液相色譜儀的酸清洗和鈍化方法
公司地址：江西省南昌市解放西路明珠廣場C棟902室，福建省廈門市樂海北里35號403室
南昌捷島科儀專業(yè)生產(chǎn)銷售捷島牌GC1690系列，GC1620系列氣相色譜儀，并代理銷售、培訓、維修上海伍豐、沃特世/Waters、安捷倫、島津、上海儀電上分廠、賽默飛世爾等國內(nèi)外知名品牌氣相色譜儀、液相色譜儀及其配件耗材，優(yōu)惠價格、培訓、維修請銷售、培訓和維修統(tǒng)一客服，：，歡迎經(jīng)銷商和終端用戶在線或與訂購，謝謝！
30％磷酸水溶液通過酸反應和強表面活性劑／洗滌劑的共同作用，可以有效地清潔不銹鋼及其它潤濕的部件。這一方法比更常用的硝酸“鈍化”更有效、且較少損害(特別是對日常使用低紫外波長的應用來說)。這一磷酸清洗步驟不是起鈍化作用，但它是系統(tǒng)鈍化前清洗的*步。
一般來說，對于陽離子的離子色譜分析或配有氧化方式的電化學檢測器以外的應用不需要鈍化系統(tǒng)。因為有真空脫氣機(每個通道體積為8m1)，可不必用磷酸；中洗全部通道。如果你計劃四個通道都要用，則可用濕灌注的方式以4mL／min流速對每個通道清洗8～1 O分鐘來清洗脫氣機。這一步完成后你必須徹底淋洗管路，用水淋洗2～3次以便將磷酸從溶劑過濾頭等部件沖洗凈。
安裝好的HPLC系統(tǒng)的酸清洗和鈍化
HPLC系統(tǒng)內(nèi)部可能的污染物來自人的觸摸，暴露在實驗室化學環(huán)境，與零部件制造相關(guān)的殘留物，或來自先前的流動相和樣品的殘余物。
雖然系統(tǒng)自身也會逐步地被流動相清洗，但某些釋放出的雜質(zhì)會吸附在色譜柱上以及檢測器潤濕的表面上，因而會降低總的性能。
磷酸清洗：
通常用于從系統(tǒng)中除去有機雜質(zhì)?？赡苁怯捎谙礈熳饔茫坪醣葟娪袡C溶劑更好也更快。這一步清洗必須在硝酸鈍化之前完成。
硝酸鈍化：
實際上是作用于不銹鋼表面，在表面上生成均勻的氧化層。這層氧化膜保護不銹鋼免受腐蝕(鹵化物，螯合劑，等等)并且盡量減少浸出的金屬離子進入流動相。
以下應用需要在使用前做磷酸清洗和硝酸鈍化，包括：
①所有的氨基酸分析系統(tǒng)；
②所有包含電化學檢測器的系統(tǒng)；
③所有要分析無機陽離子，包括過渡金屬的系統(tǒng)；
④所有利用柱后添加衍生試劑或絡合樣品組分的系統(tǒng)。
以下應用需要在使用前只做磷酸清洗，包括：
①所有常規(guī)用途的、可能在低pH環(huán)境下在低紫外檢測波長下運行的HPLC系統(tǒng)；
②所有需要高靈敏度性能的梯度紫外檢測系統(tǒng)。
系統(tǒng)清洗指南：
注意：在實行這個程序時采用適當?shù)陌踩雷o措施準備工作：
首先，摘下色譜柱，用兩通或接頭取代色譜柱。在實行這一清洗步驟時，如果有可能選擇監(jiān)測的紫外波長為：254nm。通過軟件或移去電纜的方式取消紫外檢測器的自動回零功能。
具體步驟：
1、用甲醇徹底沖洗系統(tǒng)，以等比例方式通過泵的所有管路。
2、用水徹底沖洗系統(tǒng)，以等比例方式通過泵的所有管路。
3、以等比例方式通過泵的所有管路導入～30％v／v磷酸水溶液。以1mL/min流速洗大約一個小時。在沖洗期間活動所有的閥，包括：參比閥、進樣閥及旁路閥等等。
4．用水徹底沖洗所有管路和系統(tǒng)。
必要時用6N硝酸(HN03)重復以上步驟。否則，跳到第7步。注意：硝酸是一個強紫外吸收溶液。除非需要，不要做鈍化程序。
