薄層板在展開(kāi)中點(diǎn)樣離邊太近會(huì)出現(xiàn)邊緣效應(yīng)，這說(shuō)什么原因呢？
一般在薄層色譜中，薄層板兩邊展開(kāi)劑跑得比較快，使得展開(kāi)前沿形成一道弧線，稱為邊緣效應(yīng)。邊緣效應(yīng)的產(chǎn)生是由于溶劑的揮發(fā)造成的.展開(kāi)劑一般是由幾個(gè)有機(jī)溶劑混合而成的,而在薄層板上一般是邊緣上的展開(kāi)劑較容易揮發(fā),如果這幾個(gè)有機(jī)溶劑的揮發(fā)性能差異比較大,那么就會(huì)造成薄層板上邊緣和中間展開(kāi)劑比例的差異而產(chǎn)生展開(kāi)速度不一致的現(xiàn)象.如果展開(kāi)前能充分飽和,那么展開(kāi)過(guò)程中展開(kāi)劑揮發(fā)就會(huì)減少,從而減小邊緣效應(yīng).
【儀器網(wǎng) 使用手冊(cè)】薄層色譜又叫薄板層析，作為色譜法中的一種，它也是快速分離和定性分析少量物質(zhì)的一種很重要的實(shí)驗(yàn)技術(shù)，屬固—液吸附色譜。薄層色譜兼?zhèn)淞酥V和紙色譜的優(yōu)點(diǎn)，不僅適用于少量樣品的分離；而且在制作薄層板時(shí)，又可用來(lái)精制樣品，特別適用于揮發(fā)性較小或較高溫度易發(fā)生變化而不能用氣相色譜分析的質(zhì)。此外薄層色譜法還可以用來(lái)跟蹤有機(jī)反應(yīng)及進(jìn)行柱色譜之前的一種“預(yù)試”。
?1、簡(jiǎn)述
薄層色譜法，是將適宜的固定相涂布于玻璃板上，成一均勻薄層。等點(diǎn)樣、展開(kāi)后，與適宜的對(duì)照物按同法所得的色譜圖作對(duì)比，用以進(jìn)行藥品的鑒別，雜質(zhì)檢查或含量測(cè)定的方法。
2、儀器與材料
2.1 玻板：除另有規(guī)定外，用5cm×20cm，10cm×20cm或20cm×20cm的規(guī)格，要求光滑，平整、洗凈后的不附水珠，晾干。
2.2 固定相或載體：常用的有硅膠G、硅膠GF、硅膠H、硅膠HF254，其次有硅藻土、硅藻土G、氧化鋁、氧化鋁G、微晶纖維素、微晶纖維素F254等。其顆粒大小，一般要求直徑為10—40µm。薄層涂布，一般可分無(wú)粘合劑和含粘合劑兩種；前者系將固定相直接涂布于玻璃板上，后者系在固定相中加入一定量的粘合劑，一般常用10—15%煅石膏（CaSO4·2H2O在140℃烘4小時(shí)），混勻后加水適量使用，或用羧甲基纖維素鈉水溶液（0.5—0.7%）適量調(diào)成糊狀，均勻涂布于玻璃板上。也有含一定展開(kāi)液或緩沖液的薄層。
2.3 涂布器：應(yīng)能使固定相或載體在玻璃板上涂成一層符合厚度要求的均勻薄層。
2.4 點(diǎn)樣器：常用具支架的微量注射器或定時(shí)毛細(xì)管，應(yīng)能使點(diǎn)樣位置正確集中。
2.5 展開(kāi)室：應(yīng)使用適合薄層板大小的玻璃制薄層色譜展開(kāi)缸，并有嚴(yán)密蓋子，除另有規(guī)定外，底部應(yīng)平整光滑，應(yīng)便于觀察。
3 操作方法
3.1 薄層板制備：除另有規(guī)定外，將1份固定相和3份水在研缽中向一方向研磨混合，去除表面的泡后，倒入涂布器中，在玻璃板上平穩(wěn)地移動(dòng)涂布器進(jìn)行涂布（厚度為0.2—0.3mm），取下涂好薄層的玻璃板，置水平臺(tái)上于室溫下晾干，后在110℃烘30分鐘。即置有干燥劑的干燥箱中備用。使用前檢查其均勻度（可通過(guò)透射光和反射光檢視）。
3.2 點(diǎn)樣：除另有規(guī)定外，用點(diǎn)樣器點(diǎn)樣于薄層板上，一般為圓點(diǎn)，點(diǎn)樣基線距底邊2.0cm，點(diǎn)樣直徑為2——4mm，點(diǎn)間距離約為1.5—2.0cm，點(diǎn)間距離可視斑點(diǎn)擴(kuò)散情況以不影響檢出為宜。點(diǎn)樣時(shí)必須注意勿損傷薄層表面。
3.3 展開(kāi)：展開(kāi)室如需預(yù)先用展開(kāi)劑飽和，可在室中加入足夠量的展開(kāi)劑，并在壁上貼二條與室一樣高、寬的濾紙條，一端浸入展開(kāi)劑中，密封室頂?shù)纳w，使系統(tǒng)平衡或按正文規(guī)定操作。將點(diǎn)好樣品的薄層板放入展開(kāi)室的展開(kāi)劑中，浸入展開(kāi)劑的深度為距薄層板底邊0.5—1.0cm（切勿將樣點(diǎn)浸入展開(kāi)劑中），密封室蓋，等展開(kāi)至規(guī)定距離（一般為10—15cm），取出薄層板，晾干，按各品種項(xiàng)下的規(guī)定檢測(cè)。
? 如需用薄層掃描儀對(duì)色譜斑點(diǎn)作掃描檢出，或直接在薄層上對(duì)色譜斑點(diǎn)作掃描定量，則可用薄層掃描法。薄層掃描的方法，除另有規(guī)定外，可根據(jù)各種薄層掃描儀的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)及使用說(shuō)明，結(jié)合具體情況，選擇吸收法或熒光法，用雙波長(zhǎng)或單波長(zhǎng)掃描。由于影響薄層掃描結(jié)果的因素很多，故應(yīng)在保證供試品的斑點(diǎn)在一定濃度范圍內(nèi)呈線性的情況下，將供試品與對(duì)照品在同一塊薄層上展開(kāi)后掃描，進(jìn)行比較并計(jì)算定量，以減少誤差。各種供試品，只有得到分離度和重現(xiàn)性好的薄層色譜，才能獲得滿意的結(jié)果。
4 注意事項(xiàng)
4.1 所用玻璃板應(yīng)洗凈不掛水珠，光滑平整。
4.2 鋪板要均勻，厚度適宜，并于室溫下晾干后在110℃活化30分鐘，置于有干燥劑的干燥箱或干燥器中備用。
4.3 點(diǎn)樣點(diǎn)一般為圓點(diǎn)，不能太大
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