分光光度計采用微處理機控制技術(shù),對物質(zhì)做定性、定量分析;
是常規(guī)實驗室必備的多用途分析儀器,廣泛應(yīng)用于醫(yī)療衛(wèi)生、臨床檢驗、生物化學(xué)、石油化工、環(huán)境保護、質(zhì)量控制等大專院校、教學(xué)實驗室部門。
分光光度計在具體使用中一定要能掌握住操作要點;
這樣不但能夠保證檢測數(shù)據(jù)的準確,而且也能起到避免損壞設(shè)備的目的;
那么這種設(shè)備在使用中操作要點有哪些呢?
要點一:
在使用分光光度計時,設(shè)備啟動之前一定需要能把樣品室內(nèi)存放的防潮劑給拿出,在設(shè)備進行正常運轉(zhuǎn)檢查時候;
也不能開啟樣品室蓋,好比色皿中的液體占總體積百分之八十左右;
千萬不能讓液體太多以 避免液體的外泄直接腐蝕設(shè)備影響設(shè)備使用壽命;
在進行正常檢測時候,還需保證比色皿的干凈;
如果在內(nèi)壁上有液體需要使用專業(yè)紙及時給擦拭掉;
千萬不能使用手直接進行擦拭,避免會對操作人員的手產(chǎn)生一些傷 害。
要點二:
在使用分光光度計時候,千萬不能把液體溶劑給直接放置于設(shè)備的表面上;
當(dāng)出現(xiàn)液體外泄情況需要及時進行清潔處理;
當(dāng)使用設(shè)備檢測完畢后,還需要及時能將比色皿內(nèi)的液體給處理掉;
后使用蒸餾水進 行清潔干凈,同時再倒置進行晾干處理;
后才能把設(shè)備電源給關(guān)閉,再把防潮劑給放入到樣品室內(nèi),并做好防塵處理才能離開。
1、工作環(huán)境檢查:
1)放置要求:儀器應(yīng)平穩(wěn)的擺放在水平固定的桌面上。(因為分光光度計為精密光學(xué)儀器,在運行的過程中如果桌面不穩(wěn),會影響其工作狀態(tài),且儀器處在工作狀態(tài)時,燈絲處于高溫狀態(tài),此時如果有劇烈的震動會導(dǎo)致燈絲折斷。)
2)溫度要求:工作環(huán)境的溫度在5-35度之間。(儀器在工作狀態(tài)時內(nèi)部較熱需要用儀器自身的散熱風(fēng)扇與外界空氣進行熱交換散熱,如果外界溫度過高,會導(dǎo)致儀器內(nèi)部溫度過高,從而加速儀器電器件與燈的老化速度,從而影響儀器的使用壽命。)
3)濕度要求:工作環(huán)境的相對濕度不超過85%。(儀器內(nèi)部有很多電器元件與光學(xué)件,在濕度太高的情況下,電器件容易老化或燒壞,光學(xué)件表面的鍍鋁膜也容易發(fā)霉。)
4)空氣狀況:空氣中不應(yīng)有足以引起腐蝕的有害氣體和過多的塵土存在。
2、樣品室檢查:
1)在開機之前,先要檢查樣品室中是否有比色皿或其他物品,因為儀器在開機后要進行一系列的功能自檢,如果有物品放在樣品室中會導(dǎo)致自檢出錯。
2)每次使用后應(yīng)檢查樣品室是否積存有溢出溶液,須經(jīng)常擦拭樣品室,以防止廢液對部件或光路系統(tǒng)的腐蝕。
3)在測試完成后,請及時將樣品從樣品室中取出,否則,液體揮發(fā)會導(dǎo)致鏡片發(fā)霉。對易揮發(fā)和腐蝕性的液體,尤其要注意!如果樣品室中有漏液,請及時擦拭干凈,否則會引起樣品室內(nèi)的部件腐蝕和螺釘生銹。
3、儀器的表面清潔:
儀器外殼表面經(jīng)過噴漆工藝處理過,如果不小心將溶液漏灑在外殼上,請立即用濕毛巾擦拭干凈,杜絕使用有機溶液擦拭。如果長時間不用時,請注意及時清理儀器表面的灰塵。
4、比色皿清洗:
