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色譜儀測試過程中出現(xiàn)鬼峰如何解決 色譜儀如何操作

時間:2020-08-06    來源:儀多多儀器網(wǎng)    作者:儀多多商城     

鬼峰產(chǎn)生的緣由是多種多樣的,根據(jù)本人的閱歷以及文獻報道,將緣由歸結(jié)為以下幾個方面:
1、活動相、樣品稀釋液、儀器或是容器中存在雜質(zhì),當梯度開端時由于有機相比例不高,洗脫才干不強,雜質(zhì)在色譜柱柱頭富集,隨著活動相比例變化,洗脫才干增強,富集的雜質(zhì)被洗脫,從而構(gòu)成鬼峰。
2、活動相脫氣不完好??諝庠谟袡C相和水中的溶解度不同,當水和有機相混合時,氣泡就產(chǎn)生了
3、操作問題

1、試劑問題
a) 有機溶劑
甲醇制備工藝相對乙腈來說較為簡單,雜質(zhì)含量也較少。但是由于甲醇紫外吸收范圍比乙腈廣,所以當運用紫外檢測器時,特別是波長較低時,盡量運用乙腈作為有機相,用甲醇的話漂移太大。而用作梯度色譜的乙腈質(zhì)量懇求較高,普通用進口梯度色譜專用乙腈能夠很好的減少鬼峰的呈現(xiàn)。
b) 水
很多單位用自制蒸餾水作為水相,但是結(jié)果并不是很好。緣由就是一些低沸點的有機雜質(zhì)并不能夠經(jīng)過蒸餾除掉。有條件的盡量用HPLC級的純水,沒有條件的也可用娃哈哈或是屈臣氏等水替代,但是假設色譜條件比較嚴厲也是有可能出問題的。
c) 其它試劑
緩沖鹽、TFA、EDTA等試劑也會對活動相構(gòu)成很大的影響,盡量用純度高的試劑配制活動相。
2、儀器問題
a) 液相的活動相管路被污染。
長時間的運用含水量較高的活動相(特別是參與緩沖鹽的),細菌就容易在管路中滋生,細菌的代謝產(chǎn)物或是細胞碎片能構(gòu)成鬼峰。
b) 保送泵缺點,構(gòu)成系統(tǒng)壓力不穩(wěn),從而產(chǎn)生鬼峰。
c) 單向閥堵塞,構(gòu)成系統(tǒng)壓力不穩(wěn),從而產(chǎn)生鬼峰。早期島津的液相單向閥貌似不能用純乙腈作為活動相,往常應該曾經(jīng)得到改進。

1、 在線脫氣機脫氣不完好。
2、 兩種活動相的有機相比例相差太大。例如A為100%水,B為100%乙腈。在梯度條件允許的情況下盡量減少兩中活動相之間的差距,降低空氣在兩中活動相中溶解度的差異,從而減少氣泡的產(chǎn)生。
3、 活動相配置好后預先超聲脫氣。

1、活動相配置過程中遭到污染
a) 盛放活動相的容器或是量具遭到污染。
這種污染可能來自于洗濯劑、鉻酸洗液或是其他實驗人員用完后的殘留雜質(zhì)。活動相容器的清洗普通用干凈的水+有機溶劑涮洗就行,過多的清洗步驟反而可能構(gòu)成二次污染。有時活動相容器的塑料蓋碎片都有可能是雜質(zhì)的來源。
b) pH計。
很多pH計以聚碳酸酯作為外殼,但是聚碳酸酯是可以溶于有機溶劑的,所以盡量運用玻璃pH計來丈量活動相的pH。
c) 濾膜。
劣質(zhì)的或者型號錯誤的濾膜常常是鬼峰呈現(xiàn)的緣由。
d) 放置時間過長。
活動相在空氣中暴露時間過長,就可能吸收空氣中的有機雜質(zhì),有時活動相中的添加劑,例如TFA,時間長了會氧化從而產(chǎn)生雜質(zhì)。
2、儀器樣品稀釋液與活動相極性或者pH相差太大。
這也是招致鬼峰的緣由之一,這種問題很有可能招致樣品分為兩個不同的階段出峰,從而產(chǎn)生雙峰或者多峰。

