紫外及可見光分光光度計的可測波長范圍為200一1000 nm,也有波長范圍為200- 400 nm的紫外分光光度計,但前者較為普遍。紫外及可見光分光光度計的構造原理與可見光分光光度計(如721型分光光度計)相似。由于玻璃吸收紫外光,因此單色器要用石英棱鏡或光柵。 (一)光(light source) 有鎢絲燈及氫燈(或氛燈)兩種??梢姽鈪^(qū)(360一1000 nm)使用鎢絲燈;紫外光區(qū) (200一360 nm)則用氫燈或氛燈。 (二)吸收池(absorption cell) 由于玻璃吸收紫外光.吸收池要用石英材質。 (三)檢瀏器(detector) 檢側器使用兩只光電管,一為氧化艷光電管,用于625一1000 nm波長范圍;另一只是銻艷光電管,用于200一625 nm波長范圍。光電倍增管亦為常用的檢測器,其靈敏度比一般的光電管高2個數量級。 紫外及可見光分光光度計分單光束和雙光束型。單光束型儀器使用前一般需要預熱以使儀器穩(wěn)定,缺點是難以消除與補償由于光源與電子測量系統(tǒng)不穩(wěn)定等所引致的誤差。雙光束型儀器能夠消除與補償由于光源、電子測量系統(tǒng)不穩(wěn)定等所引致的誤差,所以其測盤的精確度就提高了。 其工作原理可描述為:由光源(鎢絲燈氘燈,根據波長而變換使用)發(fā)出的光經人口狹縫及反射鏡反射至石英棱鏡或光柵,色散后經過出口狹縫而得到所需波長的單色光束。然后由反射鏡反射至由馬達轉動的調制板及扇形鏡上。當調制板以一定轉速旋轉時,時而使光束通過,時而擋住光束,因而調制成一定頻率的交變光束。之后扇形鏡在旋轉時,將此交變光束交替地投射到參比溶液(空白溶液)及試樣溶液上,后面的光電倍增管接受通過參比溶液及為試樣溶液所減弱的交變光通量,并使之轉變?yōu)闇y量信號。此信號經放大并用解調器分離及整流,然后以電位器自動平衡此兩直流信號的比率,并依照記錄器記錄得到吸收曲線。
關于原子吸收分光光度計的一些重要指標:
(1)波長示值誤差(波長的準確度)與重復性
譜線的理論波長與儀器波長測定讀數的差值稱為波長示值誤差。特定譜線波長的多次測定(一般用3次)中最大值與最小值之差為波長重復性。檢定規(guī)程要求:原子吸收分光光度計波長示值誤差應不大于0.5nm,波長重復性應優(yōu)于0.3nm。
(2)分辨率
原子吸收分光光度計儀器的分辨率是鑒別儀器對共振吸收線與鄰近的其它譜線分辨能力大小的一項重要技術指標。一般在規(guī)定的光譜通帶下可用特定譜線的半寬度來衡量,也可通過觀察是否實際可分辨某些元素的多條相鄰的譜線。如,能夠清晰分辨開鎳元素231.0nm、231.6nm、232.0nm三條相鄰的譜線,則該儀器的實際分辨率為0.4nm;能夠清晰分辨開汞265.2nm、265.4nm、265.5nm三條譜線,該儀器的實際分辨率為0.1nm;能清晰分辨開錳297.5nm、297.8nm兩條譜線,該儀器的實際分辨率為0.3nm。
(3)基線穩(wěn)定性
基線穩(wěn)定性是儀器的重要技術指標,它反映整機穩(wěn)定性狀況。基線穩(wěn)定性分靜態(tài)和動態(tài)兩種。
(4)靈敏度
靈敏度為原子吸收分光光度計儀器在單位濃度下獲得的吸光度,亦即采用外標法定量分析中校準曲線的斜率。
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