紫外分光光度計(jì)是實(shí)驗(yàn)室普及率很高的一種光譜儀器,由于靈敏度高、選擇性好、準(zhǔn)確度高、適用濃度范圍廣,而且分析成本低、操作簡(jiǎn)便、快速得到廣泛的應(yīng)用,長(zhǎng)期在分析領(lǐng)域扮演很重要的角色。
在選擇這類儀器時(shí)要考慮哪些因素呢?
1、光學(xué)構(gòu)造(OPTICALCONFIGURATION)
一般來說,紫外光分光光度計(jì)分為單光束和雙光束兩類。顧名思義,單光束型主要是依賴單束光進(jìn)行測(cè)量。一束給定波長(zhǎng)的光通過對(duì)照物,然后再通過實(shí)際樣品溶液,就能得到吸光結(jié)果。
雙光束型則是通過一個(gè)斬光輪(mirroredchopperwheel)將一束光分成兩束,分別測(cè)量對(duì)照樣品和實(shí)際樣品。
可以最小化光漂移(lampdrift)和減少測(cè)量時(shí)間。一些雙光型光度計(jì)不利用斬光輪,而是利用一種光束分光器來代替,將一束光分成兩束平行的光然后同時(shí)測(cè)量對(duì)照樣品和目的樣品。
因?yàn)樵黾恿藴y(cè)量的速度,所以雙光束分光光度計(jì)在測(cè)量一些溶液隨時(shí)間動(dòng)態(tài)變化的研究中大有用處。
2、光源和檢測(cè)方法(LIGHTSOURCESANDDETECTION)
分光光度計(jì)的光譜也是需要考慮的一個(gè)重要因素。實(shí)驗(yàn)室研究人員希望省錢購入專門儀器定量核酸、蛋白或者細(xì)菌的生長(zhǎng)情況。
例如AmershamBiosciencesofPiscataway公司的GeneQuantII能在230、260、280、320、595和600nm的波長(zhǎng)下測(cè)量樣品。果果需要更大的靈活性,研究者可以考慮一種更高性能的寬光譜儀器,可以程序性地進(jìn)行ELISAs分析和比色分析。
紫外分光光度計(jì)一般覆蓋190nm和380nm波長(zhǎng),通常利用氘燈照明。一些特殊的儀器可以提供滿足光子學(xué)和半導(dǎo)體研究需要的光譜范圍。
VarianofPaloAlto公司的CaryDeepUV和HitachiHighTechnologiesofTokyo的U-7000AutomatedVacuumUVSystem就是這樣的儀器。
一些儀器具有多種光源供選擇:
紫外光、可見光和甚至紅外光(780nm至3,000nm)。鎢燈和鹵素?zé)粢话阒桓采w可見光部分(大約380nm到800nm)。而氙燈則可以覆蓋紫外光和可見光區(qū)域。
分光光度計(jì)的帶寬(bandwidth)很大程度上依賴于單色儀的狹縫的寬度??梢酝渡涑鰧?shí)驗(yàn)精確要求的光譜。
一種嚴(yán)格帶寬使得儀器能對(duì)復(fù)雜的混合物進(jìn)行高分辨率的吸光測(cè)量。可變的單色儀的狹縫寬度能使一臺(tái)分光光度計(jì)滿足多種實(shí)驗(yàn)需要。
為了測(cè)量吸光值,分光光度計(jì)制造商通常使用光電倍增管(photo-multipliertubes,PMTs)和光敏二極管。
PMTs提供快速的反應(yīng)時(shí)間和良好的靈敏度,并且可以在紫外光譜調(diào)節(jié)至特定的范圍。但一些制造商依賴于光敏二極管的動(dòng)態(tài)范圍在數(shù)秒內(nèi)行使所有的光譜測(cè)量。
3、樣品類型(SAMPLEFORMAT)
在大部分的樣品類型中,分光光度計(jì)可接受樣品孔、小玻璃管cuvette、吸漿管和微孔板。微孔板主要是滿足高通量的需要和大規(guī)模的實(shí)驗(yàn)室需求。
但盡管對(duì)于小實(shí)驗(yàn)室來說,制造商仍然提供了多種容器轉(zhuǎn)換器來滿足通量的要求和減少實(shí)驗(yàn)時(shí)間。
用小試管cuvette裝樣品容量一般從1μl-5ml,并且一些儀器裝備了各種樣品固定物來滿足各種改變需要。體現(xiàn)了柔韌性。
4、數(shù)據(jù)管理(DATAMANAGEMENT)
大部分單機(jī)型的分光光度計(jì)包含了驅(qū)動(dòng)儀器運(yùn)行和管理數(shù)據(jù)的軟件。高性能的儀器,通常與PC機(jī)一起聯(lián)用,需要從制造商提供額外的軟件。同時(shí)用戶也可以選擇升級(jí)軟件以滿足他們的需要。
另外一個(gè)值得考慮的因素是數(shù)據(jù)的最終使用。各獨(dú)立實(shí)驗(yàn)室都有各自感興趣的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
例如一些藥物機(jī)構(gòu)需要考慮美國FDA的要求和歐聯(lián)盟的藥物評(píng)價(jià)機(jī)構(gòu)的要求選擇不同的數(shù)據(jù)處理方式。
