超微量紫外分光光度計(jì)是應(yīng)用液體的表面張力特性,樣品體積只需要1ul,在偵測臺(tái)上,經(jīng)上下臂的接觸拉出固定的光徑達(dá)到快速,微量,高濃度,免石英管,免毛細(xì)管等耗材偵測吸收值的優(yōu)點(diǎn)。
偵測時(shí)選擇不同偵測模式,可以得到較快速的結(jié)果:
吸收光譜,230nm, 260nm, 280nm吸收值(換算成10mm光徑吸收值),260/280 ratio,260/230 ratio及核酸濃度.
–200~850nm間所有波長的吸收值及光譜(以1mm光徑吸收值呈現(xiàn)).
A280蛋白質(zhì)定量法–280nm吸收值(換算成10mm光徑吸收值),260/280 ratio及蛋白質(zhì)濃度.僅適用于純化后的蛋白質(zhì),須具有已知的質(zhì)量消光系數(shù)(mass extinction coefficient)方可計(jì)算.
超微量紫外分光光度計(jì)的特點(diǎn)
1、檢測只需1 微升的樣本，節(jié)省消耗品費(fèi)用;
2、直接使用加樣器將待檢測樣本加在檢測的表面上，無需使用比色皿和毛細(xì)管;
3、測試多樣品的時(shí)候不需要不停的更換比色皿，減少工作量;
4、樣本無需進(jìn)行稀釋，即可進(jìn)行快速、簡便的檢測;
5、配套軟件具有開放式數(shù)據(jù)庫，可自行添加標(biāo)樣數(shù)據(jù)，自定義計(jì)算公式;
6、樣品檢測范圍廣，只要有標(biāo)樣，可對(duì)所有有紫外吸收的樣品進(jìn)行微量檢測。
超微量紫外可見分光光度計(jì)注意事項(xiàng)
1、該儀器應(yīng)放在干燥的房間內(nèi)，使用時(shí)放置在堅(jiān)固平穩(wěn)的工作臺(tái)上，室內(nèi)照明不宜太強(qiáng)。熱天時(shí)不能用電扇直接向儀器吹風(fēng)，防止燈泡燈絲發(fā)亮不穩(wěn)定。
2、使用本儀器前，使用者應(yīng)該首先了解本儀器的結(jié)構(gòu)和工作原理，甲醛檢測儀以及各個(gè)操縱旋鈕之功能。在未按通電源之前，應(yīng)該對(duì)儀器的安全性能進(jìn)行檢查，電源接線應(yīng)牢固，通電也要良好，各個(gè)調(diào)節(jié)旋鈕的起始位置應(yīng)該正確，然后再按通電源開關(guān)。
超微量紫外分光光度計(jì)可提供200~850nm的全光譜偵測,且不需要暖機(jī),開機(jī)后立即使用。搭配高感度CCD array偵測器,偵測吸收值可高達(dá)300Abs(dsDNA濃度2~15000ng/ul),大部分純化后的核酸幾乎都不需要稀釋即可偵測。
超微量紫外可見分光光度計(jì)是一類很重要的分析儀器，無論在物理學(xué)、化學(xué)、生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、材料學(xué)、環(huán)境科學(xué)等科學(xué)研究領(lǐng)域，還是在化工、醫(yī)藥、環(huán)境檢測、冶金等現(xiàn)代生產(chǎn)與管理行業(yè)，紫外可見分光光度計(jì)都獲得了日益廣泛的應(yīng)用。
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我們?nèi)绾蝸碓u(píng)價(jià)一臺(tái)紫外可見分光光度計(jì)的優(yōu)劣呢？ 首先，我們要來考察它的外觀。然后，我們探討一下會(huì)對(duì)儀器的使用有很大影響的幾個(gè)重要指標(biāo)：
1、 雜散光 它指不應(yīng)該有光的地方有了光。它是光譜測量中誤差的主要來源。這個(gè)值當(dāng)然越小越好了。
2、 光度準(zhǔn)確度 光度準(zhǔn)確度指實(shí)際測量的光度讀數(shù)值與真值之差。它是用戶對(duì)儀器的直接要求，每個(gè)用戶都必須重視。
3、 噪聲 噪聲也是儀器的重要指標(biāo)之一。它表征儀器的做稀溶液的能力。這個(gè)指標(biāo)也是越小越好。
4 、光譜帶寬 指從單色器射出的單色光譜線強(qiáng)度輪廓曲線的1/2高度處的譜帶寬度。表征儀器的光譜分辨率。按照比耳定律，光譜帶寬應(yīng)該是越小越好的，但是如果儀器的光源能量弱，光學(xué)傳感器的靈敏度低時(shí)，光譜帶寬小了，也得不到理想的測量結(jié)果的。所以，選擇和使用儀器時(shí)一定注意。
5、 穩(wěn)定性 穩(wěn)定性是使用者zui關(guān)注的指標(biāo)之一。儀器的宗旨就是穩(wěn)定可靠，不穩(wěn)定更談不上可靠了。
6、 噪聲 噪聲也是儀器的重要指標(biāo)之一。它表征儀器的做稀溶液的能力。這個(gè)指標(biāo)也是越小越好。
7、 波長的準(zhǔn)確度和重復(fù)性 儀器的每個(gè)值都是在一定的波長下測得的，如果所示的波長和實(shí)際波長偏差萬里，那么測出的值和真值的吻合度從何談起呢？可見這個(gè)指標(biāo)的重要性。
