1、紫外可見分光光度計(jì)光度測(cè)量
在模式選擇屏幕中選擇<1、Photometric光度>選項(xiàng),將顯示參數(shù)配置屏幕;
用GOTOWL鍵設(shè)定測(cè)量波長;
按F2鍵設(shè)定進(jìn)樣控制;
按START/STOP鍵時(shí),測(cè)量開始,顯示測(cè)量屏幕;
如需做空白校正,應(yīng)在測(cè)量前先設(shè)置空白樣品,然后,按AUTO-ZERO鍵,將測(cè)量值置為OABS(100%);
2、紫外可見分光光度計(jì)校正
開機(jī)預(yù)熱10分鐘足矣;
放入黑塊和標(biāo)樣(沒有的自己配),關(guān)閉蓋子;
校0;
把燈光對(duì)著黑塊,把透光度調(diào)0;
把燈光對(duì)標(biāo)樣,將吸光度調(diào)到100%;
3、參比溶液介紹
參比溶液又稱空白溶液。測(cè)量時(shí)用作比較的、不含被測(cè)物質(zhì)但其基體盡可能與試樣溶液相似的溶液。通常,用參比溶液掃描的曲線應(yīng)是一條平坦的直線。有時(shí),基體中,雖不含被測(cè)物質(zhì),但含有別的物質(zhì),這時(shí)必須保證其不影響測(cè)試。經(jīng)常碰到的是試劑空白中含有被測(cè)物質(zhì),此時(shí)必須經(jīng)過純化將其除去。否則將影響測(cè)定結(jié)果。
4、紫外可見分光光度計(jì)使用注意事項(xiàng)
1、開機(jī)前應(yīng)先預(yù)熱15分鐘,然后開機(jī)自檢;
2、濕度要控制在75%左右,溫度在5~30度之間;
3、儀器要穩(wěn)壓電源,接地要好。并且避免陽光直接照射;
5、常見故障及處理方法
光門不能完全關(guān)閉:修復(fù)光門部件,使其完全關(guān)閉;
透過率“100%”旋到底了。解決方法:重新調(diào)整“100%”旋鈕;
儀器嚴(yán)重受潮:可打開光電管暗盒,用電吹風(fēng)吹上一會(huì)兒使其干燥,并更換干燥劑;以上為紫外可見分光光度計(jì)的具體操作方法及使用注意事項(xiàng),希望能給予您幫助。
紫外可見分光光度計(jì)對(duì)于我們來說熟悉卻也比較難讀懂理解的。
天天有人提起他的名字卻沒多少人知道他的工作原理。
下面我們來淺談一下。
光譜工作原理:
分子的紫外可見吸收光譜是由于分子中的某些基團(tuán)吸收了紫外可見輻射光后,發(fā)生了電子能級(jí)躍遷而產(chǎn)生的吸收光譜。
由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結(jié)構(gòu),其吸收光能量的情況也就不會(huì)相同;
因此,每種物質(zhì)就有其特有的、固定的吸收光譜曲線;
可根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長處的吸光度的高低判別或測(cè)定該物質(zhì)的含量,這就是分光光度定性和定量分析的基礎(chǔ)。
分光光度分析就是根據(jù)物質(zhì)的吸收光譜研究物質(zhì)的成分、結(jié)構(gòu)和物質(zhì)間相互作用的有效手段。
它是帶狀光譜,反映了分子中某些基團(tuán)的信息??梢杂脴?biāo)準(zhǔn)光圖譜再結(jié)合其它手段進(jìn)行定性分析。
根據(jù)Lambert-Beer定律說明光的吸收與吸收層厚度成正比,比耳定律說明光的吸收與溶液濃度成正比;
如果同時(shí)考慮吸收層厚度和溶液濃度對(duì)光吸收率的影響,即得朗伯-比耳定律。
即A=εbc,(A為吸光度,ε為摩爾吸光系數(shù),b為液池厚度,c為溶液濃度)就可以對(duì)溶液進(jìn)行定量分析。
將分析樣品和標(biāo)準(zhǔn)樣品以相同濃度配制在同一溶劑中,在同一條件下分別測(cè)定紫外可見吸收光譜。
若兩者是同一物質(zhì),則兩者的光譜圖應(yīng)完全一致。