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相關(guān)熱詞:
等離子清洗機(jī),反應(yīng)釜,旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀,高精度溫濕度計(jì),露點(diǎn)儀,高效液相色譜儀價(jià)格,霉菌試驗(yàn)箱,跌落試驗(yàn)臺(tái),離子色譜儀價(jià)格,噪聲計(jì),高壓滅菌器,集菌儀,接地電阻測(cè)試儀型號(hào),柱溫箱,旋渦混合儀,電熱套,場(chǎng)強(qiáng)儀萬能材料試驗(yàn)機(jī)價(jià)格,洗瓶機(jī),勻漿機(jī),耐候試驗(yàn)箱,熔融指數(shù)儀,透射電子顯微鏡。
原子熒光光度計(jì)工作原理
將樣品溶液中的待分析元素還原為揮發(fā)性共價(jià)氣態(tài)氫化物(或原子蒸汽),然后借助載氣將其導(dǎo)入原子化器,在氬-氫火焰中原子化而形成基態(tài)原子?;鶓B(tài)原子吸收光源的能量而變成激發(fā)態(tài),激發(fā)態(tài)原子在去活化過程中將吸收的能量以熒光的形式釋放出來,此熒光信號(hào)的強(qiáng)弱與樣品中待測(cè)元素的含量成線性關(guān)系,因此通過測(cè)量熒光強(qiáng)度就可以確定樣品中被測(cè)元素的含量。
產(chǎn)品特點(diǎn)
高精度原子化器高度自動(dòng)調(diào)節(jié)裝置
設(shè)計(jì)的原子化器高度自動(dòng)調(diào)節(jié)裝置采用人機(jī)對(duì)話,自動(dòng)控制原子化器高度調(diào)節(jié),更加方便快捷,而且保證了儀器的穩(wěn)定性,提高了儀器靈敏度。
屏蔽式石英爐原子化器
特制的雙層石英爐芯,有效地減少了熒光猝滅的發(fā)生,提高了儀器的精密度。
實(shí)用型空心陰極燈固定裝置
實(shí)驗(yàn)室分光光度計(jì)是利用分光光度法,通過測(cè)定被測(cè)物質(zhì)在特定波長(zhǎng)處或一定波長(zhǎng)范圍內(nèi)光的吸收度,對(duì)該物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析。
不同種類的分光光度計(jì)的基本原理相似,都是利用一個(gè)可以產(chǎn)生多個(gè)波長(zhǎng)的光源,通過系列分光裝置,從而產(chǎn)生特定波長(zhǎng)的光源。光源透過測(cè)試的樣品后,部分光源被吸收,通過測(cè)量樣品的吸光值,經(jīng)過計(jì)算可以轉(zhuǎn)化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。
分光光度計(jì)采用一個(gè)可以產(chǎn)生多個(gè)波長(zhǎng)的光源,通過系列分光裝置,從而產(chǎn)生特定波長(zhǎng)的光源,光源透過測(cè)試的樣品后,部分光源被吸收,計(jì)算樣品的吸光值,從而轉(zhuǎn)化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。
實(shí)驗(yàn)室分光光度計(jì)的使用方法
①首先接通電源,打開電源開關(guān)1,指示燈亮,打開比色皿暗箱蓋8,預(yù)熱20分鐘。
②波長(zhǎng)選擇旋鈕6,選擇所需的單色光波長(zhǎng),用靈敏度旋鈕2選擇所需的靈敏檔。
③放入比色皿,旋轉(zhuǎn)零位旋鈕5調(diào)零,將比色皿暗箱蓋合上,推進(jìn)比色皿拉桿3,使參比比色皿處于空白校正位置,使光電管見光,旋轉(zhuǎn)透光率調(diào)節(jié)旋鈕4,使微安表9指針準(zhǔn)確處于100%。按上述方法連續(xù)幾次調(diào)整零位和100%位,即可進(jìn)行測(cè)定工作。
實(shí)驗(yàn)室分光光度計(jì)使用和維護(hù)中應(yīng)注意事項(xiàng):
①連續(xù)使用儀器的時(shí)間不應(yīng)超過2小時(shí),*好是間歇0.5小時(shí)后,再繼續(xù)使用。
②比色皿每次使用完畢后,要用去離子水洗凈并倒置晾干后,存放在比色皿盒內(nèi)。在日常使用中應(yīng)注意保護(hù)比色皿的透光面,使其不受損壞或產(chǎn)生劃痕,以免影響透光率。
③儀器不能受潮。在日常使用中,應(yīng)經(jīng)常注意單色器上的防潮硅膠(在儀器的底部)是否變色,如硅膠的顏色已變紅,應(yīng)立即取出烘干或更換。
④在托運(yùn)或移動(dòng)儀器時(shí),應(yīng)注意小心輕放。
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