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效液相色譜儀流動相溶劑的要求 液相色譜如何操作

時間:2020-08-06    來源:儀多多儀器網(wǎng)    作者:儀多多商城     
高效液相色譜儀流動相為溶劑,既有運載作用,又和固定相一樣,參與對組分的競爭,因此溶劑的選擇對分離十分重要。
一、溶劑對于待測樣品必須具有合適的極性和良好的選擇性。
二、溶劑要與檢測器匹配:
1、對于紫外吸收檢測器,應(yīng)選用檢測器波長比溶劑的紫外截止波長長。
溶劑的紫外截止波長指當(dāng)小于截止波長的輻射通過溶劑時,溶劑對此輻射產(chǎn)生強烈吸收,此時溶劑被看作是光學(xué)不透明的,會嚴(yán)重干擾組分的吸收檢測。
2、對于示差折光檢測器,要求選擇與組分折光率有較大差別的溶劑作流動相,以達(dá)最高靈敏度。
三、高純度:
由于高效液相色譜靈敏度高,對流動相溶劑的純度要求也高,不純的溶劑會引起基線不穩(wěn)或產(chǎn)生偽峰,痕量雜質(zhì)將使截止波長值增加 50~100nm。
四、化學(xué)穩(wěn)定性好:
不能選用與樣品發(fā)生反應(yīng)和聚合的溶劑。
五、低粘度:
常用的低粘度溶劑有丙酮、乙醇和乙腈等。
若溶劑粘度高,會增高壓力,不利于分離。但溶劑粘度過低(如戊烷等),易在色譜柱和檢測器內(nèi)形成氣泡,影響分離。

幾項液相色譜儀常見故障排除方法

  液相色譜儀結(jié)構(gòu)復(fù)雜,且不同型號的色譜儀,出故障時產(chǎn)生的現(xiàn)象有可能不同,以下幾項液相色譜儀常見故障排除方法僅供參考:

  1、檢測器開機時屏幕顯示不正常,出現(xiàn)缺字、坐標(biāo)圖形異樣、光標(biāo)無法移動等象

  原因:工作電源不正?;騼x器附件有強干擾源存在;

  排除方法:檢查工作電源電壓,采取穩(wěn)壓措施;關(guān)機后重新開機;檢測器微機系統(tǒng)故障;

  2、柱前壓力逐漸升高

  原因:

 ?。?)流動相中存在大顆粒的物質(zhì);

 ?。?)樣品未經(jīng)過過濾處理;

  (3)柱子輸入端濾片,污染;

  對應(yīng)排除方法:

  (1)流動相經(jīng)<5μ的真空抽濾瓶過濾后再使用;

  (2)樣品須經(jīng)濾膜過濾;

  (3)拆下柱的濾片用超聲波清洗,同時刮去柱口表面被污染的固定相;

  3、輸液泵壓力指示為零(或<0.5MPa)且柱后無液體流出

  原因:

 ?。?)柱前導(dǎo)管接頭漏液;

  (2)泵柱室內(nèi)有大量氣泡存在;

  (3)貯液瓶內(nèi)試劑用完;

 ?。?)輸液泵未工作;

  對應(yīng)排除方法:

 ?。?)檢查各接口是否有漏液;

 ?。?)放開泵出口接頭;用“清洗”鍵沖洗泵體;

  (3)添加流動相;

 ?。?)按輸液泵操作方法,檢查其工作狀態(tài);

  4、組分峰極小或不出峰

  原因:

 ?。?)波長選擇不正確;

  (2)檢測器輸出衰減太大;

 ?。?)進樣口漏液;

  (4)進樣閥樣品廢液管堵塞,樣品未進入定量管;

 ?。?)進樣后未按啟動鍵;

  (6)定量管容積過?。?/p>

 ?。?)樣品濃度過稀;

  (8)檢測器燈源老化或失效;

  (9)流動相不純;

  對應(yīng)排除方法:

 ?。?)按標(biāo)準(zhǔn)重新選擇波長;

  (2)重新選擇輸出量程范圍;

 ?。?)修理進樣閥;

  (4)拆下六通閥上廢液管(5#,6#)重新安裝;

 ?。?)進樣后立即按啟動鍵;

 ?。?)更換大容量定量管;

