雖然色譜是實(shí)驗(yàn)室使用頻率非常高的分析儀器,但應(yīng)該會有部分小伙伴并不了解色譜是如何定量的,以氣相色譜為例,氣相色譜是用峰面積或者峰高來定量的。依據(jù)如下:
第一,也是較為重要的一條,就是檢測器的線性響應(yīng)關(guān)系。在所有的色譜檢測器中,除了FPD之外,所有的檢測器都遵從線性響應(yīng),也就是說m=KS。這里m指單位時間內(nèi)到達(dá)檢測器的待測物質(zhì)的量(包括質(zhì)量或物質(zhì)的量),K表示線性響應(yīng)系數(shù),S表示檢測器響應(yīng)信號的值。也就是說,檢測器響應(yīng)信號的大小與單位時間到達(dá)檢測器的被測物質(zhì)的總量成正比。當(dāng)然我們也知道,這個關(guān)系是有范圍的,match量太大或者太小,都會脫離線性。
第二,就是塔板理論。塔板理論充分闡述了峰高與進(jìn)樣量之間的關(guān)系,或者說他們之間是成正比的。這個可以參考對塔板理論的說明。
根據(jù)這兩條,可以肯定的說,待測物質(zhì)的峰高與待測物的進(jìn)樣總量成正比?;蛘呃梦⒎e分可以推斷出,待測物質(zhì)的峰面積和待測物的進(jìn)樣總量成正比。既然峰高和峰面積都與進(jìn)樣總量成正比,為什么我們喜歡用峰面積,而不是更簡單的峰高呢?這個問題也很簡單,因?yàn)樗謇碚摬煌耆_,峰形經(jīng)常不完全滿足正態(tài)分布,所以峰高的代表性不足。
什么時候峰高能夠有良好的代表性?很明顯,峰形良好而且對稱,成良好的正態(tài)分布曲線形狀的時候?;蛘哒f峰形尖銳且對稱的時候。
色譜峰經(jīng)常拖尾,所以用峰面積定量就可以了,峰面積絕大多數(shù)情形下,都具有很好的代表性。但是在檢測器超載,或者模數(shù)轉(zhuǎn)換器超載,或者峰面積積分不準(zhǔn),或者進(jìn)樣代表性不足的時候,以及一些其他特殊情形下,用峰面積也不能得到正確結(jié)果。但無論如何,用峰面積定量,已經(jīng)是我們可能的準(zhǔn)確方法了。
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