薄層色譜儀的產(chǎn)品相關介紹  
薄層色譜法,是將適宜的固定相涂布于玻璃板、塑料或鋁基片上,成一均勻薄層。待點樣、展開后,與適宜的對照物按同法所得的色譜圖作對比,用以進行藥品的鑒別、雜質(zhì)檢查或含量測定的方法。
薄層色譜又叫薄板層析,是色譜法中的一種,是快速分離和定性分析少量物質(zhì)的一種很重要的實驗技術,屬固—液吸附色譜,它兼?zhèn)淞酥V和紙色譜的優(yōu)點,一方面適用于少量樣品(幾到幾微克,甚至0.01微克)的分離;另一方面在制作薄層板時,把吸附層加厚加大,因此,又可用來精制樣品,此法特別適用于揮發(fā)性較小或較高溫度易發(fā)生變化而不能用氣相色譜分析的質(zhì)。此外,薄層色譜法還可用來跟蹤有機反應及進行柱色譜之前的一種“預試”。
薄層色譜是在被洗滌干凈的玻板(10×3cm左右)上均勻的涂一層吸附劑或支持劑,帶干燥、活化后將樣品溶液用管口平整的毛細管滴加于離薄層板一端約1cm處的起點線上,涼干或吹干后置薄層板于盛有展開劑的展開槽內(nèi),浸入深度為0.5cm。待展開劑前沿離頂端約1cm附近時,將色譜板取出,干燥后噴以顯色劑,或在紫外燈下顯色。
薄層色譜(Thin Layer Chromatography)常用TLC表示,又稱薄層層析,屬于固-液吸附色譜。是近年來發(fā)展起來的一種微量、快速而簡單的色譜法,它兼?zhèn)淞酥V和紙色譜的優(yōu)點。一方面適用于小量樣品(幾到幾十微克,甚至0.01μg)的分離;另一方面若在制作薄層板時,把吸附層加厚,將樣品點成一條線,則可分離多達500mg的樣品。因此又可用來精制樣品。故此法特別適用于揮發(fā)性較小或在較高溫度易發(fā)生變化而不能用氣相色譜分析的物資。此外,在進行化學反應時,常利用薄層色譜觀察原料斑點的逐步消失來判斷反應是否完成。
氣體純度低對色譜儀的不良影響

  根據(jù)分析對象,色譜柱的類型,操作儀器的擋次和具體檢測器,若使用不合要求的低純度氣體,不良影響有以下幾種可能:  1)樣品失真或消失:如H2O氣使氯硅樣品水解;  2)色譜柱失效:H2O,CO2使分子篩柱失去活性,H2O氣使聚脂類固定液分解,O2使PEG斷鏈?! ?)有時某些氣體雜質(zhì)和固定液相互作用而產(chǎn)生假峰;  4)對柱保留特性的影響:如:H2O對聚乙二醇等親水性固定液的保留指數(shù)會有所增加,載氣中氧含量過高時,無論是極性或是非極性固定液柱的保留特性,都會產(chǎn)生變化,使用時間越長影響越大。  5)檢測器:  TCD:信噪比減小,無法調(diào)零,線性變窄,文獻中的校正因子不能使用,氧含量過大,使元件在高溫時加速老化,減少壽命?! ID:特別是在Dt≤1Ⅹ10ˉ⒒/秒下操做時,CH4等有機雜質(zhì),會使基流激增,噪聲加大不能進行微量分析?! CD:載氣中的氧和水對檢測器的正常工作影響最大,在不同的供電工作方式中,脈沖供電比直流電壓供電影響大,固定基流脈沖調(diào)制式供電比脈沖供電影響大。這就是為什么目前諸多在操作固定基流脈沖調(diào)制式ECD時,在載氣純度低時必須把載氣純度選擇開關從“標準氮”撥到“一般氮”位置的原因。大家會發(fā)現(xiàn)在此情況下操作,不但靈敏度變低,而且線性亦變窄了。實踐證明:在操作ECD時,載氣中的水含量低于0.02ppm,氧低于1ppm時可達到較理想的性能。值得指出的是,我們多次發(fā)現(xiàn)由于儀器的調(diào)節(jié)氣路系統(tǒng)被污染而造成的對載氣的二次污染至使ECD基頻大幅度增加使信燥比減小?! PD和NPD等常用檢測器,由于他們屬于選擇性檢測器,操做時要根據(jù)分析要求,特別注意被測敏感物質(zhì)中雜質(zhì)的去除。  6)在做程序升溫操作時,載氣中的某些雜質(zhì),在低溫時保留在色譜柱中,當拄溫升高時不但引起基線漂移還可能在譜圖上出現(xiàn)比較寬的"假峰"?! ?)儀器影響  a.各類過濾器加速失效;  b.調(diào)節(jié)閥(穩(wěn)壓閥,穩(wěn)流閥,針形閥)被污染,氣阻堵塞,調(diào)節(jié)精度降低或失靈;  c.氣路系統(tǒng)被污染,若要恢復儀器在高靈敏度情況下操做,有時要吹洗很長時間(可能一周以上)污染嚴重時有時再也無法恢復?! .檢測器的壽命,實踐表明,對ECD和TCD的壽命影響最明顯,應引起用戶特別注意

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色譜儀 氣體純度低對色譜儀的不良影響_色譜儀

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