PLOT柱由于其分離原理和制柱的特殊性，所以在使用過程中需要考慮更多的細(xì)節(jié)。
常用的PLOT柱有如下種類：分子篩類（，13X，4A），氧化鋁，硅膠，高聚物如PLOTQ，U,PORA Q U等，碳介質(zhì)（C分子篩，C黑）。
各種PLOT柱的使用注意事項：
1,氧化鋁柱，用于C1-C8的烴類分析，對異構(gòu)體有很好分離。應(yīng)該注意以下物質(zhì)會污染該柱，甚至損壞柱子。（水，CO2，C10以上烴類，極性物質(zhì)如醛醇酮酯等）。另外載氣使用時應(yīng)該注意要逐漸增加氣流到適度，避免載氣突然增加損壞柱床。具體為0.53mm柱5ml/min，0.32柱3ml/min。
2,分子篩柱，用于*氣體的分離，可以分離氬，氧。需要注意水，CO2,C3以上物質(zhì)，都會影響該柱子的分離。zui高使用溫度300度，載氣使用同上
聚合物基質(zhì)色譜柱具有相當(dāng)強(qiáng)的硬度，有無孔和有孔兩種規(guī)格。該固定相中含有苯基官能團(tuán)，可與待測物發(fā)生疏水相互作用。
與硅膠基質(zhì)的反相填料相比，PolyRP固定相的一個顯著優(yōu)點是可以在極端pH（1-14）條件下使用，盡管分離效率略有降低。它具有相當(dāng)強(qiáng)的硬度，有無孔和有孔兩種規(guī)格。
該固定相中含有苯基官能團(tuán)，可與待測物發(fā)生疏水相互作用。與硅膠基質(zhì)的反相填料相比，PolyRP固定相的一個顯著優(yōu)點是可以在極端pH（1-14）條件下使用，盡管分離效率略有降低。
聚合物基質(zhì)色譜柱的安裝：
a、拆開柱包裝盒，確認(rèn)色譜柱的類型、尺寸、出廠日期以及柱內(nèi)貯存的溶劑。
b、擰下柱兩端接頭的密封堵頭放回包裝盒供備用。
c、按柱管上標(biāo)示的流動相流向，將聚合物基質(zhì)色譜柱的入口端通過連接管與進(jìn)樣閥出口相連接(如條件允許，建議在柱前使用保護(hù)柱)；柱的出口與檢測器連接。連接管是外徑為1.57mm、內(nèi)徑為0.1-0.3mm的不銹鋼管。
在接管時一定要設(shè)法降低柱外死體積。連接管通過空心螺釘、壓環(huán)后盡量用力插到底，然后順時針擰緊空心螺釘，直到擰不動為止，切記不要用力過大。如聚合物基質(zhì)色譜柱通過流動相加壓后有漏液現(xiàn)象，請用扳手繼續(xù)順時針擰1／4圈，直至不漏液為止。
聚合物基質(zhì)色譜柱主要基質(zhì)的特點：
a.硅膠
硅膠是陶瓷性質(zhì)的無機(jī)物基質(zhì)，剛性大，不易變形。
化學(xué)性質(zhì)較穩(wěn)定，但對于水溶液尤其堿性水溶液仍然是不穩(wěn)定的，即使表面經(jīng)過良好的化學(xué)鍵合，覆蓋了固定液，還是要注意水、堿性溶液、酸性溶液對硅膠的溶解作用，基質(zhì)或者說是柱床(packedbed)溶解對色譜柱的影響是致命的。
以聚合物基質(zhì)色譜柱的填料構(gòu)成了目前絕大多數(shù)的色譜柱填料。純硅膠填料適宜分離溶于有機(jī)溶劑的極性、弱極性的非強(qiáng)離解型的化合物，硅膠也可以做凝膠色譜但柱效較低。
聚合物基質(zhì)色譜柱鍵合固定相的高壓液相填料，有其他填料無法比擬的高分離效能。
b.二氧化鋁