在每次測量結(jié)束或溶液更換時,您需要對比色皿進行及時清洗,然后放在低濃度酸性溶液里浸泡,浸泡后用蒸餾水沖洗比色皿的內(nèi)外壁,否則比色皿壁上的殘留溶液會引起測量誤差。
5、電源檢查:
1)插電源插座時,請檢查當(dāng)前電壓是否與儀器標識的電壓一致。
2)因為各個地區(qū)電網(wǎng)的質(zhì)量差異很大,所以為了使儀器運行得更穩(wěn)定和更可靠,建議給儀器外配一個穩(wěn)壓器。
3)儀器不用時請關(guān)機,并拔掉電源插頭,以防止實驗室的電源地線不好,而導(dǎo)致在雷雨天氣時損壞儀器。
6、提示:
為縮短自檢時間,儀器在開機時所進行的自檢只是對一些常規(guī)的項目進行檢查。而儀器在運輸、搬運與使用一段時間后(一般一個月)會導(dǎo)致結(jié)構(gòu)件累計誤差的產(chǎn)生,所以我們建議用戶在出現(xiàn)上述情況或感覺儀器測試數(shù)據(jù)與經(jīng)驗值相差較大時,應(yīng)對儀器進行一次波長校正和暗電流校正。(具體操作方法見本手冊中的“系統(tǒng)應(yīng)用”一節(jié))
紫外分光光度法是根據(jù)物質(zhì)的吸收光譜,來研究物質(zhì)的成分、結(jié)構(gòu)和物質(zhì)間相互作用的有效手段。紫外分光光度計可以在紫外可見光區(qū)任意選擇不同波長的光。物質(zhì)的吸收光譜就是物質(zhì)中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長的光能量,相應(yīng)地發(fā)生了分子振動能級躍遷和電子能級躍遷的結(jié)果。
由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結(jié)構(gòu),其吸收光能量的情況也就不會相同,因此,每種物質(zhì)就有其特有的、固定的吸收光譜曲線,可根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長處的吸光度的高低判別或測定該物質(zhì)的含量。
紫外分光光度計用途
1、檢定物質(zhì)
根據(jù)吸收光譜圖上的一些特征吸收,特別是最大吸收波長λ-max和摩爾吸收系數(shù)ε是檢定物質(zhì)的常用物理參數(shù)。這在藥物分析上就有著很廣泛的應(yīng)用。在國內(nèi)外的藥典中,已將眾多的藥物紫外吸收光譜的最大吸收波長和吸收系數(shù)載入其中,為藥物分析提供了很好的手段。
2、與標準物及標準圖譜對照
將分析樣品和標準樣品以相同濃度配制在同一溶劑中,在同一條件下分別測定紫外可見吸收光譜。若兩者是同一物質(zhì),則兩者的光譜圖應(yīng)完全一致。如果沒有標樣,也可以和現(xiàn)成的標 準譜圖對照進行比較。這種方法要求儀器準確,精密度高,且測定條件要相同。
3、比較最大吸收波長吸收系數(shù)的一致性
4、純度檢驗
5、推測化合物的分子結(jié)構(gòu)
6、氫鍵強度的測定
實驗證明,不同的極性溶劑產(chǎn)生氫鍵的強度也不同,這可以利用紫外光譜來判斷化合物在不同溶劑中氫鍵強度,以確定選擇哪一種溶劑。
7、絡(luò)合物組成及穩(wěn)定常數(shù)的測定:
8、反應(yīng)動力學(xué)研究
9、在有機分析中的應(yīng)用
有機分析是一門研究有機化合物的分離、鑒別及組成結(jié)構(gòu)測定的科學(xué),它是在有機化學(xué)和分析化學(xué)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的綜合性學(xué)科。