-二乙烯基苯組成。其特點是這種色譜柱的酸堿度適用范圍相對較廣,且疏水性很強,但它的柱效相對于硅膠基質(zhì)的填料要低一些。一般將這種大孔的基質(zhì)填料用于蛋白質(zhì)的分離。

  第四、其他無機填料。

  如石墨化碳對于酸堿度和溫度沒用嚴格的限制范圍,一般可對一些幾何導構體進行分離。此外還有氧化鋁以及氧化鋯等無機填料的應用。

  總而言之,如果我們能夠全面系統(tǒng)的了解一下液相色譜柱填料的分類及特點,那么我們在選擇購買一流的色譜柱時就可以在一個相對較小的范圍內(nèi)順利找到自己所需要的產(chǎn)品。這樣我們就可以在節(jié)省選擇購買時間的同時,也能快速買到令自己滿意的色譜柱。


標簽: 液相色譜柱
液相色譜柱 液相色譜柱常用的填料都有哪些_液相色譜柱

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