 ?。?)濃縮樣品后再進樣;

 ?。?)更換燈源;

 ?。?)選擇高純度的流動相;

  5、輸液泵壓力指示超過規(guī)定的范圍,且柱后無液體流出

  原因:

  (1)分離柱阻力過大(陳舊柱子);

  (2)柱前導(dǎo)管堵塞;

 ?。?)泵柱塞內(nèi)有少量氣泡存在;

 ?。?)柱子進口處過濾膜堵塞;

 ?。?)進樣閥手柄未旋到底(處于中間狀態(tài));

 ?。?)導(dǎo)管中有顆粒狀固體堵塞;

  對應(yīng)排除方法:

 ?。?)更換柱子;

 ?。?)從柱后開始逐級向上拆開接頭檢查;

  (3)拆開泵接頭,用“清洗”檔趕盡氣泡。;

 ?。?)拆開柱前接頭、更換或清洗過濾膜;

 ?。?)左右旋動六通閥至極限位置;

 ?。?)逐級檢查,并更換導(dǎo)管;

  6、基線大幅度波動(即紫外檢測器的輸出電平值極不穩(wěn)定)

  原因:流通池內(nèi)留有大量的氣泡;流通池漏液;紫外檢測器有故障

  對應(yīng)排除方法:排除氣泡;檢修流通池;停止恒流泵工作,檢查紫外檢測器

  7、溫度指示波動>±1℃

  原因:

  (1)設(shè)置溫度值過低;

 ?。?)柱箱密封蓋未蓋好;

 ?。?)溫度控制器未啟動;

 ?。?)柱箱升過高溫后,再設(shè)置低溫;

  (5)溫控部件有故障;

  (6)控溫鉑電阻接觸不良;

  對應(yīng)排除方法:

  (1)設(shè)置最低溫度應(yīng)室溫以上10℃;

  (2)檢查柱安裝過程;

  (3)按起始鍵(指示燈亮);

 ?。?)開機后會逐漸穩(wěn)定(正?,F(xiàn)象);

 ?。?)修理溫度控制器;

  (6)擰緊固定鉑電阻引線的螺釘;

標(biāo)簽: 液相色譜儀
液相色譜儀 幾項液相色譜儀常見故障排除方法_液相色譜儀
  【儀器網(wǎng) 使用手冊】色譜法的分離原理是溶于流動相(mobile phase)中的各組分經(jīng)過固定相時,由于與固定相(stationary phase)發(fā)生作用(吸附、分配、離子吸引、排阻、親和)的大小、強弱不同,在固定相中滯留時間不同,從而先后從固定相中流出的分離過程,其實質(zhì)是一個吸附與解吸附的平衡過程。
 
  色譜柱與流動相的溫度,影響著組分的分離平衡,對于使用柱溫箱的有益之處我們認(rèn)為有以下幾點:
 
  1. 可以使保留時間相對恒定,對需要進行的定性鑒別可提高其可信度;
 
  2. 保留時間相對恒定是進行定量的基礎(chǔ),不同的保留時間不僅不能判斷其成份的一致性,同時,由于保留時間不同峰面積也必將發(fā)生變化,其檢測結(jié)果的可信度將受質(zhì)疑。
 
  3. 溫差較大時,因保留時間不穩(wěn)將增加檢測工作的麻煩。
 
  4. 溫度低的時候,因流動相黏度增加而使檢測時間延長,同時增加泵的磨損,影響設(shè)備的使用壽命。
 
  5. 溫度低的時候還因溶解度相對下降而出現(xiàn)緩沖鹽結(jié)晶而堵塞泵、進樣閥、管道、色譜柱的現(xiàn)象。
 
  6. 溫度低時還因溶解度下降使雜質(zhì)吸附在填料上而難于洗脫,從而 影響色譜柱的使用壽命。
 
  ☆對于流動相溫度的控制目前沒有很好的方法,即使是整個室內(nèi)使用空調(diào)也難于使流動相的溫度保持一致,因此,目前大多采用控制柱溫的方法,使用柱溫箱能耗低,控溫精度高,是液相色譜儀必備的輔助設(shè)備,藥品標(biāo)準(zhǔn)中,有不少品種對柱溫也有明確要求。


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