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安捷倫液相色譜儀常見(jiàn)故障及相應(yīng)解決方法 如何挑選購(gòu)買(mǎi)液相色譜

時(shí)間:2020-07-20    來(lái)源:儀多多儀器網(wǎng)    作者:儀多多商城     

一、液相色譜儀峰分叉怎么回事?

  造成這種情況的原因一般是色譜柱被污染,或柱頭填料塌陷導(dǎo)致的。

  對(duì)于*種情況,先用純水反向沖洗柱子,然后換成甲醇沖洗,接著用甲醇+異丙醇(4+6)沖洗柱子(沖洗時(shí)間的長(zhǎng)短由樣品污染的情況而定),再換成甲醇沖洗,然后用純水沖洗,zui后甲醇沖洗正向沖洗柱子30分鐘以上。如沖洗后依然出峰不佳,則考慮第二種情況。

  對(duì)于第二種情況,擰開(kāi)柱頭,檢查柱填料是否硬結(jié)或塌陷。去除硬結(jié)部分(污染的填料),裝入新填料,滴一滴甲醇,填料下陷,再填,用與柱內(nèi)徑相同的頂端平滑的不銹鋼桿壓緊,再填平,滴甲醇,再壓緊反復(fù)幾次,直至裝滿(mǎn)填平。柱頭用甲醇沖洗干凈,擦凈柱外壁的填料,擰緊柱頭,用純甲醇沖洗30分鐘以上。

  二、如何排除液相色譜儀氣泡溢出的故障?

  流動(dòng)相內(nèi)產(chǎn)生都無(wú)法清除不斷產(chǎn)生的氣泡,主要是因?yàn)檫^(guò)濾器長(zhǎng)期沉浸于乙酸銨等緩沖液內(nèi),過(guò)濾器內(nèi)部由于霉菌的生長(zhǎng)繁殖,形成菌團(tuán),阻塞了過(guò)濾器,緩沖液難以流暢地通過(guò)過(guò)濾器,空氣在泵的壓力作用下經(jīng)過(guò)濾器進(jìn)入流動(dòng)相。

  過(guò)濾器浸泡于5%硝酸溶液中,超聲清洗幾分鐘即可;亦可將過(guò)濾器浸泡于5%硝酸溶液中12~36小時(shí),輕輕震蕩幾次,再將過(guò)濾器用純水清洗幾次,打開(kāi)泄壓閥,打開(kāi)purge鍵清洗脫氣,如仍有氣泡不斷從過(guò)濾器冒出,繼續(xù)將過(guò)濾器浸泡于5%硝酸溶液中,如沒(méi)有氣泡不斷從過(guò)濾器中冒出,說(shuō)明過(guò)濾器內(nèi)部的霉菌菌團(tuán)已被硝酸破壞,流動(dòng)相可以流暢地通過(guò)過(guò)濾器。打開(kāi)泄壓閥,打開(kāi)泵,流速調(diào)至1.0~3.0ml/min,純水沖洗過(guò)濾器1小時(shí)左右。即可將過(guò)濾器清洗干凈。關(guān)閉泄壓閥,純甲醇沖洗半小時(shí)即可。

  三、自檢時(shí),為什么有時(shí)會(huì)出現(xiàn)“鎢燈能量低”的錯(cuò)誤?

  一般來(lái)說(shuō),原因是系統(tǒng)中有擋光物,光路偏離,鎢燈電源系統(tǒng)或鎢燈燈泡已壞。這時(shí)首先要檢查光度室是否有擋光物;打開(kāi)檢測(cè)器光源室蓋,檢查氘燈是否點(diǎn)亮;如果氘燈不亮,則關(guān)機(jī),更換新氘燈,換時(shí),需注意型號(hào);檢查氘燈保險(xiǎn)絲,看是否松動(dòng)、氧化、燒斷;如果故障,應(yīng)立即更換;再開(kāi)機(jī)重新自檢;若仍出現(xiàn)上述故障,則重新安裝軟件后再進(jìn)行自檢。

  四、出現(xiàn)壓力波動(dòng)大,流量不穩(wěn)定該怎么辦?