5．以等比例方式通過泵的所有管路導人6N硝酸水溶液(大約是40％)。以1mL/min流速洗大約一個小時。
6．用水徹底沖洗系統(tǒng)，仔細檢查是否有任何滲漏，在沖洗期間反復活動所有的閥，包括：參比閥、進樣閥及旁路閥等等。
注意：如果你要用低于270nm的紫外波長作檢測，則需要更大量水的清洗過程，不斷的換新鮮水并活動各個閥(沖洗進樣器，等)以便從系統(tǒng)中除去所有的痕量硝酸根離子。硝酸清洗后經(jīng)常在幾天之內(nèi)都會觀察到在低紫外波長下有負的基線漂移。勤換水和有耐心是盡快消除紫外本底的關(guān)鍵。
7．返回到甲醇洗，然后繼續(xù)用實驗所需的溶劑沖洗。
8．通過軟件或接上電纜的方式重新使紫外檢測器的自動回零功能恢復.
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1、液相色譜儀整機保養(yǎng)
?。?）短期停機
在完成一天工作以后，都要停機等第二天再繼續(xù)工作，則可按以下步驟停機。
A）關(guān)閉二次儀表（記錄儀、積分儀或色譜工作站）。
B）關(guān)閉檢測器電源（同時切斷柱箱溫度檢測器的電源）。
C）停止恒流泵工作，然后切斷其電源。
D）用二次蒸餾水沖洗進樣閥的進樣孔（在“LOAD”和“INJECT”兩個位置）。
E）切斷實驗室工作電源，加滿盛液瓶中的流動相，待第二天使用。
F）將儀器罩上防塵罩。
?。?）長期停機
液相色譜儀數(shù)周或數(shù)月暫不使用，這時除按《短期停機》的A）～D）步驟處理外，還須完成以下步驟：
A）拆下恒流泵的流動相盛液瓶，換上色譜柱指定的保護試劑（例：甲醇、去離子水等），開啟泵數(shù)分鐘（流速0.5mL/min~1.5mL/min）后停泵。
B）從系統(tǒng)中拆下色譜柱，用專用的密封螺帽將柱管兩端密封后保存。
C）用普通φ1.6導管替代分離柱聯(lián)結(jié)。
D）用二次蒸餾水或去離子水輸入輸液泵，開啟泵，流量1mL/min~2mL/min，沖洗泵體、進樣閥、檢測器流通池數(shù)分鐘，在沖洗過程切換六通閥數(shù)次，使定量管得到清洗。
E）拆除替代柱的導管、泵輸入端和出口的導管和流通池輸入、輸出口導管，分別用螺帽密封輸液泵出口和流通池輸入、輸出口。
F）撥下總電源接線板的插頭，貯存好專用的流動相和樣品，用干布擦洗儀器，罩上防塵罩。
G）檢測器存放地點應干燥
2、液相色譜儀輸液泵的保養(yǎng)
輸液泵是液相色譜儀的心臟部件，品質(zhì)再好的泵，若不注意日常保養(yǎng)，其損壞的幾率是極高的，將大大降低儀器的使用價值。
a)使用甲醇作流動相，請注意自身保護和環(huán)境保護，廢液注入空瓶內(nèi)，集中處理，不得倒入下水道內(nèi)。
b)輸液泵使用前，先注意探漏檢查，視各密封點和泵體有否漏液。
c)在無流動相通入的情況下，嚴禁啟動泵體電機，以免柱塞密封環(huán)磨損。
d)測試泵流量性能時，用于收集液體的容器，應選用小口瓶頸的容器，防止收集過程中，溶液蒸發(fā)，影響測量精度。，必要時應將其密封存放在干燥容器內(nèi)，以預防光學系統(tǒng)霉變。
e)金屬泵體的輸液泵，應盡量避免使用含有鹵離子（如KCL、NaCL、NH4CL）的流動相或能產(chǎn)生鹵離子的流動相，若必須使用此類流動相，建議使用泵體用非金屬材料制造的輸液泵。方則使用后，應立即使用去離子水清洗泵體和整個色譜系統(tǒng)的管路。
