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延長色譜柱使用壽命的方法及操作規(guī)程

時間:2020-04-05    來源:儀多多儀器網(wǎng)    作者:儀多多商城     

延長色譜柱使用壽命的方法

  色譜柱是化學實驗中常見、常用的化工儀器之一,正確而有效的使用方法,不僅能夠延長色譜柱的使用壽命,也能確保試驗的準確性。

  1、保護柱

  保護柱是很短的色譜柱,填裝和液相色譜柱相同的填料。正確使用保護柱,可以起到阻攔一些容易損壞液相色譜柱的物質(zhì)的作用。從而達到延長柱子壽命的效果。相反,如果使用”保護柱”不當,可能會縮短色譜柱的使用壽命。例如,在保護柱使用過程中,如果污染達到一定程度而沒有及時更換,累積的雜物很可能會沖入色譜柱中,反而會造成色譜柱損壞。因此,在使用”保護柱”時,比較重要的是要知道什幺時候該換保護柱。該換的時候就必須要立即更換。

  2、選擇高品質(zhì)的色譜柱

  一般認為同一廠牌、同一型號的色譜柱之間的品質(zhì)都相同,對品質(zhì)管理很嚴格的廠家而言,這說法是成立的。但如果廠家品質(zhì)管理不夠嚴格,即使是同一批號的新色譜柱之間的品質(zhì)也有差異。所以,選用色譜柱時必須選擇管理嚴格的高品質(zhì)色譜柱,我們知道,任何色譜柱使用過后都會產(chǎn)生變化。尤其如在強酸或強堿條件下使用,色譜柱更易產(chǎn)生變化。因此,應盡量選用pH適用范圍大的色譜柱。在開發(fā)新分析方法時,許多專家建議不要使用舊色譜柱。因色譜柱一經(jīng)使用。柱性會改變;如此一來,使用舊色譜柱開發(fā)出來的新分析方法,很可能在再使用同廠牌的新色譜柱分析時。發(fā)生無法達到預定效果的情況??偟恼f。開發(fā)新分析方法時要使用品質(zhì)好的新色譜柱;并且一支色譜柱使用在一種分析方法上;則色譜柱壽命可以延長。

  3、定期沖洗色譜柱。

  一般柱子使用一段時間后總會有一些雜質(zhì)累積在柱內(nèi),而且這些雜質(zhì)不會隨著流動相出來,會逐漸影響柱子的品質(zhì)。這些雜質(zhì)在后來的分析譜圖上出現(xiàn)。從而造成出現(xiàn)怪峰、基線不平等現(xiàn)象。簡單的解決方法是用較強的流動相沖洗。而且每次分析某一產(chǎn)品完成后沖洗。如果分析時使用緩沖劑﹐可以用水來取代緩沖劑。先使用有機和水的混合溶液為流動相沖洗緩沖劑。接著再用100%有機溶劑沖洗。如果直接用100%有機溶劑沖洗的話,緩沖劑很可能會沉淀出來,而損壞色譜柱的品質(zhì)。使用10-20倍柱體積的量來沖洗基本就足夠了??梢詫?00%有機溶劑沖洗的條件加在分析實驗程序完畢后,如此一來每天在開機前都會用100%機溶劑沖洗。一般硅膠柱可以反沖洗處理﹐即是在將沖洗前將色譜柱倒反接后再沖洗。打算使用反沖洗處理前,先參考色譜柱的保養(yǎng)說明書。所以要真正保護色譜柱,使柱子的壽命延長,是使用”保護柱”和定期沖洗色譜柱

標簽: 色譜柱
色譜柱 延長色譜柱使用壽命的方法_色譜柱

色譜柱的維護方法

  色譜柱的使用壽命,除了與所分析的樣品和流動相及使用頻率有關(guān)系外,最主要的是與日常的維護密切相關(guān)。色譜柱的使用壽命主要是柱效和柱壓兩個指標來衡量,如果一支色譜柱柱效太低或柱壓太高,通常被認為該色譜柱已經(jīng)結(jié)束。因此,延長色譜柱使用壽命的關(guān)鍵是,消除引起柱效下降和柱壓升高的因素。以下是色譜柱的維護方法:

  一、流動相的PH應在使用的范圍內(nèi)

  流動相超過其PH范圍將會導致硅膠基質(zhì)流失和鍵合相碳鏈斷裂,使柱效下降,使用壽命變短。由于流動相的PH控制不當而對色譜柱造成的損害,通常很難是色譜柱恢復,因此必須認真對待,嚴格控制流動相的PH值。

  二、去除樣品和流動相中的固體顆粒

  樣品和流動相中含有的固體顆粒物質(zhì)會堵塞色譜柱篩板,篩板被堵住不僅會引起柱壓的升高,而且也會引起柱效下降,因為篩板的堵塞會引起液流不均,導致色譜峰型拖尾、變寬,從而使柱效下降。因此,建議使用超純水和色譜純試劑,在分析樣品前對樣品進行針筒過濾,流動相過0、45μm濾膜。

