微量分光光度計(jì)能夠快速準(zhǔn)確的定量檢測(cè)核酸、蛋白質(zhì)等溶液。具有使用方便、消耗樣品少(僅2μl)、不用預(yù)熱、能迅速清理殘留樣品、不需要比色皿或其它樣品定位裝置、樣品不需要稀釋等特點(diǎn)，常用于核酸，蛋白定量以及細(xì)菌生長(zhǎng)濃度的定量，目前已成為眾多實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)儀器。
工作原理
超微量分光光度計(jì)進(jìn)行濃度測(cè)定的原理是根據(jù)朗伯-比爾（Lamber-Beer）定律，A＝K·C·L 式中，A為吸光度；K為吸（消）光系數(shù)；C為溶液的濃度；L為液層厚度。此公式說(shuō)明：在入射光一定時(shí)，溶液的吸光度與溶液的濃度及液層厚度成正比。此式就是光的吸收定律的數(shù)學(xué)表達(dá)式，又叫朗伯-比爾定律。
核酸定量
核酸的定量是超微量分光光度計(jì)使用頻率最大的功能?？梢远繙y(cè)定溶于緩沖液的寡核苷酸，單鏈、雙鏈DNA以及RNA含量。這是由于核酸、核苷酸及其衍生物都具有共軛雙鍵，具有紫外吸收的特性，最大的吸收波長(zhǎng)在260nm，吸收波谷在230nm。
除了核酸濃度，分光光度計(jì)同時(shí)顯示幾個(gè)非常重要的比值表示樣品的純度，如A260/A280的比值，用于評(píng)估樣品的純度，因?yàn)榈鞍椎奈辗迨?80nm。純凈的樣品，比值大于1.8（DNA）或者2.0（RNA）。如果比值低于1.8 或者2.0，表示存在蛋白質(zhì)或者酚類物質(zhì)的影響。A230表示樣品中存在一些污染物，如碳水化合物，多肽，苯酚等，較純凈的核酸A260/A230的比值大于2.0。
蛋白質(zhì)直接定量
這種方法是在280nm波長(zhǎng)，直接測(cè)試蛋白。蛋白質(zhì)直接定量方法，適合測(cè)試較純凈、成分相對(duì)單一的蛋白質(zhì)。紫外直接定量法相對(duì)于比色法來(lái)說(shuō)，速度快，操作簡(jiǎn)單；但是容易受到平行物質(zhì)的干擾，如DNA的干擾；另外敏感度低，要求蛋白的濃度較高。
比色法蛋白質(zhì)定量
蛋白質(zhì)通常是多種蛋白質(zhì)的化合物，比色法測(cè)定的基礎(chǔ)是蛋白質(zhì)構(gòu)成成分：氨基酸（如酪氨酸，絲氨酸）與外加的顯色基團(tuán)或者染料反應(yīng)，產(chǎn)生有色物質(zhì)。有色物質(zhì)的濃度與蛋白質(zhì)反應(yīng)的氨基酸數(shù)目直接相關(guān)，從而反應(yīng)蛋白質(zhì)濃度。
比色方法一般有BCA，Bradford，Lowry 等幾種方法。
與傳統(tǒng)分光光度計(jì)相比，超微量分光光度計(jì)要求的樣品體積小，不需要比色皿，比色杯清洗方便，只需用干凈的吸水紙將樣品從檢測(cè)平臺(tái)上擦拭干凈即可。除此之外，實(shí)驗(yàn)過(guò)程也更為簡(jiǎn)單，不需預(yù)熱，可隨時(shí)檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果顯示吸光度值的同時(shí)，程序直接給出濃度值。超微量分光光度計(jì)與傳統(tǒng)相比，體積更小，更方便使用。
紫外分光光度計(jì)，就是根據(jù)物質(zhì)的吸收光譜研究物質(zhì)的成分、結(jié)構(gòu)和物質(zhì)間相互作用的有效手段。紫外分光光度計(jì)可以在紫外可見光區(qū)任意選擇不同波長(zhǎng)的光。
