液相色譜儀的日常維護(hù)與注意事項(xiàng)

　　一、日常維護(hù)：

　　1.定期清洗單向閥：將單向閥卸下，一般先用純凈水超聲10分鐘，然后用異丙醇超聲，10分鐘；也可直接用異丙醇超聲10分鐘。

　　2.定期清洗吸濾頭：將吸濾頭卸下，一般先用純凈水超聲10分鐘，然后用異丙醇超聲10分鐘；也可直接用異丙醇超聲10分鐘。

　　3.定期沖洗檢測(cè)池：把色譜柱卸下，在流速1.0ml/min的狀態(tài)下先用純凈水沖洗30分鐘，然后再用30%

　　磷酸（色譜級(jí)）沖洗30分鐘左右，再用超純水沖洗至流出液為中性，最后用甲醇沖洗，待用。

　　二、注意事項(xiàng)：

　　1.開始進(jìn)樣前30分鐘開氘燈即可，節(jié)約燈的能量和使用時(shí)間。

　　2.流動(dòng)相的使用和注意事項(xiàng)：

　?、偎昧鲃?dòng)相必須預(yù)先濾過(guò)和脫氣，流動(dòng)相一般貯存于玻璃不銹鋼容器內(nèi)。貯存容器一定要蓋嚴(yán)，防止溶劑揮發(fā)引起組成變化。磷酸鹽、乙酸鹽緩沖液很易長(zhǎng)霉，應(yīng)盡量新鮮配制使用，不要長(zhǎng)期貯存。容器應(yīng)定期清洗，特別是盛水、緩沖液和混合溶液的瓶子，以除去底部的雜質(zhì)沉淀和可能生長(zhǎng)的微生物。

　　②配制流動(dòng)相用水需為娃哈哈牌純凈水或經(jīng)超聲過(guò)濾后的純化水，流動(dòng)相配制好后先用直徑為5cm，孔徑為0.45ｕm的濾膜，通過(guò)沙芯過(guò)濾器的過(guò)濾，然后在超聲儀上超聲。

　?、鄄坏脤⒀b流動(dòng)相的容器直接放置與超聲儀內(nèi)，需放與篩網(wǎng)上進(jìn)行超聲。

　　3.六通閥的使用和維護(hù)注意事項(xiàng)：

　?、贅悠啡芤哼M(jìn)樣前必須用濾膜過(guò)濾，以減少微粒對(duì)進(jìn)樣閥的磨損。

　　②轉(zhuǎn)動(dòng)閥芯時(shí)不能太慢，更不能停留在中間位置，否則流動(dòng)相受阻，使泵內(nèi)壓力劇增，甚至超過(guò)泵的最大壓力；再轉(zhuǎn)到進(jìn)樣位時(shí)，過(guò)高的壓力將使柱頭損壞。

　?、蹫榉乐咕彌_鹽和樣品殘留在進(jìn)樣閥中，每次分析結(jié)束后應(yīng)沖洗進(jìn)樣閥。通常可用水沖洗，或先用能溶解樣品的溶劑沖洗，再用水沖洗。

　　4.色譜柱柱壓升高的主要因素：

　?、貺C-10AT/20AT/10ATPlus泵的單向閥堵塞。

　?、谏V柱的入口篩板堵塞。

　?、畚鼮V頭堵塞。

　?、躊EEK管接口處堵塞。

　　5.色譜柱柱壓不穩(wěn)的因素：

　?、俦脙?nèi)有空氣。

　?、诒?span title="密封墊" target="_blank">密封墊損壞。

　　③溶劑中的氣泡。

　?、芟到y(tǒng)檢漏，找出漏點(diǎn)。

　　6.樣品峰保留時(shí)間漂移的主要因素：

　?、偈覂?nèi)溫度變化過(guò)大。

　?、诹鲃?dòng)相成分發(fā)生變化。

　?、凵V柱未平衡好。

　?、鼙弥杏袣馀?。

　　⑤該流動(dòng)相是否適宜此樣品的檢測(cè)。

　　7.基線漂移的主要因素：

　　①柱溫波動(dòng)。

　?、诹鲃?dòng)相不均勻。

　?、哿魍ǔ乇晃廴净蛴袣怏w。

　?、軝z測(cè)器出口阻塞。

　?、萘鲃?dòng)相配比不當(dāng)或流速變化。

　?、蘖鲃?dòng)相污染、變質(zhì)。

　?、呤褂醚h(huán)溶劑。

　　8.檢測(cè)器靈敏度不夠的主要因素：

　?、贅悠愤M(jìn)樣量不足。

　　②波長(zhǎng)設(shè)置不正確。

　?、蹤z測(cè)器池窗污染。

　?、軝z測(cè)池中有氣泡。

　?、蓦妷翰环€(wěn)。

　?、蘖鲃?dòng)相流速不合適。

　　9.色譜柱的使用和維護(hù)注意事項(xiàng)：

　　①避免壓力和溫度的急劇變化及任何機(jī)械震動(dòng)。柱壓的突然升高或降低也會(huì)沖動(dòng)柱內(nèi)填料，因此在調(diào)節(jié)流速時(shí)應(yīng)該緩慢進(jìn)行，在閥進(jìn)樣時(shí)閥的轉(zhuǎn)動(dòng)不能過(guò)緩。

　　②應(yīng)逐漸改變?nèi)軇┑慕M成，特別是反相色譜中，不應(yīng)直接從有機(jī)溶劑改變?yōu)槿渴撬?，反之亦然?/p>

　　③一般說(shuō)來(lái)色譜柱不能反沖，只有生產(chǎn)者指明該柱可以反沖時(shí)，才可以反沖除去留在柱頭的雜質(zhì)。否則反沖會(huì)迅速降低柱效。

　?、苓x擇使用適宜的流動(dòng)相（尤其是pH），以避免固定相被破壞。

　?、荼苊鈱?fù)雜的樣品尤其是生物樣品直接注入柱內(nèi)，需要對(duì)樣品進(jìn)行預(yù)處理或者在進(jìn)樣器和色譜柱之間連接一保護(hù)柱。

　?、藿?jīng)常用強(qiáng)溶劑沖洗色譜柱，清除保留在柱內(nèi)的雜質(zhì)。

　?、弑４嫔V柱時(shí)應(yīng)將柱內(nèi)充滿乙腈或甲醇，柱接頭要擰緊，防止溶劑揮發(fā)干燥。絕對(duì)禁止將緩沖溶液留在柱內(nèi)靜置至次日或更長(zhǎng)時(shí)間。

　?、嗌V柱使用過(guò)程中，如果壓力升高，一種可能是濾片被堵塞，這時(shí)應(yīng)更換濾片或?qū)⑵淙〕鲞M(jìn)行清洗；另一種可能是大分子進(jìn)入柱內(nèi)，使柱頭被污染；如果柱效降低或色譜峰變形，則可能柱頭出現(xiàn)塌陷，死體積增大。

　　⑨以硅膠為基質(zhì)的填料，只能在pH2~9范圍內(nèi)使用。每次分析檢測(cè)完成后，可以用洗脫能力強(qiáng)的洗脫液沖洗，例如ODS柱宜用甲醇沖洗至基線平衡。

　　10.樣品必須用直徑為2.5cm，孔徑為0.45ｕm的濾膜針式過(guò)濾。如有明確要求需用離心過(guò)濾的，經(jīng)離心過(guò)濾后取上清液即可。