紫外可見光譜儀涉及的波長(zhǎng)范圍在有機(jī)化學(xué)研究中得到廣泛的應(yīng)用。通常用作物質(zhì)鑒定、純度檢查，有機(jī)分子結(jié)構(gòu)的研究。
在定量方面，可測(cè)定結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜的化合物和混合物中各組分的含量，也可以測(cè)定物質(zhì)的離解常數(shù)，絡(luò)合物的穩(wěn)定常數(shù)，物質(zhì)分子量鑒別和微量滴定中指示終點(diǎn)以及在高效液相色譜中作檢測(cè)器等。
基本工作原理：
紫外分光光度計(jì)基本工作原理和紅外光譜儀相似，利用一定頻率的紫外可見光照射被分析的有機(jī)物質(zhì)，引起分子中價(jià)電子的躍遷，它將有選擇地被吸收。
一組吸收隨波長(zhǎng)而變化的光譜，反映了試樣的特征。在紫外可見光的范圍內(nèi)，對(duì)于一個(gè)特定的波長(zhǎng)，吸收的程度正比于試樣中該成分的濃度，因此測(cè)量光譜可以進(jìn)行定性分析，而且根據(jù)吸收與已知濃度的標(biāo)樣的比較，還能進(jìn)行定量分析。
分光光度計(jì)的使用方法:
(1)接通電源;(2)使用前預(yù)熱15min;(3)選擇波長(zhǎng);(4)選擇檢測(cè)器;(5)如果可能的話,選擇正確的縫寬;
(6)插入適當(dāng)?shù)目瞻讓?duì)照;(7)調(diào)解到0%的透過率;(8)將吸光值調(diào)到零;(9)分析樣品;(10)每測(cè)量10個(gè)樣品后,用空白對(duì)照校驗(yàn)零刻度;(11)檢測(cè)儀器的可重復(fù)性。
紫外分光光度計(jì)應(yīng)用范圍包括市政和工業(yè)廢水，飲用水，加工過程用水，地表水，冷卻水和鍋爐補(bǔ)給水等。
是實(shí)驗(yàn)室普及率較高的一種光譜儀器了，由于靈敏度高、選擇性好、準(zhǔn)確度高、適用濃度范圍廣，比較重要是分析成本低、操作簡(jiǎn)便、快速得到廣泛的應(yīng)用，長(zhǎng)期在分析領(lǐng)域扮演很重要的角色。但是常常會(huì)聽某些同學(xué)為啥時(shí)候更換光源而煩惱，每次數(shù)據(jù)有差別，都覺得是光源惹得禍。
紫外分光光度計(jì)信號(hào)部分：
（1）紫外分光光度計(jì)樣品信號(hào)重現(xiàn)性不良；
原因：排除儀器本身的原因外，最大的可能是樣品溶液不均勻所致；在簡(jiǎn)易的單光束儀器中，樣品池架一般為推拉式的，有時(shí)重復(fù)推拉不在同一個(gè)位置上；
檢查：更換一種穩(wěn)定的試樣判定；
解決辦法：采取正確的試樣配置手段；修理推拉式樣品架的定位碰珠；
（2）紫外分光光度計(jì)做基線掃描或樣品掃描時(shí)，基線或信號(hào)有一個(gè)大的負(fù)脈沖；
原因：掃描速度設(shè)置得過快，信號(hào)在讀取時(shí)，誤將濾光片或光源鏡的切換當(dāng)做信號(hào)讀取了；
檢查：改變掃描速度；
（3）紫外分光光度計(jì)做基線掃描或樣品掃描時(shí)，基線或信號(hào)有一個(gè)長(zhǎng)時(shí)間段的負(fù)值或滿屏大噪聲；
原因：濾光片飼服電機(jī)“失步”，造成檔位錯(cuò)位，國產(chǎn)電機(jī)尤甚；
檢查：重新開機(jī)有可能回復(fù)，或打開單色器對(duì)照波長(zhǎng)與濾光片的相對(duì)位置來檢查（注意：打開單色器時(shí)要保護(hù)檢測(cè)器不被強(qiáng)光刺激）；
解決辦法：更換飼服電機(jī)；
（4）紫外分光光度計(jì)樣品出峰位置不對(duì)；
