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色譜柱清洗方法及技術(shù)交流

時間:2020-05-10    來源:儀多多儀器網(wǎng)    作者:儀多多商城     
  吸附的主要原因
 
  反相硅膠柱填充介質(zhì)(固定相)與樣品間常常會發(fā)生下列吸附現(xiàn)象:
 
  (1) 殘存硅醇基與堿性物質(zhì)間的離子吸附;(2) 硅膠表面的金屬雜質(zhì)與金屬配位物質(zhì)間的吸附;
 
  (3) 疏水性極強的物質(zhì)在柱中的蓄積。以上現(xiàn)象,會引起反相色譜柱柱效下降、拖尾、重復(fù)性不良等狀況的發(fā)生
 
  清洗方法
 
  1、疏水性物質(zhì)的去除:使用有機溶劑(乙腈、甲醇、乙腈與THF的混合溶劑)進行清洗。 考慮樣品成分對于有機溶劑的溶解性,選用比淋洗液濃度高的有機溶劑、或選用極性較低的有機溶劑進行過柱清洗。這種情況下,有必要注意淋洗液中鹽的析出現(xiàn)象。
 
  2、堿性物質(zhì)(金屬配位物質(zhì))的去除:使用酸性水溶液與有機溶劑的混合液(0.1%磷酸、0.1%TFA/乙腈、甲醇的混合液)進行過柱清洗。
 
  *一般來說,清洗時間可選擇為過柱5-10個柱體積便可。
 
  在附吸成分其吸附力極強時,即使進行過清洗,柱性能也有可能得
 
  不到恢復(fù)。另外,請充分考慮淋洗液的pH值,以避免損壞色譜柱。

液相色譜柱的結(jié)構(gòu)說明

  液相色譜柱的結(jié)構(gòu):

  1、空柱由柱接頭、柱管及濾片組裝而成。

  柱接頭采用低死體積結(jié)構(gòu),柱接頭是兩端螺紋組件,一端是為7/16英寸外螺紋,另一端是3/16英寸的內(nèi)螺紋(國內(nèi)外已規(guī)范化)。7/16英寸外螺紋與1/4英寸柱管(Φ6.35mm)連接,中間放置壓壞用于密封。3/16英寸的內(nèi)螺紋與1/16英寸(Φ1.57mm)的連接管連接,中間也放置壓環(huán)用于柱接頭的密封。為了盡量減少柱外死體積,在安裝色譜柱時,用Φ1.57mm連接管通過空心螺釘壓環(huán)后要盡量插到底,然后再擰緊空心螺釘。壓環(huán)被空心螺釘擠壓變形后緊箍在連接管上(連接管通過壓環(huán)后露出的管長度應(yīng)嚴格控制在2.5mm長或其他固定尺寸)。

  在兩端柱接頭內(nèi),柱管兩端各放置一片不銹鋼濾片(或濾網(wǎng)),用于封堵柱填料不被流動相沖出柱外而流失??罩鹘M件均為316#不銹鋼材質(zhì),能耐受一般的溶劑作用。但由于含氯化物的溶劑對其有一定的腐蝕性,故使用時要注意,柱及連接管內(nèi)不能長時間存留此類溶劑,以避免腐蝕。

  2、柱填料:

  液相色譜柱的分離作用是在填料與流動相之間進行的,柱子的分類是依據(jù)填料類型而定。

  正相柱:多以硅膠為柱填料。根據(jù)外型可分為無定型和球型兩種,其顆粒直徑在3—10?m的范圍內(nèi)。另一類正相填料是硅膠表面鍵合—CN,-NH2等官能團即所謂的鍵合相硅膠。

  反相柱:主要是以硅膠為基質(zhì),在其表面鍵合十八烷基官能團(ODS)的非極性填料。也有無定型和球型之分。

  常用的其他的反相填料還有鍵合C8、C4、C2、苯基等,其顆粒粒徑在3—10?m之間。

  

標簽: 液相色譜柱
液相色譜柱 液相色譜柱的結(jié)構(gòu)說明_液相色譜柱

液相色譜柱日常該如何維護?

  液相色譜柱是一種用于液體色譜分析儀器。
  液相色譜柱的日常維護:
  1、每次開機時,流速和柱壓要逐漸增加,突然迅速增加,會使柱床受到?jīng)_擊,引起紊亂,產(chǎn)生空隙
  2、在進樣前使色譜系統(tǒng)充分平衡,是否平衡可由基線加以判斷
  3、在進樣前,檢查色譜系統(tǒng)的各個接頭,通常由此能發(fā)現(xiàn)是否有漏液現(xiàn)象。如有漏液,空氣會從漏縫進入系統(tǒng)引起基線漂移,影響峰高和峰面積的重復(fù)性
  4、不要把柱接頭上得太緊,否則易損壞接頭螺紋,引起滲漏
  5、不要把柱子放在有氣流的地方或直接放到陽光下,氣流和陽光都會使柱子產(chǎn)生溫度梯度造成基線漂移;如果懷疑基線漂移是由溫度梯度引起的,可以設(shè)法使柱子恒溫
  6、若儀器用做常規(guī)分析,樣品種類有限,但分析次數(shù)很多,則不妨為每一類常規(guī)分析配置一根專用柱,這樣有助于延長柱壽命
  7、如果懷疑樣品會污染色譜柱,可以用合適的溶劑幾百毫升、慢慢沖洗柱子過夜,第二天早晨再用流動相重新平衡柱子約3min、
  8、在因裝卸、更換、貯存等而挪動柱子時,動作要輕,不要使其受到碰撞,以免柱床因震動產(chǎn)生空隙或通道
  9、柱要加標簽,新舊分開,不要放在溫度變化很大的地方
  10、液相色譜柱柱子不用或貯藏時,應(yīng)封閉并貯存在惰性溶劑中

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液相色譜柱 液相色譜柱日常該如何維護?_液相色譜柱

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