實(shí)驗(yàn)室新手碰到氣相色譜儀鬧情緒就摸不著頭腦。鬼峰有很多種類型,拖尾、負(fù)峰、臺(tái)階峰、波浪峰等等。開始走基線出現(xiàn)波浪峰,可能是哪些原因造成的?
(1)高靈敏度操作儀器未穩(wěn)定之前;
(2)操作TCD、ECD時(shí),柱箱或檢測(cè)器箱溫度周期變化;
(3)環(huán)境溫度對(duì)儀器控溫影響;
(4)電壓不穩(wěn),對(duì)柱溫控制精度影響;
(5)過(guò)溫保護(hù)設(shè)置低于控制溫度;
(6)壓力(流量)調(diào)節(jié)閥失調(diào),周期變化。
在懷疑峰形異變尋找可能原因、排除方法之前ZUI好先做以下工作:
仔細(xì)核查操作條件,與分析方法要求是否一致;
和當(dāng)初分析所存的標(biāo)準(zhǔn)色譜圖對(duì)照,判斷是否真出了問(wèn)題;
逐項(xiàng)仔細(xì)觀察儀器或設(shè)備工作狀態(tài),看有無(wú)操作失誤而引起的出峰失常;
液相色譜儀常見的故障一是堵,二是漏,本文通過(guò)三大原因給大家說(shuō)說(shuō),液相色譜儀為何會(huì)堵? 原因一:配制流動(dòng)相時(shí)細(xì)菌污染 首先,我們要認(rèn)識(shí)到,一般的國(guó)產(chǎn)甲醇其實(shí)不需要額外過(guò)濾處理,直接使用沒有問(wèn)題。即使是有些固態(tài)微粒雜質(zhì),也能在液相流路系統(tǒng)最前端的過(guò)濾頭上排除,真正容易引起問(wèn)題的,是水中的細(xì)菌?! ≡蚨菏褂昧鲃?dòng)相時(shí)的細(xì)菌污染 流動(dòng)相剛開始沒有長(zhǎng)菌,在使用時(shí)卻產(chǎn)生了細(xì)菌污染。這主要是在使用多元液相色譜儀時(shí)的一種不良使用習(xí)慣造成的?! ∨e比較簡(jiǎn)單的例子: 50%的甲醇水流動(dòng)相,有兩種使用方式。一種方式是在上機(jī)前就配好混合在一起,另一種方式是在流路A放純甲醇,流路B放純水?! 膯渭儗?shí)驗(yàn)效果來(lái)說(shuō),后一種有明顯的優(yōu)點(diǎn):首先是簡(jiǎn)單,不需要實(shí)驗(yàn)者另個(gè)計(jì)算配比混合,其次就是比例準(zhǔn)確,能得到保留時(shí)間重復(fù)性極好的實(shí)驗(yàn)效果?! 〉?,它有一個(gè)致命的缺陷,就是純水在流動(dòng)相瓶中幾天時(shí)間就會(huì)長(zhǎng)細(xì)菌很多情況下不僅僅用純水作流動(dòng)相,而是用緩沖鹽溶液,本身就是優(yōu)質(zhì)肥料,細(xì)菌長(zhǎng)得更迅速、,一旦有細(xì)菌柱子就壞得很快。所以這種方式要求操作人員每次實(shí)驗(yàn)都要用新制備的純水,更要求在每次實(shí)驗(yàn)后把水相換掉,換成甲醇沖洗干凈,這一點(diǎn)在實(shí)際工作中很多人意識(shí)不強(qiáng),就是意識(shí)到了但多次使用中總有一兩次會(huì)遺漏,但是往往這一兩次就足以產(chǎn)生致命的影響。因?yàn)橐合?font color="#0268CA">色譜柱的堵塞是不可逆的?! ∷裕瑢幙蔂奚⌒〉谋A魰r(shí)間的重復(fù)性,也不要用純水溶液作為流動(dòng)相的一組。從實(shí)際實(shí)驗(yàn)效果來(lái)說(shuō),我建議用10%的甲醇水代替純水溶液以前我做過(guò)不同比例甲醇水的細(xì)菌總數(shù)實(shí)驗(yàn),在5%就基本可以抑菌,在10%及以上就可以完全殺菌了、,這樣可以有效排除長(zhǎng)細(xì)菌的隱患,既可作流動(dòng)相,也可沖柱。就算是在配制流動(dòng)相時(shí)會(huì)計(jì)算得麻煩一些,但是一次麻煩,終身受益。 原因三:不適當(dāng)操作 1、在更換零件時(shí)選擇的型號(hào)有誤,接口不是很匹配,在擰緊的時(shí)候產(chǎn)生變形而使得管路堵塞?! ?、樣品處理液凈化得不干凈,長(zhǎng)期會(huì)在六通閥和柱之間形成阻塞不暢?! ?、在使用手動(dòng)六通閥時(shí),有些人可能由于手勁小的原因,轉(zhuǎn)動(dòng)的不到位,于是造成流路形成了死堵,壓力快速升高超過(guò)警戒值?! ?、在使用金屬管路作出廢液管時(shí),應(yīng)當(dāng)注意可以廢液瓶中先放一些水,并把廢液管的出口端放在液面下。如果位于在液相上且實(shí)驗(yàn)使用較高濃度的緩沖鹽溶液,在停機(jī)時(shí)可能在出口端結(jié)晶成塊并造成堵塞。這種情況不常見,但卻的確發(fā)生過(guò)。
在高效液相色譜實(shí)驗(yàn)中手動(dòng)進(jìn)樣閥在每次使用后,尤其是進(jìn)濃度差異比較大的樣品時(shí)要用專用工具(不是帶針頭的注射器)沖洗進(jìn)樣閥,沖洗時(shí)必須沖洗進(jìn)樣閥兩頭數(shù)次,每次數(shù)毫升。以防止無(wú)機(jī)鹽沉積和樣品微粒造成閥內(nèi)部磨損或阻塞以及樣品的交叉污染?! “惭b時(shí)進(jìn)樣閥的5,6出口要與注射器在同一水平線上,以防止虹吸現(xiàn)象的發(fā)生,導(dǎo)致進(jìn)樣量的重復(fù)性變異?! ∵M(jìn)樣量的多少要根據(jù)定量管的環(huán)體積決定: 當(dāng)樣品量較少時(shí):進(jìn)樣體積由注射器的進(jìn)樣體積決定,但最大體積要小于環(huán)體積的1/2?! ‘?dāng)樣品量較多時(shí):進(jìn)樣體積由定量管的體積決定,為保證樣品完全把定量管的流動(dòng)相置換干凈,需注射5-6倍的環(huán)體積?! ∫褂脤S玫囊合嘧⑸淦鬟M(jìn)樣,絕對(duì)不可用氣相注射器。注射器前應(yīng)用專用的樣品過(guò)濾器。