  三、使用保護柱或在線過濾器

  樣品和流動相經(jīng)過濾后并不能完全消除固體顆粒物質(zhì),因為泵的磨損、密封圈和管路的老化也會產(chǎn)生固體顆粒物質(zhì),這些固體顆粒被流動相帶入色譜柱,堵塞篩板,導致柱壓升高、柱效下降。保護柱和在線過濾器上都有篩板,其孔徑與色譜柱孔徑相同,因此可以阻止固體顆粒物質(zhì)到達色譜柱,有效防止色譜柱篩板的堵塞。由于柱壓升高在分析故障中占很大比例,因此,除對樣品和流動相進行過濾外,建議您在色譜柱進樣端加上保護柱或在線過濾器。

  如果色譜柱柱壓升高是由于進樣端篩板被堵引起的,可選擇以下方式進行補救:

  1、先在色譜柱前加上保護柱或在線過濾器,然后用甲醇、水=20/80ml/min反向沖色譜柱180min、

  2、先在色譜柱進樣端加上保護柱或在線過濾器,然后反向使用。

  四、正確使用緩沖鹽

  緩沖鹽通常易溶于水,難溶于有機溶劑,因此緩沖鹽使用不當會使其析出,堵塞填料基質(zhì)上的微孔和顆粒間的空隙,使填料板結(jié),柱壓上升;同時阻礙了基質(zhì)上鍵合的碳鏈自由舒展,使色譜柱的保留能力下降,柱效降低。緩沖鹽析出后,去除非常困難,因此,正確的使用緩沖鹽對延長色譜柱使用壽命非常重要。

  正確使用緩沖鹽的目的是防止緩沖鹽析出,因此正確使用緩沖鹽的方法可歸結(jié)為一句話:使用前要過濾,使用后要沖洗。具體方法如下:

  1、等度條件:使用緩沖鹽前和使用后需用過渡流動相以1、0ml/min流速沖洗60min;使用后去除緩沖鹽的另一個方法是用過渡流動相以0、2ml/min流速沖洗色譜柱過夜。

  2、梯度條件:用含有緩沖鹽的流動相跑梯度之前,用與初始流動相組成相同的過渡流動相以1、0ml/min流速沖洗60min,再用該過渡流動相以1、0ml/min沖洗色譜柱120min。含緩沖鹽流動相的梯度設(shè)定應盡量平緩,以避免梯度過程中緩沖鹽析出。

  注意:過渡流動相是指有機相和水相的組成與分析流動相相同,區(qū)別只是過渡流動相不含緩沖鹽。

  3、緩沖鹽析出的補救方法:

  方案1:用甲醇/20/80以1、0ml/min流速35攝氏度條件下反向沖洗色譜柱120min

  方案2:用甲醇/水=20/80以0、2ml/min流速反向沖洗色譜柱過夜。

  五、防止強保留物質(zhì)在色譜柱上存留

  強保留物質(zhì)和大分子化合物在色譜柱中累積,對樣品中的化合物產(chǎn)生額外的保留行為,不僅引起峰型變寬、拖尾,使柱效下降,同時也會引起保留時間的變化,累積到一定程度時還會導致柱壓升高。由于強保留物質(zhì)和大分子化合物對色譜分離的影響是一個累積效應,需要一定的時間才會體現(xiàn)出來,但對許多藥品特別是復雜樣品而言,很難判斷其是否是含有強保留物質(zhì),因此要防止強保留物質(zhì)的累積,需要在每天的日常維護中用純甲醇或乙氰清洗色譜柱。

標簽: 色譜柱
色譜柱 色譜柱的維護方法_色譜柱

色譜柱的再生

  高效液相柱是消耗品,會隨使用時間或進樣的次數(shù)增加,出現(xiàn)色譜峰高降低,峰寬加大或出現(xiàn)肩峰,柱效下降。需要定期進行徹底清洗和再生。

  1、反相柱

  分別用甲醇:水=90:10、純甲醇、二氯甲烷等溶劑著流動相,依次沖洗,每種流動相流經(jīng)色譜柱不少于20倍的色譜柱體積。然后再以相反的次序沖洗。

  2、正相柱

  分別用正己烷、異丙醇、二氯甲烷、甲醇等溶劑做流動相,順次沖洗,每種流動相流經(jīng)色譜柱不少于20倍的柱體積(異丙醇粘度大,可降低流速,避免壓力過高)。注意使用溶劑的次序不要顛倒,用甲醇沖洗完后,再以相反的次序沖洗至正己烷。所有的流動相必須嚴格脫水。

  3、離子交換柱

  長時間在緩沖溶液中使用和進樣,將導致色譜柱離子交換能力下降,。用稀酸緩沖溶液沖洗可以使陽離子柱再生,反之,用稀堿緩沖溶液沖洗可以使陰離子柱再生。

  用戶還可以選擇能溶解柱內(nèi)污染物的溶劑為流動相做正方向和反方向沖洗。但再生后的色譜柱柱效是不可能恢復到新柱的水平的。

  如果柱子裝反了,可以調(diào)回來,但可能會造成柱內(nèi)擔體塌陷。在不得已的情況下盡量不要反裝色譜柱。

標簽: 色譜柱
色譜柱 色譜柱的再生_色譜柱

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