液相色譜柱,是一種用于液體色譜分析儀器的部件。那么我們該如何的去選擇液相色譜柱呢?
下面我們就一起來看看吧。
在選擇色譜柱之前,先多了解自己的樣品和雜質(zhì),他們的類型結(jié)構(gòu)、極性、酸堿性、分子量大小等等,液相色譜柱決定最終分離效果,所以在選擇色譜柱時候有必要考慮清楚自己的需求。
首先液相色譜柱目前來說分為正反相色譜柱,正相有SI等,反相有C18等。正相主要分離極性物質(zhì),反相主要分離非極性物質(zhì),氨基柱等主要分離二者之間的。
明確了色譜柱大概功能之后,確認下自己樣品信息,基本就有點眉目了,方向?qū)α?,剩下的事情就是細?jié)了如:鍵合相、粒徑、孔徑、碳載量等
1.樣品是極性的且弱酸性的;就可以選擇C18在100%酸性水溶液條件下檢測,即要選擇承受100%純水且對極性化合物保留很好的色譜柱
2.如果樣品極性太強,或酸性太強;可以選擇CN,NH2,或硅膠柱,HILIC(親水色譜),也有使用C18+強陰離子對試劑或強陰離子交換色譜柱(缺點是離子對試劑平衡時間長;
對流動相pH要求比較精密,否則很難重復(fù)實驗,另外離子對試劑很難洗下來,基本上用了離子對的色譜柱就不能再用于其它實驗)
3.若樣品是堿性的;可選擇高純硅膠柱(高純硅膠缺少金屬雜質(zhì),且硅膠端基封尾)或一些經(jīng)過修飾的C18柱(如極性嵌入技術(shù)或堿去活技術(shù)等);
他們都會減少堿性化合物的拖尾,一般會選擇中性或偏堿的條件下做,因為這樣可增加堿性樣品的保留
4.如果堿性化合物的極性太強,或堿性太強;可以選擇寬pH的C18色譜柱在高pH值檢測(優(yōu)點是方法開發(fā)簡單;
缺點是目前實現(xiàn)這一技術(shù)的色譜柱品牌比較少,價格也高)或者選用HILIC色譜柱(硅膠柱在反相條件下使用;
這也是很經(jīng)典的檢測堿性樣品的方法)選擇強離子交換柱(缺點是不能用來分析其它樣品,對流動相pH要求比較精密,否則很難重復(fù)實驗)也有使用C18+強陰離子對試劑或強陰離子交換色譜柱。
高效液相色譜儀可以完成二元高壓梯度洗脫,也可以拓展為制備系統(tǒng),采用高壓混合器連接兩個高壓恒流泵,利用RS232通訊,即可實現(xiàn)梯度分析;
便于用戶自由選擇與搭配,混合器材主要由不銹鋼、生物惰性PEEK等構(gòu)成,用途廣泛;
可廣泛應(yīng)用于研究開發(fā)、醫(yī)藥檢驗、食品檢測、化工分析、環(huán)境監(jiān)測等眾多分析領(lǐng)域。
高效液相色譜儀分離原理:液-液分配(Liquid-liquid Partition Chromatography)及化學(xué)鍵合相色譜(Chemically Bonded Phase Chromatography) 流動相和固定相都是液體。
流動相與固定相之間應(yīng)互不相溶(極性不同,避免固定液流失),有一個明顯的分界面。
當(dāng)試樣進入色譜柱,溶質(zhì)在兩相間進行分配。達到平衡時,高效液相色譜儀報價,服從于高效液相色譜計算公式;
6種定量計算方法:歸一法、修正歸一法、帶比例因子的修正歸一法、內(nèi)標(biāo)法、外標(biāo)法,高效液相色譜儀適用范圍,以及指數(shù)計算法。
高效液相色譜儀特點:
1、梯度洗脫內(nèi)部軟件可自控制,編輯、存貯60個梯度方法,運行復(fù)雜的梯度程序;
2、泵形式:串聯(lián)雙柱塞 浮動式密封圈;泵頭自沖洗功能,泵無須手動排空即可輸液“自吸式單向閥”技術(shù),可延長密封圈使用壽命;
3、光路系統(tǒng)采用精密定位結(jié)構(gòu)和獨特的散熱技術(shù),高效的光學(xué)系統(tǒng)和數(shù)字過濾;
4、程序化的溶劑類和壓縮因子,可自動補償;完整的預(yù)清洗功能,更于快速溶劑更換;
5、波長調(diào)節(jié)功能:既可由鍵盤面板控制也可由程序軟件設(shè)定,全封閉集成型光電檢測元件,無需任何機械部分調(diào)整即可選擇或改變波長;
6、光源運行時間在線監(jiān)測并顯示,方便用戶確定光源壽命;
7、三條流量校正曲線以及特有的多點參數(shù)校正,保障了極高的流量準(zhǔn)確性;
8、梯度:高壓2-3元;梯度方式:高壓,梯度洗脫內(nèi)部軟件可自控制,可通過PC機及泵控制;
9、實時顯示樣品池和參比池能量,方便判斷光源和流通池狀態(tài);
10、紫外檢測器具有自動波長定位調(diào)整,自動調(diào)零,多量程輸出選擇;
11、智能化高,可實現(xiàn)網(wǎng)絡(luò)化平臺監(jiān)控,提高了你的QC效益;
12、自動化,讓你從繁鎖的分析操作中解放出更多的時間。
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