問(wèn)題1：在使用過(guò)程中，出現(xiàn)數(shù)字顯示不能歸零，同時(shí)伴有圖線記錄基線位置偏高
可能原因：
?、俟怆姳对龅壤匣阅芙档?；
②信號(hào)處理板可能發(fā)生故障；
?、矍爸梅糯蟀娉霈F(xiàn)故障，引起反饋量增大。
解決辦法：
?、匍_機(jī)通電，先做記錄故障曲線，再與原始記錄的標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)照，找出異同點(diǎn)，并作一下定性定能分析。然后用一只同型號(hào)規(guī)格的新光電倍增管替換機(jī)上的光電管，再開機(jī)實(shí)驗(yàn)，結(jié)果記錄出來(lái)的圖線并沒有什么變化，由此證明光電倍增管沒有老化變質(zhì)。
?、谶M(jìn)一步檢查信號(hào)處理板，未發(fā)現(xiàn)信號(hào)處理板各元器件損壞，對(duì)影響靈敏度有關(guān)的電位器檢測(cè)，結(jié)果測(cè)得數(shù)據(jù)正常，這說(shuō)明信號(hào)處理板沒有故障。
?、塾捎趯?duì)以上分析，故障發(fā)生在前置級(jí)放大板可能性很大。應(yīng)采用模擬測(cè)試對(duì)前置放大板進(jìn)行測(cè)量，先利用直流穩(wěn)壓電源，把各供電電源加上，使其電路單獨(dú)工作，用信號(hào)發(fā)生器發(fā)出的信號(hào)加到輸入端。再用示波器接在輸出端測(cè)量輸出信號(hào)，將輸入信號(hào)與輸出信號(hào)對(duì)比，結(jié)果波形相同，說(shuō)明電路沒有故障。用相同方法對(duì)一個(gè)帶驅(qū)動(dòng)器的開關(guān)管測(cè)量，輸入端加入信號(hào)后，用示波器未能測(cè)出輸出端信號(hào)，判斷開關(guān)管壞，換上同一型號(hào)規(guī)格的開關(guān)管，恢復(fù)正常。
問(wèn)題2：儀器掃描樣品時(shí)，顯示一條直線
可能原因：軟件出現(xiàn)故障。
解決辦法：退出操作系統(tǒng)，重新啟動(dòng)計(jì)算機(jī)，再次掃描。
問(wèn)題3：紫外/可見分光光度計(jì)接通電源后，光源不亮
可能原因：
①光源燈泡已損壞；
?、诒ｋU(xiǎn)管燒壞。
解決辦法：更換氘燈或鎢燈；更換保險(xiǎn)管。
問(wèn)題4：儀器噪音比較大
可能原因：光源燈泡使用時(shí)間超過(guò)壽命期。
解決辦法：更換光源燈泡。
問(wèn)題5：基線的某一段噪音特別高
可能原因：波長(zhǎng)段相應(yīng)的濾光片受潮發(fā)霉，嚴(yán)重?fù)p失光的能量。
排除方法：更換相應(yīng)的濾光片。
問(wèn)題6：儀器自檢時(shí)提示通訊錯(cuò)誤
可能原因：儀器與電腦之間的數(shù)據(jù)線沒有連接好。
解決辦法：連接好數(shù)據(jù)線，重新打開儀器和軟件，重新自檢。
問(wèn)題7：自檢時(shí)提示波長(zhǎng)自檢出錯(cuò)
可能原因：自檢過(guò)程中可能打開過(guò)儀器樣品室的蓋子。
解決辦法：關(guān)上儀器樣品室蓋子，重新自檢。
問(wèn)題8：測(cè)試過(guò)程中提示能量太低
可能原因：
?、俟庠礋襞菔褂脮r(shí)間超過(guò)壽命期；
?、跇映刂杏胁煌腹獾臇|西擋住了光。
解決辦法：更換光源燈泡；拿走擋光的物品
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