總之，這幾個(gè)指標(biāo)都是相互獨(dú)立又相互關(guān)聯(lián)的，每個(gè)指標(biāo)對(duì)儀器的使用都有很大影響。希望大家在選購紫外、可見分光光度計(jì)時(shí)，多做比較，多做判斷，切實(shí)找到一個(gè)穩(wěn)定可靠的好幫手。
我們選擇時(shí)需要根據(jù)自己實(shí)驗(yàn)室的需要 ，主要考慮光學(xué)構(gòu)造和光源、檢測方法、樣品類型和數(shù)據(jù)處理等因素。
1.光學(xué)構(gòu)造
一般來說，紫外光分光光度計(jì)分為單光束和雙光束兩類。1單光束型主要是依賴單束光進(jìn)行測量。一束給定波長的光通過對(duì)照物，然后再通過實(shí)際樣品溶液，就能得到吸光結(jié)果。
雙光束型則是通過一個(gè)斬光輪（mirrored chopper wheel）將一束光分成兩束，分別測量對(duì)照樣品和實(shí)際樣品?？梢詚ui小化光漂移（lamp drift）和減少測量時(shí)間。一些雙光型光度計(jì)不利用斬光輪，而是利用一種光束分光器來代替，將一束光分成兩束平行的光然后同時(shí)測量對(duì)照樣品和目的樣品。因?yàn)樵黾恿藴y量的速度，所以雙光束分光光度計(jì)在測量一些溶液隨時(shí)間動(dòng)態(tài)變化的研究中大有用處。
2.樣品類型
在大部分的樣品類型中，分光光度計(jì)可接受樣品孔、小玻璃管cuvette、吸漿管和微孔板。
用小試管裝樣品容量一般從1 μl-5ml，并且一些儀器裝備了各種樣品固定物來滿足各種改變需要。
3.光源和檢測方法
分光光度計(jì)的光譜也是需要考慮的一個(gè)重要因素。
紫外分光光度計(jì)一般覆蓋190nm和380nm波長，通常利用氘燈照明。一些特殊的儀器可以提供滿足光子學(xué)和半導(dǎo)體研究需要的光譜范圍。
有的儀器可以選擇 多種光源 ：紫外光、可見光和甚至紅外光（780 nm 至3,000 nm）。鎢燈和鹵素?zé)粢话阒桓采w可見光部分（大約380 nm 到800 nm）。而氙燈則可以覆蓋紫外光和可見光區(qū)域。
分光光度計(jì)的帶寬（bandwidth）很大程度上依賴于單色儀的狹縫的寬度?？梢酝渡涑鰧?shí)驗(yàn)要求的光譜。一種嚴(yán)格帶寬使得儀器能對(duì)復(fù)雜的混合物進(jìn)行高分辨率的吸光測量?？勺兊膯紊珒x的狹縫寬度能使一臺(tái)分光光度計(jì)滿足多種實(shí)驗(yàn)需要。
分光光度計(jì)通常使用光電倍增管和光敏二極管測量吸光值。
4.樣品類型
在大部分的樣品類型中，分光光度計(jì)可接受樣品孔、小玻璃管cuvette、吸漿管和微孔板。
用小試管裝樣品容量一般從1 μl-5ml，并且一些儀器裝備了各種樣品固定物來滿足各種改變需要。
5.數(shù)據(jù)管理
大部分單機(jī)型的分光光度計(jì)包含了驅(qū)動(dòng)儀器運(yùn)行和管理數(shù)據(jù)的軟件。高性能的儀器，通常與PC機(jī)一起聯(lián)用，需要從制造商提供額外的軟件。
由此可見紫外、可見分光光度計(jì)是一種常規(guī)的實(shí)驗(yàn)室分析儀器?？蓮V泛用于無機(jī)物、有機(jī)物的定性、定量分析中，在科研、制藥、化工、環(huán)保、衛(wèi)生、防疫等領(lǐng)域中發(fā)揮重要的作用。
紫外可見分光光度計(jì)引用新型技術(shù)，其功能強(qiáng)大，采用單色器技術(shù)，波長范圍190-1100nm，是各種涉及水和廢水分析領(lǐng)域的通用儀器，應(yīng)用范圍包括市政和工業(yè)廢水，飲用水，加工過程用水，地表水，冷卻水和鍋爐補(bǔ)給水等。 1、單光束UV：最傳統(tǒng)的紫外，單光源發(fā)射單光束，全程密閉，通過光柵，照射樣品，最后由光電倍增管監(jiān)測器檢測。 缺點(diǎn)：測完空白再測試樣品，全波段分析時(shí)間較長（一般2min）。 2、比例雙光束UV：單光源單光束，全程密閉，通過光柵，加入棱鏡，把光分為兩束，分別照射樣品與空白，再合并光，進(jìn)入光電倍增管檢測器，通過差減法計(jì)算結(jié)果。 好處：空白樣品同時(shí)檢測。 缺點(diǎn)：靈敏度下降，全波段分析時(shí)間較長。 3、雙光束UV：單光源單光束，全程密閉，通過棱鏡分出兩道光，分別通過一光柵，分別進(jìn)入各自的光點(diǎn)倍增管檢測器。 好處：加強(qiáng)靈敏度，同時(shí)測量空白與樣品。 缺點(diǎn)：全波段分析時(shí)間較長。 4、全波段UV：單光源單光束，樣品與空白暴露在空氣中，照射樣品，開始進(jìn)入密閉箱，通過光柵，進(jìn)入DAD檢測器。 好處：空白只需要檢測一次，如果你愿意一輩子檢測這一次都可以。檢測樣品不密閉，外界光線對(duì)其無影響，使用方便且精確。分析任何波段或全波段不到1s。 缺點(diǎn)：貴（25W）。
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