如果沒有標(biāo)樣,也可以和現(xiàn)成的標(biāo)準(zhǔn)譜圖對(duì)照進(jìn)行比較。
這種方法要求儀器準(zhǔn)確,精密度高,且測(cè)定條件要相同。
實(shí)驗(yàn)證明,不同的極性溶劑產(chǎn)生氫鍵的強(qiáng)度也不同;
這可以利用紫外光譜來判斷化合物在不同溶劑中氫鍵強(qiáng)度,以確定選擇哪一種溶劑。
紫外可見分光光度計(jì)的工作環(huán)境:
1)分光光度計(jì)安放在干燥的房間內(nèi),使用溫度為5-35℃,相對(duì)濕度不超過85%
2)儀器應(yīng)放置在堅(jiān)固平穩(wěn)的工作臺(tái)上,且避免強(qiáng)烈的震動(dòng)或持續(xù)的震動(dòng)
3)室內(nèi)照明不宜太強(qiáng),且應(yīng)避免直射日光的照射
4)電扇不宜直接向儀器吹風(fēng),以防止光源燈因發(fā)光不穩(wěn)定而影響儀器的正常使用
5)盡量遠(yuǎn)離高強(qiáng)度的磁場(chǎng)、電場(chǎng)及發(fā)生高頻波的電氣設(shè)備
6)避免在有硫化氫等腐蝕性氣體的場(chǎng)所使用
紫外可見分光光度計(jì)引用新型技術(shù),其功能強(qiáng)大,采用單色器技術(shù),波長范圍190-1100nm,是各種涉及水和廢水分析領(lǐng)域的通用儀器,應(yīng)用范圍包括市政和工業(yè)廢水,飲用水,加工過程用水,地表水,冷卻水和鍋爐補(bǔ)給水等。
紫外可見分光光度計(jì)應(yīng)用:
在水和廢水監(jiān)測(cè)中的應(yīng)用,對(duì)于一個(gè)水系的監(jiān)測(cè)分析和綜合評(píng)價(jià),一般包括水相(溶液本身)、固相(懸浮物、底質(zhì))、生物相(水生生物)。在水質(zhì)的常規(guī)監(jiān)測(cè)中,紫外可見分光光度法占有較大的比重。由于水和廢水的成分復(fù)雜多變,待測(cè)物的濃度和干擾物的濃度差別很大,在具體分析時(shí)必須選擇好分析方法。
在農(nóng)產(chǎn)品和食品分析中可用于檢測(cè)的組分或成分有蛋白質(zhì)、賴氨酸、葡萄糖、維生素C、硝酸鹽、亞硝酸鹽、砷、汞等;
在植物生化分析中可用于檢測(cè)葉綠素、全氮和酶的活力等;
在飼料分析中可用于檢測(cè)煙酸、棉酚、磷化氫和甲酯等。
紫外可見分光光度計(jì)維護(hù)要點(diǎn):
一、溫度和濕度是影響儀器性能的重要因素。他們可以引起機(jī)械部件的銹蝕,使金屬鏡面的光潔度下降,引起儀器機(jī)械部分的誤差或性能下降;造成光學(xué)部件如光柵、反射鏡、聚焦鏡等的鋁膜銹蝕,產(chǎn)生光能不足、雜散光、噪聲等,甚至儀器停止工作,從而影響儀器壽命。維護(hù)保養(yǎng)時(shí)應(yīng)定期加以校正。應(yīng)具備四季恒濕的儀器室,配置恒溫設(shè)備,特別是地處南方地區(qū)的實(shí)驗(yàn)室。
二、環(huán)境中的塵埃和腐蝕性氣體也會(huì)影響機(jī)械系統(tǒng)的靈活性、降低各種限位開關(guān)、按鍵、光電偶合器的可靠性,也是造成必須學(xué)部件鋁膜銹蝕的原因之一。因此必須定期清潔,保障環(huán)境和儀器室內(nèi)衛(wèi)生條件,防塵等。
三、儀器使用一定周期后,內(nèi)部會(huì)積累一定量的塵埃,建議由維修工程師或在工程師指導(dǎo)下定期開啟儀器外罩對(duì)內(nèi)部進(jìn)行除塵工作,同時(shí)將各發(fā)熱元件的散熱器重新緊固,對(duì)光學(xué)盒的密封窗口進(jìn)行清潔,必要時(shí)對(duì)光路進(jìn)行校準(zhǔn),對(duì)機(jī)械部分進(jìn)行清潔和必要的潤滑,最后,恢復(fù)原狀,再進(jìn)行一些必要的檢測(cè)、調(diào)校與記錄。