  造成這種情況的原因是系統(tǒng)中有空氣或者單向閥的寶石球和閥座之間夾有異物,使得兩者不能密封。處理工作中注意觀察流動(dòng)相的量,保證不銹鋼濾器沉入儲(chǔ)液器瓶底,避免吸入空氣,流動(dòng)相要充分脫氣。如為單向閥和閥座之間夾有異物,拆下單向閥,放入盛有丙酮的燒杯用超聲波清洗。

  五、液相色譜儀峰面積重復(fù)性不好怎么回事?

  主要原因可能有進(jìn)樣閥漏液、加樣針不到位或液量不足。針對(duì)*種情況,處理時(shí)應(yīng)對(duì)更換進(jìn)樣閥墊圈;對(duì)于第二種情況保證加樣針插到底,注射樣品溶液后須快速、平穩(wěn)地從LOAD狀態(tài)轉(zhuǎn)換到INJECT狀態(tài),以保證進(jìn)樣量的準(zhǔn)確。日常工作中,液相色譜儀的保養(yǎng)非常重要,如要注意不要讓空氣進(jìn)入輸液系統(tǒng)和高壓泵中,儲(chǔ)液器內(nèi)的溶液如長(zhǎng)時(shí)間未用應(yīng)清洗儲(chǔ)液器并更換溶液,每次用完色譜儀后緩沖液要用純水沖洗干凈,防止無(wú)機(jī)鹽析出或沉積;樣品的前處理也很重要,任何樣品都要盡可能地去除雜質(zhì),完全溶解,盡量減少對(duì)色譜柱的污染,以延長(zhǎng)色譜柱的使用壽命,同時(shí)避免注射過(guò)濃的樣品溶液,以免殘留液在進(jìn)樣閥內(nèi)析出固體引起堵塞;色譜柱作好標(biāo)記,用于不同分析目的的色譜柱不要混用等。

  六、液相色譜儀液相色譜柱壓升高的原因是什么?

  造成柱壓升高的原因很多。一般是由于柱床內(nèi)產(chǎn)生了異常的占位性物體,造成流體阻力加大所引起的。例如,緩沖液鹽分如(乙酸銨等)沉積于柱內(nèi),或樣品污染沉積。針對(duì)*種情況,處理時(shí)應(yīng)先用40~50℃的純水,低速正向沖洗柱子,待柱壓逐漸下降后,相應(yīng)提高流速?zèng)_洗,柱壓大幅度下降后,用常溫純水沖洗,之后用純甲醇沖洗柱子30分鐘;對(duì)于第二種情況,由樣品的沉積引起污染的C18柱,和純水反向沖洗柱子,然后換成甲醇沖洗,接著用甲醇+異丙醇(4+6)沖洗柱子(沖洗時(shí)間的長(zhǎng)短由樣品污染的情況而定),再用換成甲醇沖洗,然后用純水沖洗,zui后甲醇沖洗正向沖洗柱子30分鐘以上。