f)使用的流動相必須是HPLC級或分析純級，特別是配置的流動相，在使用前，必須過濾掉其中的顆粒狀雜質(zhì)和其他物質(zhì)（使用0.45μm的濾膜過濾）
g)長期不使用輸液泵，應在最后分析結(jié)束時，用注射器吸取去離子水通過專用的泵頭清洗孔清洗泵體和柱塞桿。以延長密封圈和寶石柱塞桿的壽命。
h)輸液泵液路在維修或保養(yǎng)時，應切斷儀器電源。非專業(yè)維修人員請不要打開機箱罩。
液相色譜儀的應用，可用于高沸點、熱穩(wěn)定性差以及具有生理活性物質(zhì)的分析。一般來說，沸點在450℃以下，相對分子質(zhì)量小于450的有機物可用液相色譜儀分析，但這些物質(zhì)只占有機物的15%～20%，其余的80%～85%有機物原則上都可采用高效液相色譜儀分析。
色譜柱的使用和維護，色譜柱的正確使用和維護十分重要，稍有不慎就會降低柱效、縮短使用壽命甚至損壞。
在色譜操作過程中，需要注意下列問題，以維護色譜柱。調(diào)節(jié)流速太快，避免壓力和溫度的急劇變化及任何機械震動。溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會影響柱內(nèi)的填充狀況；柱壓的突然升高或降低也會沖動柱內(nèi)填料，因此在調(diào)節(jié)流速時應該緩慢進行，在閥進樣時閥的轉(zhuǎn)動不能過緩。
反沖色譜柱，一般說來色譜柱不能反沖，只有生產(chǎn)者指明該柱可以反沖時，才可以反沖除去留在柱頭的雜質(zhì)。否則反沖會迅速降低柱效，預柱和保護柱，選擇使用適宜的流動相（尤其是pH），以避免固定相被破壞。
有時可以在進樣器前面連接一預柱，分析柱是鍵合硅膠時，預柱為硅膠，可使流動相在進入分析柱之前預先被硅膠“飽和”，避免分析柱中的硅膠基質(zhì)被溶解。
避免將基質(zhì)復雜的樣品尤其是生物樣品直接注入柱內(nèi)，需要對樣品進行預處理或者在進樣器和色譜柱之間連接一保護柱。保護柱一般是填有相似固定相的短柱。保護柱可以而且應該經(jīng)常更換。
液相色譜儀的基本結(jié)構(gòu)，由輸液系統(tǒng)、進樣系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、檢測系統(tǒng)和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)等組成。
工作原理，利用混合物各組分在固定相和流動相中溶解、分配或吸附等化學作用性能的差異，使各組分在作相對運動的兩相中反復多次受到上述各作用力而達到相互分離。
從液相色譜儀工作流程中看到，色譜柱是實現(xiàn)分離的核心部件，要求柱效高、柱容量大和性能穩(wěn)定。柱性能與柱結(jié)構(gòu)、填料特性、填充質(zhì)量和使用條件有關(guān)。
色譜填料：經(jīng)過制備處理后，用于填充色譜柱的物質(zhì)顆粒，通常是5-10粒徑的球形顆粒。
色譜柱管：內(nèi)部拋光的不銹鋼管。典型的液相色譜分析柱尺寸是內(nèi)徑4.6mm，長250mm。
色譜柱：也稱固定相，是將色譜填料填充到色譜柱管中所構(gòu)成的，色譜柱的填充，干法填充：在硬臺面上鋪上軟墊，將空柱管上端打開垂直放在軟墊上，用漏斗每次灌入50-100mg填料，然后垂直臺面墩10-20次。
濕法填充：又稱淤漿填充法，使用專門的填充裝置。
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