原因：波長(zhǎng)傳動(dòng)機(jī)構(gòu)產(chǎn)生位移；
檢查：通過氘燈的656.1nm的特征譜線來判斷波長(zhǎng)是否準(zhǔn)確；
解決辦法：對(duì)于高檔儀器而言處理手段相對(duì)簡(jiǎn)單，使用儀器固有的自動(dòng)校正功能即可；而對(duì)于相對(duì)簡(jiǎn)單的儀器，這種調(diào)整則需要專業(yè)人員來進(jìn)行了；
（5）紫外分光光度計(jì)信號(hào)的分辨率不夠，具體表現(xiàn)是：本應(yīng)疊加在某一大峰上的小峰無法觀察到；
原因：狹縫設(shè)置過窄而掃描速度過快，造成檢測(cè)器響應(yīng)速度跟不上，從而失去應(yīng)測(cè)到的信號(hào)；按常理，一定的狹縫寬度要對(duì)應(yīng)一定范圍的掃描速度；或者狹縫設(shè)置得過寬，使儀器的分辨率下降，將小峰融合在大峰里了。
檢查：放慢掃描速度看一看或?qū)ⅹM縫設(shè)窄；
解決辦法：將掃描速度、狹縫寬窄、時(shí)間常數(shù)三者擬合成一個(gè)優(yōu)化的條件；
（6）當(dāng)紫外分光光度計(jì)波長(zhǎng)固定在某個(gè)波長(zhǎng)下時(shí)，吸光值信號(hào)上下擺動(dòng)，特別是測(cè)量模式轉(zhuǎn)換為按鍵開關(guān)式的簡(jiǎn)易儀器；
原因：開關(guān)觸點(diǎn)因長(zhǎng)期氧化所致造成接觸不良；
檢查：用手加重力量按琴鍵時(shí)，吸光值隨之變化；
解決辦法：用金屬活化劑清洗按鍵觸點(diǎn)即可；
1、檢定物質(zhì)
根據(jù)吸收光譜圖上的一些特征吸收，特別是最大吸收波長(zhǎng)λmax和、摩爾吸收系數(shù)ε是檢定物質(zhì)的常用物理參數(shù)。這在藥物分析上就有著很廣泛的應(yīng)用。在國內(nèi)外的藥典中，已將眾多的藥物紫外吸收光譜的最大吸收波長(zhǎng)和吸收系數(shù)載入其中，為藥物分析提供了很好的手段。
2、與標(biāo)準(zhǔn)物及標(biāo)準(zhǔn)圖譜對(duì)照
將分析樣品和標(biāo)準(zhǔn)樣品以相同濃度配制在同一溶劑中，在同一條件下分別測(cè)定、紫外可見吸收光譜。若兩者是同一物質(zhì)，則兩者的光譜圖應(yīng)完全一致。如果沒有標(biāo)樣，也可以和現(xiàn)成的標(biāo)、準(zhǔn)譜圖對(duì)照進(jìn)行比較。這種方法要求紫外分光光度計(jì)準(zhǔn)確，精密度高，且測(cè)定條件要相同。
3、比較最大吸收波長(zhǎng)吸收系數(shù)的一致性
4、純度檢驗(yàn)
5、推測(cè)化合物的分子結(jié)構(gòu)
6、氫鍵強(qiáng)度的測(cè)定
實(shí)驗(yàn)證明，不同的極性溶劑產(chǎn)生氫鍵的強(qiáng)度也不同，這可以利用紫外光譜來判斷化合物在不、同溶劑中氫鍵強(qiáng)度，以確定選擇哪一種溶劑、。
7、絡(luò)合物組成及穩(wěn)定常數(shù)的測(cè)定
8、反應(yīng)動(dòng)力學(xué)研究
9、在有機(jī)分析中的應(yīng)用
有機(jī)分析是一門研究有機(jī)化合物的分離、鑒別及組成結(jié)構(gòu)測(cè)定的科學(xué)，它是在有機(jī)化學(xué)和分析化學(xué)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的綜合性學(xué)科。
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