分光光度計(jì)計(jì)采用一個可以產(chǎn)生多個波長的光源，通過系列分光裝置，從而產(chǎn)生特定波長的光源，光源透過測試的樣品后，部分光源被吸收，計(jì)算樣品的吸光值，從而轉(zhuǎn)化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比?；谖镔|(zhì)對光(對光的波長)的吸收具有選擇性，不同的物質(zhì)都有各自的吸收光帶，所以，當(dāng)光色散后的光譜通過某一溶液時，其中某些波長的光線就會被溶液吸收。在一定的波長下，溶液中物質(zhì)的濃度與光能量減弱的程度有一定的比例關(guān)系，即符合比爾定律。其詳細(xì)使用方法步驟具體如下。

　　1、預(yù)熱儀器

　　為使測定穩(wěn)定，將電源開關(guān)打開，使儀器預(yù)熱20min，為了防止光電管疲勞，不要連續(xù)光照。預(yù)熱儀器時和在不測定時應(yīng)將比色皿暗箱蓋打開，使光路切斷。

　　2、選定波長

　　根據(jù)要求，轉(zhuǎn)動波長調(diào)節(jié)器，使指針指示所需要的單色光波長。

　　3、固定靈敏度檔

　　根據(jù)有色溶液對光的吸收情況，為使吸光度讀數(shù)為0.2-0.7，選擇合適的靈敏度。為此，旋動靈敏度檔，使其固定于某一檔，在實(shí)驗(yàn)過程中不再變動。一般測量固定在“1”檔。

　　4、調(diào)節(jié)“0”點(diǎn)

　　輕輕旋動調(diào)“0”電位器，使讀數(shù)表頭指針恰好位于透光度為“0”處(此時，比色皿暗箱蓋是打開的，光路被切斷，光電管不受光照、。

　　5、調(diào)節(jié)T=100%

　　將盛蒸餾水(或空白溶液或純?nèi)軇?、的比色皿放入比色皿座架中的第一格?nèi)，有色溶液放在其它格內(nèi)，把比色皿暗箱蓋子輕輕蓋上，轉(zhuǎn)動光量調(diào)節(jié)器，使透光度T=100%，即表頭指針恰好指在T=100%處。

　　6、測定

　　輕輕拉動比色皿座架拉桿，使有色溶液進(jìn)入光路，此時表頭指針?biāo)緸樵撚猩芤旱奈舛華。讀數(shù)后，打開比色皿暗箱蓋。

　　7、關(guān)機(jī)

　　實(shí)驗(yàn)完畢，切斷電源，將比色皿取出洗凈，并將比色皿座架及暗箱用軟紙擦凈。

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