高效液相色譜儀常用脫氣方法

  高效液相色譜儀(HPLC)現(xiàn)已成為有機(jī)化學(xué)分析的重要手段之一。同樣,在食品分析中,無(wú)論是殘留分析還是成分分析,HPLC也已成為不可或缺的分析儀器。和其它分析儀器一樣,你若想讓HPLC很好地為你工作、得到可靠的數(shù)據(jù),首先你要保養(yǎng)好它,使它處于一個(gè)良好的待機(jī)狀態(tài),這樣你操作它進(jìn)行分析時(shí)就可以比較順利地獲得理想的結(jié)果?! ×鲃?dòng)相脫氣對(duì)于避免HPLC系統(tǒng)出問(wèn)題,順利得到一個(gè)理想的數(shù)據(jù)是一個(gè)很有效的措施。HPLC系統(tǒng)內(nèi)是不能夠有氣泡存在的。HPLC泵在輸送液體時(shí)要產(chǎn)生很大的壓力,由于氣體的壓縮比與液體相比大的多,因而當(dāng)氣泡存在時(shí),你將觀察到瞬間的流速降低和系統(tǒng)壓力下降。如果這個(gè)氣泡足夠大,液相泵將不能輸送任何溶劑,而且如果壓力低于預(yù)先設(shè)定的壓力低限,泵將停止工作。有些泵設(shè)計(jì)可以很好地排除氣泡,而也有一些泵設(shè)計(jì)當(dāng)氣泡存在時(shí)將停止運(yùn)轉(zhuǎn)?! 〕S玫拿摎夥椒ㄓ腥缦聨追N:  1、吹氦脫氣法?! ±煤庠谝后w中溶解度比空氣低的特性,在0.1MPa壓力下,以約60 mL/min流速通入流動(dòng)相儲(chǔ)液容器中10~15min,可以很有效地從流動(dòng)相中排除溶解的空氣,能排除接近80%的氧氣。采用一個(gè)高效分布式噴射流裝置,一體積的氦氣可從流動(dòng)相中將等體積的幾乎全部氣體排除。這意味著1L氦氣通過(guò)1L流動(dòng)相就可完成排氣這個(gè)工作。這種脫氣方法雖然好,但我們國(guó)內(nèi)氦氣價(jià)格較高,很少有實(shí)驗(yàn)室采用此方法?! ?、加熱回流法?! 〈朔ǖ拿摎庑Ч^好。在操作時(shí)要注意冷凝塔的冷卻效率,否則溶劑會(huì)丟失,混合流動(dòng)相的比例會(huì)有變化?! ?、抽真空脫氣法?! 〈朔墒褂?font data-color="#0268CA">真空泵,降壓至0.05~0.07MPa即可除去溶解的氣體。但是由于真空脫氣會(huì)使混合溶劑組成發(fā)生變化,從而影響到實(shí)驗(yàn)的重現(xiàn)性,因此多用于單溶劑體系的簡(jiǎn)單分析?! ?、超聲波脫氣法?! ⒂摎獾牧鲃?dòng)相置于超聲波清洗器中,用超聲波震蕩10~20min。此法的脫氣效果最差。  5、在線脫氣法?! ‖F(xiàn)在商品的HPLC儀器,均可配在線脫氣機(jī)。在線脫氣使用簡(jiǎn)單,低故障,有效。建議購(gòu)買(mǎi)儀器時(shí)一定要購(gòu)買(mǎi),有的公司是作為選購(gòu)件,所以與儀器公司談配置時(shí)應(yīng)與公司確認(rèn)。

標(biāo)簽: 高效液相色譜儀
高效液相色譜儀 高效液相色譜儀常用脫氣方法_高效液相色譜儀



    醋,味酸性溫,不但是一種傳統(tǒng)的調(diào)味品,還有廣譜的醫(yī)療保健功能。食醋中含有大量的有機(jī)酸,其中含量較高的是醋酸和乳酸,它們是主要的功效成分和標(biāo)志性成分。關(guān)于有機(jī)酸的測(cè)定方法,目前,大都采用液相色譜法,相關(guān)的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)是GB/T5009,157《食品中有機(jī)酸的測(cè)定》,其適用范圍為果蔬及其制品、飲料等食品。


    接下來(lái)介紹一種食醋和醋粉中醋酸、乳酸的高效液相色譜測(cè)定方法。該方法樣品預(yù)處理簡(jiǎn)便有效,測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確,可作為食醋及醋粉質(zhì)量控制的分析方法。



    智能全控液相色譜系統(tǒng)由P600高壓恒流泵與UV600紫外檢測(cè)器直接構(gòu)成等度分析系統(tǒng)。使用WS600工作站可以同時(shí)控制數(shù)臺(tái)P600高壓恒流泵、UV600紫外檢測(cè)器及恒溫柱箱等,實(shí)行多元高壓洗脫、波長(zhǎng)掃描等功能。


    應(yīng)用領(lǐng)域

    化合物檢測(cè)、法醫(yī)毒物分析、蛋白質(zhì)組學(xué)食品檢測(cè)、藥物分析、環(huán)境分析、聚合物分析


    色譜條件:

    色譜柱:Hypersil C18(4.6mm×150mm,5um)

    流動(dòng)相:2.5%磷酸二氫銨用磷酸調(diào)節(jié)pH2.65

    流速:1.0mL/min

    進(jìn)樣量:5μL

    檢測(cè)波長(zhǎng):210nm


    測(cè)定結(jié)果:







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