雙光束紫外-可見分光光度計(jì)(以下簡稱儀器),系指從單色器發(fā)出的單色光經(jīng)光束開關(guān)(斬光器)分成為樣品和參比兩條光束結(jié)構(gòu)的儀器。
它能消除光源不穩(wěn)和放大器增益變化的影響,并能自動(dòng)記錄和掃描物質(zhì)的吸收光譜圖。
儀器在開機(jī)后通常會(huì)做一些自檢,但仍應(yīng)按本規(guī)程進(jìn)行檢定。儀器的波長范圍包括195~800nm,狹縫為0.1~5nm可調(diào)。
工作原理
紫外可見分光光度法是利用物質(zhì)分子對紫外可見光譜區(qū)的輻射的吸收來進(jìn)行分析的一種儀器分析方法。
這種分子吸收光譜產(chǎn)生于價(jià)電子能級的躍遷,它廣泛用于無機(jī)和有機(jī)物質(zhì)的定性和定量分析。
朗伯一一比耳定律(Lambet-Beer)是光吸收的基本定律,俗稱光吸收定律,是分光光度法定量分析的依據(jù)和基礎(chǔ)。
當(dāng)入射光波長一定時(shí),溶液的吸光度是吸光物質(zhì)的濃度c及吸收介質(zhì)厚度(吸收光程)的函數(shù)。
其常用表達(dá)式如下(式中ε為系數(shù)):
A=ε·c·l
紫外見分光光度計(jì)是基于紫外可見分光光度法的原理工作的常規(guī)分析儀器。根據(jù)光路設(shè)計(jì)的不同,紫外可見分光光度計(jì)可以分為單光束分光光度計(jì)、雙光束分光光度計(jì)和雙波長分光光度計(jì)。
制定依據(jù)
本規(guī)程主要參照國家計(jì)量檢定規(guī)程《JJG178-2007紫外、可見、近紅外分光光度計(jì)》、《JJF1641-2017紫外可見分光光度計(jì)型式評價(jià)大綱》及《中國藥典》2015年版四部指導(dǎo)通則“0401紫外-可見分光光度法”擬定。
項(xiàng)目及技術(shù)要求
波長準(zhǔn)確度≤±1.0nm(紫外光區(qū)),≤±2.0nm(500nm附近);
波長重復(fù)性≤0.5nm。
基線平直度≤0.01吸光度。
0%線噪聲≤0.1%,100%線噪聲≤0.5%.
吸光度準(zhǔn)確度應(yīng)符合規(guī)定。
雜散光<0.8%。
光譜帶寬≤標(biāo)示帶寬±20%。
吸收池配對誤差≤0.5%。
檢測結(jié)果處理
自檢結(jié)果全部符合技術(shù)要求者,即為合格,可以使用。若檢測結(jié)果不符合規(guī)定,應(yīng)重新調(diào)試儀器再進(jìn)行自檢,符合規(guī)定后方可使用。
分光光度法是根據(jù)被測物質(zhì)分子對紫外、可見波段范圍單色輻射的吸收或反射強(qiáng)度來進(jìn)行物質(zhì)的定性、定量或結(jié)構(gòu)分析的一種方法。
可見分光光度計(jì)的維護(hù):
1、保護(hù)光源:光源燈有一定的壽命,儀器不工作時(shí)不要開燈,若工作間歇時(shí)間短,可不關(guān)燈。 一旦停機(jī),則要待燈冷卻后再重新啟動(dòng),并預(yù)熱15min。
燈泡發(fā)黑或亮度明顯減弱或不穩(wěn)定時(shí),就及時(shí)更換。 經(jīng)經(jīng)紫外光照射后形成結(jié)痕可用無水乙醇去除。
2、保證合適的工作環(huán)境溫度和濕度是影響儀器性能的重要因素。
不適宜的溫度和濕度可引起機(jī)械部件的銹蝕,使金屬鏡面的光潔度下降,引起儀器機(jī)械部分的誤差或性能下降;造成光柵、反射鏡、聚焦鏡等光學(xué)部件的鋁膜銹蝕,產(chǎn)生光能不足、雜散光、噪聲等;甚至使儀器停止工作,從而影響儀器壽命。維護(hù)保養(yǎng)時(shí)應(yīng)定期加以校正溫度和濕度。
3、定期清潔,保障環(huán)境和儀器內(nèi)衛(wèi)生條件,防塵。
儀器使用一定時(shí)間后,內(nèi)部會(huì)積累一定量的塵埃,建議由維修工程師或在工程師指導(dǎo)下定期開啟儀器外罩對內(nèi)部進(jìn)行除塵工作,同時(shí)將各發(fā)熱元件的散熱器重新緊固,對光學(xué)盒的密封窗口進(jìn)行清潔,必要時(shí)對光路進(jìn)行校準(zhǔn),對機(jī)械部分進(jìn)行清潔和必要的潤滑,最后恢復(fù)原狀,再進(jìn)行一些必要的檢測、調(diào)校和記錄。
4、正確使用比色皿拿比色皿時(shí),手指只能捏住比色皿的毛玻璃面,不要碰比色皿的透光面,以免沾污。
清洗比色皿時(shí),先用水沖洗,再用蒸餾水洗凈。若被比色皿被有機(jī)物沾污,可用鹽酸-乙醇混合洗滌液(1:2)浸泡片刻,再用水沖洗。
每次做完實(shí)驗(yàn)應(yīng)立即洗凈比色皿。比色皿外壁的水用擦鏡紙或細(xì)軟的吸水紙吸干,以保護(hù)透光面。
可見分光光度計(jì)是一種結(jié)構(gòu)簡潔、使用方便的單光束分光光度計(jì),基于樣品對單色光的選擇吸收特性可用于對樣品進(jìn)行定性和定量分析。
廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥衛(wèi)生、臨床檢測、生物化學(xué)、石油化工、環(huán)保監(jiān)測、食品生產(chǎn)和質(zhì)量控制等部門作定性、定量分析,還可作為大、專院校和中學(xué)相關(guān)課程的教學(xué)演示和實(shí)驗(yàn)儀器。
可見分光光度計(jì)是一款經(jīng)典的分光光度計(jì)通用儀器,具有質(zhì)量上乘、功能齊全、輕巧新穎等特點(diǎn),是高質(zhì)量高品質(zhì)的品牌儀器。
可見分光光度計(jì)主要特點(diǎn):
1、采用低雜散光,高分辨率的單光束單色器,保證了波長準(zhǔn)確度、波長重復(fù)性和更高的分辨率。
2、自動(dòng)調(diào)0%T和100%T,自動(dòng)調(diào)波長及多種方法的數(shù)據(jù)處理功能。
3、高分辨率,寬大的樣品槽,可容納100mm光徑吸收池和相應(yīng)的反射附件。
4、儀器配有標(biāo)準(zhǔn)的RS-232雙向通訊接口,可外接打印機(jī),打印相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。
5、個(gè)性化的外形設(shè)計(jì)、輕觸式按鍵使操作更為方便。