流動(dòng)相相當(dāng)于液相的血液，可以想象對(duì)液相的重要程度。那么流動(dòng)相都需要注意什么呢?　　01、過(guò)濾溶劑　　溶劑在使用前一定要用0.5μm的過(guò)濾器過(guò)濾，如果使用固體化學(xué)試劑(緩沖鹽)配制流動(dòng)相，過(guò)濾特別重要，不能讓固體微粒污染泵，阻塞進(jìn)樣器和柱頭過(guò)濾片。本實(shí)驗(yàn)室有水溶性和脂溶性兩種過(guò)濾膜供選擇(反光面朝上)，過(guò)濾水溶性流動(dòng)相時(shí)(如甲醇/水)，先用1～2mL甲醇潤(rùn)濕過(guò)濾膜，有助于快速抽濾?！　?2、保持儲(chǔ)液瓶的清潔　　用普通溶劑瓶作流動(dòng)相儲(chǔ)液器應(yīng)不定期廢棄瓶子，最后一次應(yīng)用HPLC級(jí)的水或溶劑清洗，不能在清洗過(guò)程中留下污跡。　　03、保證溶劑的質(zhì)量　　一定要用HPLC級(jí)的溶劑，水也應(yīng)達(dá)到HPLC級(jí)，同樣也要使用高純度的緩沖鹽?！　∫恍┮蛄鲃?dòng)相引起的常見(jiàn)問(wèn)題　　01、流動(dòng)相脫氣不充分　　流動(dòng)相受熱，或者流動(dòng)相不同組分混合時(shí)會(huì)有氣體產(chǎn)生，氣泡進(jìn)入泵內(nèi)引起壓力波動(dòng)，增加噪音，色譜圖上出現(xiàn)毛刺。可試用下列方法解決問(wèn)題：流動(dòng)相再脫氣;采用更有效的脫氣方法或兩種方法配合使用;改系統(tǒng)內(nèi)混合為系統(tǒng)外預(yù)混合?！　?2、流動(dòng)相供給不暢　　流動(dòng)相用完，管道中吸入氣體引起泵壓力不穩(wěn)。應(yīng)經(jīng)常觀察儲(chǔ)液器中流動(dòng)相的量，加足流動(dòng)相保證所有的樣品分析完畢。輸液管道上裝沉子沉至瓶底，儲(chǔ)液器蓋上留一小孔正好夾住進(jìn)液管，使其不能上下移動(dòng)?！　∵^(guò)濾器阻塞引起管道和泵腔空化，壓力不穩(wěn)。過(guò)濾器被微粒所阻塞或長(zhǎng)霉，去掉過(guò)濾器后如果系統(tǒng)運(yùn)轉(zhuǎn)正常，說(shuō)明已找出問(wèn)題，換上新的過(guò)濾器則可。有時(shí)候換上新的過(guò)濾器仍然不暢，那就需要查查流動(dòng)相的制備過(guò)程，或者換大孔徑的過(guò)濾器。不管如何，流動(dòng)相都需要重新過(guò)濾?！　×魉龠^(guò)高、阻力大，造成空化現(xiàn)象，這是由于過(guò)濾器孔徑、管道內(nèi)徑、流速和溶劑黏度等引起的。如果流速大于10mL/min，常會(huì)出現(xiàn)這種現(xiàn)象?！　∈褂孟铝蟹椒ń鉀Q：　　(1)使用低流速;　　(2)換大孔徑的過(guò)濾器;　　(3)增加進(jìn)液管道內(nèi)徑;　　(4)抬高或加壓儲(chǔ)液器;　　(5)不用過(guò)濾器，但流動(dòng)相一定要先過(guò)濾;　　(6)儲(chǔ)液器蓋子太緊，在儲(chǔ)液器內(nèi)形成真空，打出的流動(dòng)相不連續(xù)。應(yīng)松開(kāi)蓋子或留有1mm的縫隙;　　(7)進(jìn)液管道阻塞或彎曲使泵抽不到液，注意調(diào)整進(jìn)液管道或更換新的。其它問(wèn)題包括滲漏或接頭松動(dòng)、泵部件損壞等，都能引起供液不正常?！　?3、流動(dòng)相和儲(chǔ)液器被污染　　由于污染，噪音越來(lái)越大，檢測(cè)器基線上升。污染物可能被泵以穩(wěn)定的濃度打入系統(tǒng)，而再以穩(wěn)定的濃度流出來(lái)，所以在色譜圖中不出多余的峰。用梯度洗脫時(shí)弱流動(dòng)相可以使污染物聚在柱頂，流動(dòng)相強(qiáng)度增加后污染物可能被洗脫出來(lái)一個(gè)大的偽峰。有時(shí)基線噪音突然增大或突然提高，都是因?yàn)榉磸?fù)加進(jìn)新的流動(dòng)相或系統(tǒng)用得太久(通宵)所造成的。新加進(jìn)的流動(dòng)相有污染物或者流動(dòng)相長(zhǎng)霉，繁殖了細(xì)菌?！　∨K的儲(chǔ)液器會(huì)污染清潔的流動(dòng)相。每種流動(dòng)相備有專用的儲(chǔ)液器，或者定期報(bào)廢儲(chǔ)液器。　　流動(dòng)相污染來(lái)自這幾個(gè)方面　　04、試劑質(zhì)量不高，玻璃器皿不合格;　　微生物的影響;　　配制流動(dòng)相時(shí)操作不當(dāng)?shù)?　　因此要求高純度化學(xué)試劑和HPLC級(jí)溶劑;　　玻璃器皿按規(guī)定清洗干凈;　　為防止微生物生長(zhǎng)，每天要用甲醇清洗系統(tǒng);　　懷疑系統(tǒng)內(nèi)生長(zhǎng)了微生物，可用稀硝酸沖洗即可(注意不要損壞柱和管道系統(tǒng));　　真空脫氣時(shí)防止泵油帶入流動(dòng)相;　　用清潔的惰性塞子、攪棒、過(guò)濾器和玻璃器皿配制流動(dòng)相;　　已經(jīng)污染的流動(dòng)相一定要廢棄掉。