二氧化鋁和硅膠相似，但對水溶液、酸性堿性水溶液溶液更加不穩(wěn)定。所以，極少用作鍵合固定相的基質(zhì)，也是適宜分離溶于有機(jī)溶劑的極性、弱極性的非強(qiáng)離解型的化合物，尤其是分離芳香族碳?xì)浠衔?。酸性易離解的化合物容易在二氧化鋁上形成死吸附。另外，氧化鋁分離幾何異構(gòu)體能力優(yōu)于硅膠。
c.聚合物填料
聚合物基質(zhì)色譜柱受壓會變形，壓力限度低但pH使用范圍寬。苯乙烯-二乙烯苯基質(zhì)疏水性強(qiáng)，使用任何流動相，在整個pH范圍內(nèi)穩(wěn)定，可以用強(qiáng)酸、強(qiáng)堿來清洗色譜柱。甲基丙烯酸酯基質(zhì)比苯乙烯-二乙烯苯疏水性更強(qiáng)，但可以通過適當(dāng)?shù)墓δ芑揎椬兂捎H水性的。
由于不耐壓、有溶脹性，所以聚合物填料適宜用于大分子像蛋白質(zhì)或合成的高聚物，另外還可以制成分子排阻、離子交換柱。大孔樹脂實際上主體就是苯乙烯-二乙烯苯聚合物或類似的合成高聚物。
聚合物基質(zhì)色譜柱廣泛用于各種不同基質(zhì)中糖分子、糖醇和其他水溶性物質(zhì)的分離。可以用來分析有機(jī)酸及利巴韋林等物質(zhì)，可以用來分離樹膠醛糖、阿糖醇等糖類。
色譜柱柱長：一般講，柱管增長，可改善分離能力，短則組分流出的快些；色譜柱柱內(nèi)徑小分離效果好，柱內(nèi)徑大處理量大，但柱內(nèi)徑過大，將導(dǎo)致?lián)w不能均勻地分布在色譜柱中。分析用柱管一般內(nèi)徑為3-6毫米。
柱溫：是一個重要的操作變數(shù)，直接影響分離效能和分析速度。選擇柱溫的根據(jù)是混合物的沸點范圍，固定液的配比和鑒定器的靈敏度。提高柱溫可縮短分析時間；降低柱溫可使色譜柱選擇性增大，有利于組分的分離和色譜柱穩(wěn)定性提高，柱壽命延長。一般采用等于或高于數(shù)十度于樣品的平均沸點的柱溫為較合適，對易揮發(fā)樣用低柱溫，不易揮發(fā)的樣品采用高柱溫。
載氣流速：載氣流速是決定色譜分離的重要原因之一。一般講流速高色譜峰狹，反之則寬些，但流速過高或過低對分離都有不利的影響。流速要求要平穩(wěn)，常用的流速范圍每分鐘在10-100亳升之間。
固定相：固定相是由固體吸附劑或涂有固定液的擔(dān)體構(gòu)成。
?。?）固體吸附劑或擔(dān)體粗細(xì)：一般采用40-60目、60-80目、80-100目。當(dāng)用同等長度的柱子，顆粒細(xì)的分離效率就要比粗的好些。
?。?）固定液含量：固定液含量對分離效率的影響很大，它與擔(dān)體的重量比一般用15%-25%。比例過大有損于分離，比例過小會使色譜峰拖尾。
進(jìn)樣：一般講進(jìn)樣快，進(jìn)樣量小，進(jìn)樣溫度高其分離效果好。對進(jìn)液體樣，速度要快，汽化溫度要高于樣品中高沸點組分的沸點值，一次汽化，保證色譜峰形不致展寬、使柱效高。當(dāng)進(jìn)樣量在一定限度時，色譜峰的半峰寬是不變的。若進(jìn)樣量過多就會造成色譜柱超載。一般講柱長增加四倍，樣品的許可量增加一倍。對于常規(guī)分析，液體進(jìn)樣量為1-20微升；氣體進(jìn)樣量為0.1-5毫升。
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